【摘要】：目的：測(cè)定肺炎克雷白桿菌肺炎小鼠治療前后支氣管肺泡灌洗液、血液及肺組織中sTREM-1的表達(dá)水平變化并與正常小鼠進(jìn)行對(duì)比，探討sTREM-1作為炎癥標(biāo)志物對(duì)肺炎克雷白桿菌肺炎的診斷意義。 方法：選取昆明小鼠分為生理鹽水對(duì)照組、肺炎組及治療組，每組20只。取自臨床感染病人痰培養(yǎng)獲得的肺炎克雷白桿菌，經(jīng)VITEK-2系統(tǒng)鑒定確認(rèn)，由氣管注入小鼠肺部，建立小鼠肺炎克雷白桿菌肺炎感染模型。對(duì)照組經(jīng)氣管緩慢注入等量無菌生理鹽水。選用頭孢他啶按成人與小鼠用藥系數(shù)計(jì)算出小鼠等效治療劑量，對(duì)治療組小鼠進(jìn)行腹腔注射治療，每日總藥量分兩次，每隔12小時(shí)一次，，治療三天。對(duì)存活小鼠的肺臟行大體標(biāo)本及病理組織學(xué)觀察。采用RT-PCR檢測(cè)各組小鼠肺組織IL-6基因表達(dá)情況；用ELISA法檢測(cè)各組小鼠肺泡灌洗液、血液及肺組織中sTREM-1表達(dá)含量變化以及血清CRP含量。實(shí)驗(yàn)結(jié)果采用SPSS15.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。 結(jié)果:對(duì)照組小鼠肺組織肉眼觀察示表面顏色紅潤(rùn)，質(zhì)地柔軟，肺組織無充血水腫現(xiàn)象。肺炎組肺組織顏色變深，質(zhì)地變硬，水腫及充血現(xiàn)象明顯，治療后肺組織炎癥反應(yīng)明顯減輕，顏色紅潤(rùn)，質(zhì)地柔軟，水腫及充血現(xiàn)象不明顯。IL-6標(biāo)準(zhǔn)化積分吸光度值（NII）肺炎組與對(duì)照組相比顯著增高，治療組與肺炎組相比明顯下降，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）。 sTREM-1在肺泡灌洗液、血液及肺組織中的表達(dá)含量，肺炎組分別為420.48±57.99pg/ml、2372.17±229.00pg/ml、522.81±56.24pg/ml，較對(duì)照組（分別為34.69±2.92pg/ml、296.52±28.63pg/ml、45.98±3.17pg/ml）明顯升高，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）；經(jīng)頭孢他啶治療后治療組三種樣本中的sTREM-1表達(dá)含量（分別為210.73±58.47pg/ml、694.30±116.19pg/ml、188.49±59.22pg/ml）較肺炎組比較均明顯下降，但仍高于對(duì)照組，均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）。 肺炎組與治療組肺組織sTREM-1與IL-6標(biāo)準(zhǔn)化積分吸光度值（NII）有明顯的相關(guān)性，肺組織sTREM-1隨IL-6NII增高而增高（P0.05），經(jīng)治療后sTREM-1隨IL-6NII降低而降低（P0.05）。肺炎組與治療組血清sTREM-1與CRP表達(dá)有明顯的相關(guān)性，sTREM-1隨CRP表達(dá)量增高而增高（P0.05），經(jīng)治療后sTREM-1隨CRP表達(dá)量降低而降低（P0.05）。 應(yīng)用ROC曲線評(píng)估sTREM-1與CRP診斷效能。血清sTREM-1ROC曲線下面積（AUC）為0.886，CRP為0.822，sTREM-1聯(lián)合CRP診斷的AUC為0.938。當(dāng)血清sTREM-1水平為915pg/ml時(shí)，診斷肺炎的敏感度為90%，特異度為65%，約登指數(shù)為0.55；當(dāng)血清CRP水平為2.82ng/ml時(shí)，診斷肺炎的敏感度為85%，特異度為75%，約登指數(shù)為0.6；sTREM-1聯(lián)合CRP診斷肺炎的敏感度為95%，特異度為80%，約登指數(shù)為0.75。 結(jié)論：小鼠肺炎克雷白桿菌肺炎肺泡灌洗液、血液、肺組織中sTREM-1表達(dá)明顯升高，經(jīng)治療后表達(dá)量均明顯下降，提示sTREM-1對(duì)細(xì)菌性肺炎的診斷有一定的參考價(jià)值。
【圖文】：

法炎克雷白桿菌菌懸液制備實(shí)驗(yàn)室鑒定的肺炎克雷白桿菌于 LB 固體培養(yǎng)基平板劃線取菌環(huán)接種到 LB 液體培養(yǎng)基中，水浴培養(yǎng)(37℃，190 rpm 處不同時(shí)間段細(xì)菌的吸光光度值（OD 值），繪制生長(zhǎng)長(zhǎng)曲線在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期較為合適的時(shí)間點(diǎn)(培養(yǎng)7～11小時(shí)驗(yàn)前一天挑單菌落至 LB 液體培養(yǎng)基，37℃水浴培養(yǎng) 8 小生理鹽水溶解稀釋，測(cè)定波長(zhǎng)為 620nm 處細(xì)菌稀釋液 O[10]。

結(jié) 果1.肺大體標(biāo)本與肺病理組織學(xué)觀察對(duì)三組小鼠肺大體標(biāo)本觀察，對(duì)照組小鼠肺部表面顏色鮮紅，肺組織較柔軟無明顯的組織充血水腫現(xiàn)象。肺炎組小鼠肺組織顏色變深、肺組織變硬及水腫充血現(xiàn)象明顯。治療組小鼠肺組織顏色紅潤(rùn)，質(zhì)地柔軟，炎癥反應(yīng)較輕，水腫及充血現(xiàn)象減輕，見圖 2。三組小鼠肺組織病理切片鏡下檢查顯示，對(duì)照組肺泡腔與肺泡壁界限清晰，無肺泡融合現(xiàn)象，肺泡腔內(nèi)無炎性細(xì)胞侵潤(rùn)。肺炎組肺泡壁與肺泡腔界限不清，出現(xiàn)肺泡壁組織融合現(xiàn)象，肺泡腔內(nèi)有大量中性粒細(xì)胞侵潤(rùn)。治療組與肺炎組比較，炎癥較輕，組織融合減輕，肺泡腔界限清晰，有少量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，見圖 3
【學(xué)位授予單位】：大連醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號(hào)】：R563.1

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2582355