大氣混合污染物對大鼠肺臟HO-1蛋白變化的影響
發(fā)布時間:2017-03-22 01:10
本文關(guān)鍵詞:大氣混合污染物對大鼠肺臟HO-1蛋白變化的影響,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:隨著經(jīng)濟建設(shè)和工業(yè)化的進展,環(huán)境大氣中顆粒污染物及多種氣體污染物日漸增多。本研究通過制備大氣混合污染物動物模型的方法,在病理學(xué)及分子水平上,對環(huán)境大氣中所含顆粒污染物及多種氣體污染物引起肺損傷的作用機制加以探索和研究,分析血紅素氧合酶1(HO-1)在大氣混合污染物致肺損傷時的作用機制。 本實驗所采用的試驗動物模型,為顆粒污染物及多種氣體污染物染毒大鼠,具體方法采用向大鼠進行氣管內(nèi)注入PM2.5混懸液進行染塵,然后,動態(tài)吸入含有SO_2、NO_2及CO的空氣混合氣體進行染毒,對大鼠的各種病變進行觀察,從而模擬大氣污染所誘導(dǎo)的肺損傷。觀察染塵染毒后大鼠肺組織大體形態(tài)的病理學(xué)變化及分子水平變化,采用常規(guī)切片染色法觀察大鼠肺組織組織病理學(xué)變化,以RT-PCR技術(shù)分析大鼠肺組織中HO-1的mRNA表達的變化,采用Western blot法分析大鼠肺組織中HO-1蛋白的表達變化,采用免疫組化方法分析大鼠肺組織中HO-1蛋白的表達部位及變化,通過測定HO-1反應(yīng)系底物濃度變化,分析大鼠肺組織中HO-1蛋白活性的變化,通過上述方法,研究HO-1在大氣混合污染物誘導(dǎo)肺損傷時的分子及蛋白水平變化,探索肺損傷時其對機體的影響和作用機制。 實驗結(jié)果顯示,染毒組大鼠,于染毒后7d,肺組織與對照組相比出現(xiàn)充血、水腫、炎細胞浸潤等病理變化,并持續(xù)至染毒后30d,染毒后30d大鼠肺組織出現(xiàn)水腫、炎細胞浸潤等病理變化外,伴有部分間質(zhì)纖維組織增生,染毒組大鼠中,染毒后7d開始大鼠肺組織中HO-1的mRNA表達及蛋白水平與對照組相比明顯升高,并持續(xù)至染毒30d,免疫組化結(jié)果顯示,染毒7d組大鼠肺泡上皮細胞及巨噬細胞呈現(xiàn)HO-1陽性,染毒后30d,大鼠肺泡和支氣管上皮細胞持續(xù)HO-1陽性表達,同時,染毒組大鼠于染毒30d后HO-1蛋白活性比對照組明顯升高。 本研究提示在大氣混合污染物所致大鼠肺損傷的過程中,伴隨著HO-1基因及蛋白表達的增加,及HO-1蛋白活性的增強。本研究結(jié)果提示,HO-1參與大氣混合污染物所致肺損傷這一病理過程,在污染物所致肺損傷7天以后,HO-1誘導(dǎo)性增高,結(jié)合HO-1分解血紅素的生理作用和其代謝產(chǎn)物的影響,提示誘導(dǎo)HO-1增高可作為預(yù)防和保護大氣混合污染物所致肺損傷的一種方法,另外,在大氣混合污染物誘導(dǎo)肺損傷的過程中, HO-1基因及蛋白表達也可作為檢測早期肺損傷的敏感性指標(biāo)之一。
【關(guān)鍵詞】:HO-1 大氣混合污染物 大鼠 肺損傷
【學(xué)位授予單位】:吉林大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2013
【分類號】:R563.9;X503.221
【目錄】:
- 內(nèi)容提要4-6
- 中文摘要6-9
- Abstract9-15
- 前言15-17
- 第1章 文獻回顧17-21
- 1.1 血紅素氧合酶 1(HO-1)的分子生物學(xué)特性17-18
- 1.2 血紅素氧合酶 1(HO-1)的誘導(dǎo)和調(diào)節(jié)18
- 1.3 血紅素氧合酶 1(HO-1)和信號轉(zhuǎn)導(dǎo)18-19
- 1.4 血紅素氧合酶 1(HO-1)的抗炎癥作用19
- 1.5 血紅素氧合酶 1(HO-1)和肺臟疾患19-21
- 第2章 材料和方法21-31
- 2.1 實驗技術(shù)路線圖21-22
- 2.2 主要儀器與設(shè)備22
- 2.3 主要試劑22-23
- 2.4 試劑配制23-24
- 2.5 實驗動物24
- 2.6 試驗方法24-30
- 2.6.1 大氣混合污染物的制備24
- 2.6.2 動物分組及模型的制備24-25
- 2.6.3 標(biāo)本采集25
- 2.6.4 指標(biāo)檢測25-30
- 2.7 統(tǒng)計學(xué)處理30-31
- 第3章 結(jié)果31-37
- 3.1 肺組織病理形態(tài)學(xué)改變和肺損傷程度評分31-32
- 3.1.1 肺組織病理變化光鏡觀察31-32
- 3.1.2 肺組織病理變化形態(tài)學(xué)評分:32
- 3.2 肺組織 HO-1mRNA 的表達32-33
- 3.3 肺組織 HO-1 蛋白的表達(Western blot)33-35
- 3.4 肺組織中 HO-1 蛋白的表達(免疫組化)35-36
- 3.5 肺組織 HO-1 的活性測定36-37
- 第4章 討論37-40
- 第5章 結(jié)論40-41
- 參考文獻41-45
- 致謝45
【參考文獻】
中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前5條
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本文關(guān)鍵詞:大氣混合污染物對大鼠肺臟HO-1蛋白變化的影響,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
,本文編號:260576
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