大氣混合污染物對(duì)大鼠肺臟HO-1蛋白變化的影響
發(fā)布時(shí)間:2017-03-22 01:10
本文關(guān)鍵詞:大氣混合污染物對(duì)大鼠肺臟HO-1蛋白變化的影響,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:隨著經(jīng)濟(jì)建設(shè)和工業(yè)化的進(jìn)展,環(huán)境大氣中顆粒污染物及多種氣體污染物日漸增多。本研究通過制備大氣混合污染物動(dòng)物模型的方法,在病理學(xué)及分子水平上,對(duì)環(huán)境大氣中所含顆粒污染物及多種氣體污染物引起肺損傷的作用機(jī)制加以探索和研究,分析血紅素氧合酶1(HO-1)在大氣混合污染物致肺損傷時(shí)的作用機(jī)制。 本實(shí)驗(yàn)所采用的試驗(yàn)動(dòng)物模型,為顆粒污染物及多種氣體污染物染毒大鼠,具體方法采用向大鼠進(jìn)行氣管內(nèi)注入PM2.5混懸液進(jìn)行染塵,然后,動(dòng)態(tài)吸入含有SO_2、NO_2及CO的空氣混合氣體進(jìn)行染毒,對(duì)大鼠的各種病變進(jìn)行觀察,從而模擬大氣污染所誘導(dǎo)的肺損傷。觀察染塵染毒后大鼠肺組織大體形態(tài)的病理學(xué)變化及分子水平變化,采用常規(guī)切片染色法觀察大鼠肺組織組織病理學(xué)變化,以RT-PCR技術(shù)分析大鼠肺組織中HO-1的mRNA表達(dá)的變化,采用Western blot法分析大鼠肺組織中HO-1蛋白的表達(dá)變化,采用免疫組化方法分析大鼠肺組織中HO-1蛋白的表達(dá)部位及變化,通過測(cè)定HO-1反應(yīng)系底物濃度變化,分析大鼠肺組織中HO-1蛋白活性的變化,通過上述方法,研究HO-1在大氣混合污染物誘導(dǎo)肺損傷時(shí)的分子及蛋白水平變化,探索肺損傷時(shí)其對(duì)機(jī)體的影響和作用機(jī)制。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,染毒組大鼠,于染毒后7d,肺組織與對(duì)照組相比出現(xiàn)充血、水腫、炎細(xì)胞浸潤(rùn)等病理變化,并持續(xù)至染毒后30d,染毒后30d大鼠肺組織出現(xiàn)水腫、炎細(xì)胞浸潤(rùn)等病理變化外,伴有部分間質(zhì)纖維組織增生,染毒組大鼠中,染毒后7d開始大鼠肺組織中HO-1的mRNA表達(dá)及蛋白水平與對(duì)照組相比明顯升高,并持續(xù)至染毒30d,免疫組化結(jié)果顯示,染毒7d組大鼠肺泡上皮細(xì)胞及巨噬細(xì)胞呈現(xiàn)HO-1陽(yáng)性,染毒后30d,大鼠肺泡和支氣管上皮細(xì)胞持續(xù)HO-1陽(yáng)性表達(dá),同時(shí),染毒組大鼠于染毒30d后HO-1蛋白活性比對(duì)照組明顯升高。 本研究提示在大氣混合污染物所致大鼠肺損傷的過程中,伴隨著HO-1基因及蛋白表達(dá)的增加,及HO-1蛋白活性的增強(qiáng)。本研究結(jié)果提示,HO-1參與大氣混合污染物所致肺損傷這一病理過程,在污染物所致肺損傷7天以后,HO-1誘導(dǎo)性增高,結(jié)合HO-1分解血紅素的生理作用和其代謝產(chǎn)物的影響,提示誘導(dǎo)HO-1增高可作為預(yù)防和保護(hù)大氣混合污染物所致肺損傷的一種方法,另外,在大氣混合污染物誘導(dǎo)肺損傷的過程中, HO-1基因及蛋白表達(dá)也可作為檢測(cè)早期肺損傷的敏感性指標(biāo)之一。
【關(guān)鍵詞】:HO-1 大氣混合污染物 大鼠 肺損傷
【學(xué)位授予單位】:吉林大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2013
【分類號(hào)】:R563.9;X503.221
【目錄】:
- 內(nèi)容提要4-6
- 中文摘要6-9
- Abstract9-15
- 前言15-17
- 第1章 文獻(xiàn)回顧17-21
- 1.1 血紅素氧合酶 1(HO-1)的分子生物學(xué)特性17-18
- 1.2 血紅素氧合酶 1(HO-1)的誘導(dǎo)和調(diào)節(jié)18
- 1.3 血紅素氧合酶 1(HO-1)和信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)18-19
- 1.4 血紅素氧合酶 1(HO-1)的抗炎癥作用19
- 1.5 血紅素氧合酶 1(HO-1)和肺臟疾患19-21
- 第2章 材料和方法21-31
- 2.1 實(shí)驗(yàn)技術(shù)路線圖21-22
- 2.2 主要儀器與設(shè)備22
- 2.3 主要試劑22-23
- 2.4 試劑配制23-24
- 2.5 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物24
- 2.6 試驗(yàn)方法24-30
- 2.6.1 大氣混合污染物的制備24
- 2.6.2 動(dòng)物分組及模型的制備24-25
- 2.6.3 標(biāo)本采集25
- 2.6.4 指標(biāo)檢測(cè)25-30
- 2.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理30-31
- 第3章 結(jié)果31-37
- 3.1 肺組織病理形態(tài)學(xué)改變和肺損傷程度評(píng)分31-32
- 3.1.1 肺組織病理變化光鏡觀察31-32
- 3.1.2 肺組織病理變化形態(tài)學(xué)評(píng)分:32
- 3.2 肺組織 HO-1mRNA 的表達(dá)32-33
- 3.3 肺組織 HO-1 蛋白的表達(dá)(Western blot)33-35
- 3.4 肺組織中 HO-1 蛋白的表達(dá)(免疫組化)35-36
- 3.5 肺組織 HO-1 的活性測(cè)定36-37
- 第4章 討論37-40
- 第5章 結(jié)論40-41
- 參考文獻(xiàn)41-45
- 致謝45
【參考文獻(xiàn)】
中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前5條
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本文關(guān)鍵詞:大氣混合污染物對(duì)大鼠肺臟HO-1蛋白變化的影響,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
,本文編號(hào):260576
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