發(fā)布時間：2020-04-05 03:45

【摘要】： 背景 慢性阻塞性肺疾病(COPD)由于其患病人數(shù)多,死亡率高,社會負(fù)擔(dān)重,已成為一個重要的公共衛(wèi)生問題。目前,COPD居全球死亡原因的第4位,在未來的幾十年,其發(fā)病率和死亡率將會進(jìn)一步上升。COPD發(fā)病的分子和細(xì)胞學(xué)機(jī)制尚未完全明了。參與COPD的炎癥細(xì)胞主要有中性粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞以及淋巴細(xì)胞,淋巴細(xì)胞在COPD發(fā)病過程中如何發(fā)揮作用目前還不完全清楚。趨化因子是一類廣泛參與炎癥反應(yīng)的小分子蛋白,通過與趨化因子受體結(jié)合,誘導(dǎo)淋巴細(xì)胞定向遷移至特定部位,并產(chǎn)生局部免疫應(yīng)答,這可能是造成炎癥反應(yīng)的一個重要因素。趨化因子受體3(CXCR3)主要存在于T淋巴細(xì)胞表面,在T淋巴細(xì)胞向炎癥部位募集過程中可能起重要作用,對于該問題的探討,將有助于闡明淋巴細(xì)胞在COPD發(fā)病中的作用機(jī)制,為尋找新的治療靶點提供理論依據(jù)。 目的 一.探討外周血T細(xì)胞CXCR3的表達(dá)在COPD發(fā)病過程中所起的作用。 二.了解T細(xì)胞CXCR3表達(dá)的影響因素,如常用的治療COPD的藥物氨茶堿、糖皮質(zhì)激素對其的影響。 方法 一.將研究對象分為正常對照組(n=14)、COPD急性加重組(n=20)、COPD穩(wěn)定組(n=17)。急性加重期患者在入院初即采靜脈血1次。經(jīng)住院治療,待患者咳嗽、咳痰、氣短等癥狀明顯緩解后,再次采靜脈血1次。穩(wěn)定期患者及對照組就診時采靜脈血1次。分離外周血單個核細(xì)胞(PBMCs),標(biāo)記抗體,流式細(xì)胞儀檢測三組患者T細(xì)胞表面CXCR3的表達(dá)。 二.入選2個月內(nèi)未使用氨茶堿和激素的COPD穩(wěn)定期患者(n=12),分離PBMCs,分空白對照組、氨茶堿組(1.6μg/ml、16μg/ml)以及布地奈德組(3個濃度梯度0.1nmol/l、10nmol/l、1000nmol/l),37℃CO2培養(yǎng)箱孵育72小時,流式細(xì)胞儀檢測T細(xì)胞表面CXCR3的表達(dá)。 結(jié)果 一.COPD患者外周血T淋巴細(xì)胞表達(dá)CXCR3的研究結(jié)果：(1)三組間及COPD急性加重期組治療前后CD4+/CD8+T細(xì)胞分別占總T細(xì)胞的百分比,CD4+/CD8+的比值,差異無統(tǒng)計學(xué)意義,P0.05。(2) CD8+CXCR3+T細(xì)胞占總CD8+T細(xì)胞的百分比及CD4+CXCR3+T細(xì)胞占總CD4+T細(xì)胞百分比：COPD急性加重期組較COPD穩(wěn)定組及對照組明顯降低,COPD穩(wěn)定組較對照組明顯升高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義,P0.05。CD4+CXCR3+和CD8+CXCR3+T細(xì)胞上CXCR3的平均熒光強(qiáng)度(mean fluorescent intensity, MFI)三組間無明顯差異。(3) COPD急性加重期組經(jīng)治療后CD8+CXCR3+T細(xì)胞占總CD8+T細(xì)胞的百分比及CD4+CXCR3+T細(xì)胞占總CD4+T細(xì)胞百分比,CD4+CXCR3+和CD8+CXCR3+T細(xì)胞上CXCR3的MFI,均明顯降低,差異有統(tǒng)計學(xué)意義,P0.05。(4)相關(guān)性分析：COPD急性加重期治療前和穩(wěn)定期患者FEV1%預(yù)計值與CD4+、CD8+T細(xì)胞上CXCR3的表達(dá)均無相關(guān)性,P0.05。 二.氨茶堿及布地奈德對COPD患者T淋巴細(xì)胞表達(dá)CXCR3的影響研究：(1)氨茶堿組：CD8+CXCR3+T細(xì)胞占總CD8+T細(xì)胞的百分比：1.6μg/ml氨茶堿組、16μg/ml氨茶堿組與空白對照組比較有下降趨勢,但差異無統(tǒng)計學(xué)意義,P0.05；氨茶堿組間兩兩比較差異也無顯著性,P0.05。CD8+CXCR3+T細(xì)胞上CXCR3的MFI:1.6μg/ml氨茶堿組、16μg/ml氨茶堿組與空白對照組比較均下降,且差異具有統(tǒng)計學(xué)意義,P0.05。CD4+CXCR3+T細(xì)胞占總CD4+T細(xì)胞百分比以及CD4+CXCR3+T細(xì)胞上CXCR3的MFI：三組間差異無顯著性,P0.05。(2)布地奈德組：CD8+CXCR3+T細(xì)胞占總CD8+T細(xì)胞的百分比：0.1nmol/l、10nmol/l、1000nmol/l布地奈德組均顯著低于空白對照組,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義,P0.05；隨著藥物濃度的升高,CD8+CXCR3+T細(xì)胞占總CD8+T細(xì)胞的百分比逐漸下降,1000nmol/l布地奈德組較0.1nmol/l布地奈德組顯著降低,差異具有顯著性,P0.05。CD8+CXCR3+T細(xì)胞上CXCR3的MFI:0.1nmol/l、10nmol/l、1000nmol/l布地奈德組均較空白對照組下降,差異有顯著性,P0.05；布地奈德各組間差異無顯著性,P＞0.05。CD4+CXCR3+T細(xì)胞占總CD4+T細(xì)胞百分比：0.1nmol/l、10nmol/l、1000nmol/l布地奈德組與空白對照組比較呈下降趨勢,但無統(tǒng)計學(xué)差異，P＞0.05。CD4+CXCR3+T細(xì)胞上CXCR3的MFI:10nmol/l、1000nmol/l布地奈德組較空白對照組下降,差異有顯著性,P0.05。 結(jié)論 一.COPD急性加重期、穩(wěn)定期患者外周血CD4+、CD8+T占總T細(xì)胞的百分比及CD4+/CD8+T細(xì)胞比值較正常對照組無顯著性差異。二.COPD穩(wěn)定期患者T細(xì)胞上CXCR3的過度表達(dá)可能在COPD慢性炎癥過程中起作用。三.COPD患者外周血T細(xì)胞CXCR3的表達(dá)與疾病嚴(yán)重程度無關(guān)。四.小劑量及常規(guī)劑量氨茶堿對CD8+T細(xì)胞表達(dá)CXCR3+的百分比均無影響,但可使CD8+T細(xì)胞表達(dá)CXCR3的強(qiáng)度下降。五.糖皮質(zhì)激素布地奈德可以使CD8+T細(xì)胞表達(dá)CXCR3+的百分比及強(qiáng)度均下調(diào)。
【圖文】：

室內(nèi)外空氣污染逐步成為導(dǎo)致COPD的一個很重要的危險因素。己有證據(jù)表明，發(fā)生COPD的風(fēng)險與社會經(jīng)濟(jì)狀態(tài)呈負(fù)相關(guān)。充分認(rèn)識導(dǎo)致COPD的危險因素，有助于疾病的防治(圖2)。COPD發(fā)病的危險因素黝黝髓黝黝 參參麟械 械一 一_入向滋疇址二 {{{ GOLD2008圖2 1.1.2COPD患者淋巴細(xì)胞表面CXCR3表達(dá)的研究現(xiàn)狀COPD是一種慢性進(jìn)展性疾病，，主要以肺部不可逆的氣流受限和持續(xù)的炎癥反應(yīng)為主[5]。中性粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、CDS+T淋巴細(xì)胞參與了本病的炎癥過程[6、7]，最新的研究表明CD4+T淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞也可能參與了COPD的發(fā)病。已知COPD的發(fā)病較為復(fù)雜，不是某一種細(xì)胞或酶單獨完成的，而是多種炎癥細(xì)胞共同參與的復(fù)雜炎癥反應(yīng)。人們對中性粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和其細(xì)胞因子做了大量研究，對其在COPD發(fā)病中所起作用了解甚多，但對T淋巴細(xì)胞在COPD發(fā)病過程中如何發(fā)揮作用目前還不完全清楚。趨化因子受體3(CXCR3)

向角散射光(forewordscatter)，SSC代表細(xì)胞的大小，SSC反映細(xì)胞顆粒的復(fù)雜細(xì)胞群，曰709一11一13001，O尸‘O一。男?山氛彭一熟勺軍卜卜萬.力奮丈、、、FLZ剎eigh叱圖5圖中為同型對照
【學(xué)位授予單位】：南方醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2010
【分類號】：R563.9

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前2條

1 張曉群;駱明波;;CIN患者外周血CD4、CD8 T淋巴細(xì)胞的表達(dá)及意義[J];中國熱帶醫(yī)學(xué);2008年05期

2 ;慢性阻塞性肺疾病診治指南(2007年修訂版)[J];中華結(jié)核和呼吸雜志;2007年01期

本文編號：2614489