【摘要】：目的： 建立大鼠慢性哮喘模型的基礎上觀察口服卡介苗多糖核酸(BCG-PSN)干預后哮喘大鼠氣道炎癥、氣道高反應性、脾臟CD4+CD25+Treg細胞數(shù)目、外周血清中工L-4和IFN-γ含量及腸粘膜sIgA含量的變化,探討口服BCG-PSN防治哮喘的可行性及免疫調(diào)節(jié)作用。 方法： 1.取雄性成年SD大鼠(體重160±20g)50只,分為五組：對照(Control)組、模型(Model)組、口服卡介苗(BCG)組、口服BCG-PSN組即BCG-PSN(A)組和肌注BCG-PSN組即BCG-PSN(B)組,各組10只。2.除Control組以外的其余四組大鼠分別于實驗第1天和第15天腹腔注射10%OVA混合液lml(含OVA100mg、氫氧化鋁100mg)致敏。第21天后再進行激發(fā),2%OVA2ml泵霧化吸入,每周3次,激發(fā)連續(xù)9周,構(gòu)建大鼠慢性哮喘模型,Control組致敏和激發(fā)均以生理鹽水代替。 3.藥物干預從實驗的第1天起開始,BCG組予BCG灌胃(50ug／次,2次／周,12周)；BCG-PSN (A)組予BCG-PSN灌胃(250ug/kg·次,2次／周,12周)；BCG-PSN(B)組予BCG-PSN肌注(45ug/kg·次,2次／周,12周)。 4.末次激發(fā)24小時內(nèi)麻醉動物,氣管插管后行氣道高反應性(airway hyper responsiveness,AHR)檢測；制備脾細胞懸液,通過流式細胞學檢測脾臟CD4+CD25+Treg細胞數(shù)目變化,了解BCG-PSN對調(diào)節(jié)性T細胞的影響；采用ELISA法檢測外周血清中IFN-γ和工L-4及腸道粘膜sIgA的含量,明確口服BCG-PSN對TH1/TH2細胞因子平衡及局部黏膜免疫的調(diào)節(jié)情況；腹主動脈放血處死大鼠,取各組動物BALF測定炎性細胞總數(shù)和EOS百分比,并行肺臟組織病理學檢查。 結(jié)果： 1.大鼠慢性哮喘模型的建立：與Control組相比,在激發(fā)過程中,Model組大鼠逐漸出現(xiàn)煩躁不安、呼吸急促、撓鼻、發(fā)紺、活動進食減少或俯臥不動、出現(xiàn)豎毛、毛發(fā)失去光澤甚至脫毛、反應遲滯等哮喘樣表現(xiàn)；同時Model組大鼠動物氣道高反應性測定顯示氣道阻力明顯增高,與Control組比較,差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05),且肺組織病理顯示：Model組氣道周圍有大量炎癥細胞浸潤,支氣管管壁增厚、管腔狹窄,氣道上皮細胞脫落,粘液分泌明顯增加。BALF細胞學顯示炎性細胞總數(shù)及EOS百分比與Control組比較明顯增加(P0.05),提示哮喘大鼠模型復制成功。 2.各組大鼠氣道高反應性值變化：各組大鼠用鹽酸組胺激發(fā),鹽酸組胺濃度從0.32mg/ml起,Model組、BCG組、BCG-PSN(A)組和BCG-PSN(B)組氣道阻力均明顯高于Control組(P＜0.05),差異有統(tǒng)計學意義。而組胺濃度從0.64mg/ml起,BCG-PSN(A)組氣道阻力明顯低于Model組(P0.05),差異有統(tǒng)計學意義；但明顯高于BCG-PSN(B)組(P＜0.05),差異有統(tǒng)計學意義,而與BCG組相比差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。 3.各組大鼠病理組織學變化：Model組氣道周圍炎癥改變明顯、支氣管管壁增厚、管腔狹窄,氣道上皮細胞脫落,粘液分泌明顯增加。BCG-PSN(A)組、BCG組及BCG-PSN(B)組與Model組相比,氣道周圍炎癥明顯減輕,氣道周圍炎癥細胞浸潤、氣道分泌物減少、支氣管壁增厚及上皮細胞脫落現(xiàn)象明顯改善。 4. BALF細胞學變化：BCG-PSN(A)組炎性細胞總數(shù)及EOS百分比明顯低于Model組(P＜0.05),但明顯高于BCG-PSN(B)組(P＜0.05),差異有統(tǒng)計學意義；而與BCG組相比差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。 5.外周血清中工FN-γ、IL-4含量：致敏、激發(fā)后Model組血清中IL-4的含量較Control組明顯升高(P0.05),IFN-γ的含量較Control組顯著降低(P0.05)；BCG-PSN(A)組工L-4含量明顯低于Model組(P0.05),而IFN-γ的含量明顯高于Model組(P0.05)；BCG-PSN(A)組IFN-γ含量明顯低于BCG-PSN(B)組(P0.05),而與BCG組相比差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。而BCG-PSN(A)組、BCG組與BCG-PSN(B)組三者之間血清IL-4的含量兩兩比較差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。 6.脾臟CD4+CD25+Treg/CD4+T細胞百分比：致敏、激發(fā)后Model組脾臟CD4+CD25-Treg/CD4+T細胞百分比較Control組明顯降低(P＜0.05)；BCG-PSN(A)組明顯高于Model組(P＞0.05),但顯著低于BCG-PSN(A)組(P＜0.05),與BCG組相比差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。 7.腸粘膜sIgA含量：Control組、Model組、BCG組、BCG-PSN(A)組和BCG-PSN(B)組相互之間sIgA含量差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。 結(jié)論： 1.OVA致敏,激發(fā)能夠成功構(gòu)建大鼠慢性哮喘模型。 2.口服BCG-PSN能夠降低哮喘大鼠氣道高反應性,部分抑制氣道炎癥、抑制EOS的募集。 3.口服BCG-PSN能升高血清中IFN-γ含量,降低血清中IL-4的含量,可調(diào)節(jié)THl/TH2平衡；哮喘大鼠脾臟CD4+CD25+Treg細胞數(shù)目下降,口服BCG-PSN干預CD4+CD25+Treg細胞數(shù)目上升. 4.口服BCG-PSN與肌注BCG-PSN在調(diào)節(jié)機體免疫方面有類似的作用,但其程度弱于肌注BCG-PSN。
【學位授予單位】：湖南師范大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2012
【分類號】：R562.25

【相似文獻】

相關期刊論文 前10條

1 孫志月;卡介苗多糖核酸治療哮喘的臨床觀察[J];醫(yī)學理論與實踐;2002年09期

2 羅秋平;卡介苗多糖核酸對小鼠外周血細胞的作用[J];浙江預防醫(yī)學;1996年06期

3 王麗麗;CO_2激光聯(lián)合卡介苗多糖核酸治療尖銳濕疣36例效果觀察[J];南通醫(yī)學院學報;2003年02期

4 鄭劍峰;黃文;;卡介苗多糖核酸治療小兒哮喘的兩種方法療效比較[J];臨床肺科雜志;2008年06期

5 朱培成;微波加卡介苗多糖核酸治療尖銳濕疣的臨床療效觀察[J];廣東藥學院學報;2000年02期

6 唐宕淥,李裕華;卡介苗多糖核酸治療慢性支氣管炎、肺心病40例[J];中國臨床藥理學與治療學;1999年01期

7 鄧輝,馬春清,方長明,張克盡,楊為民;微波加卡介苗多糖核酸聯(lián)合治療尖銳濕疣的臨床觀察[J];臨床外科雜志;2005年02期

8 邢尚安;;卡介苗多糖核酸與聚肌胞治療扁平疣52例療效觀察[J];中國醫(yī)療前沿;2009年18期

9 李慧,劉明星,王芳蓮,李向東;卡介苗多糖核酸防治老年慢性支氣管哮喘19例[J];第四軍醫(yī)大學學報;2002年05期

10 翟慶;卡介苗多糖核酸聯(lián)合維A酸霜治療扁平疣臨床療效觀察[J];臨床皮膚科雜志;2005年01期

相關會議論文 前10條

1 秦洪義;徐宏峰;;國產(chǎn)新藥—卡介苗多糖核酸防治變態(tài)(過敏)反應病臨床應用研究與開發(fā)[A];首屆全國中西醫(yī)結(jié)合變態(tài)反應學術會議論文匯編[C];2002年

2 鐘南山;;卡介苗多糖核酸在變應性疾病防治中的作用[A];第一屆全國變態(tài)反應學術研討會論文匯編[C];2001年

3 甘燕;李俊華;劉洪波;劉茂玲;張仁利;高世同;黃達娜;耿藝介;吳少庭;;抗SARS病毒重組BCG-M疫苗的構(gòu)建及其免疫學研究[A];全國人畜共患病學術研討會論文集[C];2006年

4 甘燕;吳少庭;李俊華;劉洪波;黃達娜;余新炳;;抗SARS病毒重組BCG-M疫苗的構(gòu)建及其免疫學研究[A];全國寄生蟲學與熱帶醫(yī)學學術研討會論文集[C];2006年

5 胡琳潔;郭曉雅;侯美娜;邵成;史皆然;;評價空腸彎曲菌外膜蛋白PEB1介導的重組BCG與上皮細胞的結(jié)合能力[A];中華醫(yī)學會呼吸病學年會——2011（第十二次全國呼吸病學學術會議）論文匯編[C];2011年

6 Michael Graner;;Evaluation of performance of an In-house Interfer on-gamma Elispot assay for Latent Tuberculosis in BCG Vaccinated individuals[A];全國第3屆中西醫(yī)結(jié)合傳染病學術會議暨中國中西醫(yī)結(jié)合學會傳染病專業(yè)委員會第2屆委員會議論文匯編[C];2010年

7 李俊華;吳少庭;翁亞彪;甘燕;劉洪波;劉茂鈴;張仁利;高世同;黃達娜;耿藝介;;弓形蟲GRA4基因和SAG2基因的重組BCG疫苗對小鼠免疫效果的比較研究[A];全國寄生蟲學與熱帶醫(yī)學學術研討會論文集[C];2006年

8 李俊華;吳少庭;翁亞彪;甘燕;劉洪波;劉茂鈴;張仁利;高世同;黃達娜;耿藝介;;弓形蟲GRA4基因和SAG2基因的重組BCG疫苗對小鼠免疫效果的比較研究[A];全國人畜共患病學術研討會論文集[C];2006年

9 屈朔瑤;歐陽海峰;史皆然;吳昌歸;;Der p2重組BCG對哮喘小鼠肺組織中IL-17表達及Th17細胞分化的影響[A];中華醫(yī)學會呼吸病學年會——2011（第十二次全國呼吸病學學術會議）論文匯編[C];2011年

10 韓國梁;楊曉峰;田平貴;;Ag85A和Ag85B DNA疫苗對大鼠原位膀胱腫瘤免疫治療的效果[A];第十五屆全國泌尿外科學術會議論文集[C];2008年

相關重要報紙文章 前10條

1 許以平;治過敏性鼻炎可用卡介苗多糖核酸[N];大眾衛(wèi)生報;2004年

2 記者 趙霞;BCG為電信企業(yè)支招[N];計算機世界;2002年

3 本報記者 陳嘉頌;國內(nèi)軟件破解組織揭秘[N];電腦報;2002年

4 記者 王京韜;一家獨大市場難活[N];中華工商時報;2001年

5 陳漢娜;患了肺氣腫怎么辦？[N];大眾衛(wèi)生報;2003年

6 本報記者 楊光;積極應對三大挑戰(zhàn)[N];中國財經(jīng)報;2002年

7 記者 程暉;中國巨富家庭數(shù)量全球第三[N];中國經(jīng)濟導報;2009年

8 徐桂蘭;美國網(wǎng)絡零售業(yè)商機猶存[N];廠長經(jīng)理日報;2000年

9 記者 趙明;如何應對奧運級別的競爭[N];中國經(jīng)濟時報;2001年

10 記者 盧潔葵;面對國際資本進入的嚴峻形勢 江西移動未雨綢繆[N];人民郵電;2001年

相關博士學位論文 前10條

1 張根生;減毒活菌卡介苗（BCG）早期接種對哮喘小鼠氣道炎癥保護作用及其免疫機制研究[D];浙江大學;2010年

2 屈朔瑤;Der p2重組BCG疫苗調(diào)控哮喘小鼠DC表型及功能的研究[D];第四軍醫(yī)大學;2012年

3 李彩霞;豬苓及豬苓多糖對TLR介導的BCG抗大鼠膀胱癌的免疫調(diào)節(jié)機制研究[D];廣州中醫(yī)藥大學;2010年

4 趙向峰;BCG活化巨噬細胞膜表面新蛋白NMAAP1、Trim59的克隆、表達及功能鑒定[D];吉林大學;2010年

5 周蕾;弗氏不完全佐劑加BCG熱休克蛋由65對大鼠關節(jié)炎的誘導[D];吉林大學;2012年

6 郭亞南;卡介菌多糖核酸對小鼠特應性皮炎模型的影響[D];中南大學;2010年

7 張慶勇;大腸桿菌麥芽糖結(jié)合蛋白（MBP）免疫增強活性及抗腫瘤作用研究[D];吉林大學;2011年

8 陽大慶;鳥分枝桿菌脂類降低小鼠抗結(jié)核免疫反應的研究[D];南方醫(yī)科大學;2011年

9 柴晶晶;呼出氣一氧化氮正常值測定及慢性阻塞性肺疾病評估測試的臨床應用[D];北京協(xié)和醫(yī)學院;2011年

10 劉玉英;TLR激動劑、BCG和真菌多糖CFX調(diào)節(jié)心血管免疫微環(huán)境逆轉(zhuǎn)高血壓所致心血管肥厚和心臟纖維化[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學;2007年

相關碩士學位論文 前10條

1 羅睿;口服卡介苗多糖核酸治療哮喘大鼠免疫調(diào)節(jié)作用研究[D];湖南師范大學;2012年

2 朱岳;卡介苗多糖核酸下調(diào)急性哮喘小鼠CD4~+T細胞IL-17的表達[D];中南大學;2010年

3 鄭亮;BCG-CpG-DNA免疫毒性研究[D];福建醫(yī)科大學;2010年

4 蔡皇界;BCG-CpG-DNA一般藥理學作用及安全性評價[D];福建醫(yī)科大學;2011年

5 王靜嫻;PPE68重組BCG誘導機體免疫應答的探討[D];重慶醫(yī)科大學;2012年

6 潘永軍;不同類型CG膀胱灌注BCG的臨床觀察[D];重慶醫(yī)科大學;2010年

7 胡琳潔;空腸彎曲菌外膜蛋白PEB1介導的重組BCG與上皮細胞結(jié)合能力的研究[D];第四軍醫(yī)大學;2011年

8 姜雯雯;AMM亞單位疫苗加強BCG初免的不同免疫程序的研究[D];蘭州大學;2010年

9 崔艷紅;BCG對哮喘大鼠Th1/Th2平衡的調(diào)節(jié)及其對血管重塑的影響[D];河北醫(yī)科大學;2011年

10 鄭佳玉;BCG與嵌合ESAT-6重組鞭毛蛋白的聯(lián)合黏膜免疫及其特性分析[D];揚州大學;2010年

，

本文編號：2544409