本文關鍵詞：Claudin在銅綠假單胞菌感染所致急性肺損傷中表達變化及其意義，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：第一部分Claudin在銅綠假單胞菌感染所致急性肺損傷中表達變化情況 目的本實驗通過建立大鼠肺損傷模型,旨在研究claudin在銅綠假單胞菌(PA)感染所致急性肺損傷(ALI)中的表達變化情況及其可能的意義。 方法實驗選用清潔級SD大鼠,隨機分為正常大鼠(N組)、陰性對照組(C組)和銅綠假單胞菌組(P組),C組和P組分別設氣道滴入生理鹽水(NS)或PA后3h、9h和24h三個時間點。腹主動脈抽血行動脈血氣分析；腹腔放血處死后,收集肺組織標本,行肺泡灌洗術,檢測肺泡灌洗液(BALF)中總蛋白濃度；HE染色光鏡下觀察肺組織病理改變情況并行肺損傷評分,以評價造模后肺損傷程度。檢測肺組織mRNA及蛋白水平claudin-3、-4、-18和-5表達,以觀察PA感染所致肺損傷中claudin表達變化情況。 結果P組各個時間點動脈血氧分壓均較N組和C組各個時間點下降,P-24h下降與P-3h、P-9h比較有顯著差異：BALF中總蛋白濃度P組較N組和C組各個時間點有明顯升高,P-3h、P-9h、P-24h總蛋白濃度顯著逐漸增高。光鏡下可見P組有明顯病理改變,P-3h有少許炎性細胞浸潤；P-9h肺泡腔增寬,肺泡間隔內大量中性粒細胞浸潤：P-24h可見肺泡間隔增寬更為明顯,有大量中性粒細胞浸潤,伴肺泡間隔內毛細血管擴張、充血和部分肺不張；肺損傷評分P-24h顯著高于P-3h、P-9h。Claudin-4、-18和-5mRNA在P-24h時顯著增高而claudin-3mRNA則無明顯變化；claudin-3、-4、-18和-5蛋白水平均無明顯變化。 結論1.大鼠氣道內注入PA出現病理生理學變化,時間越長損傷越明顯,以P-24h損傷最為嚴重。2.Claudin-4、-18和-5mRNA在損傷最重的P-24h表達明顯高于其他時間點以及C組、N組,而claudin-3、-4、-18和-5蛋白水平則沒有明顯改變,肺組織中claudin-4、-18和-5mRNA增高可能是肺損傷早期增強上皮屏障功能的一種保護性機制。 第二部分Claudin在銅綠假單胞菌所致急性肺損傷中表達變化的意義 目的本實驗通過建立大鼠肺損傷模型,觀察PA引起的claudin表達改變對緊密連接(TJs)結構的影響,并在BALF中檢測claudin蛋白的變化,分析其與肺損傷程度的相關性,以了解claudin對肺損傷的意義。 方法電鏡下觀察肺泡上皮細胞、肺血管內皮細胞以及上皮細胞之間的TJs結構；檢測肺組織表面活性蛋白SP-A、SP-B和SP-C,假性血管性血友病因子(vWF)mRNA表達情況；行肺泡灌洗術,檢測BALF中claudin-3、-4、-18和-5濃度并對BALF中claudin的含量與肺損傷評分做spearman相關分析,分析claudin表達變化在急性肺損傷中的意義。 結果電鏡觀察P組肺組織超微結構呈現病理變化,P-3h肺泡上皮細胞輕度破壞,細胞之間TJs較正常。P-9h肺泡上皮細胞特別是I型肺泡上皮細胞明顯破壞,腫脹、呈空泡狀,TJs不緊密。P-24h I型肺泡上皮翹起、呈空泡狀、部分上皮結構消失,可見內皮細胞破裂,嚴重處可見氣血屏障三層結構均破壞,TJs結構不易在鏡下找到。肺組織SP-A、SP-B、SP-C及vWF mRNA表達P組各個時間點與C組各個時間點及N組之間均無顯著變化。BALF中claudin-3、-4和-18在N組和C組各個時間點含量均較低,而在P組明顯增高,且P-3h、P-9h、P-24hBALF中claudin含量顯著逐漸增高,spearman相關分析顯示BALF中claudin-3、-4和-18含量分別與肺損傷評分顯著正相關。Claudin-5在N組和C組各個時間點含量低,在PA造模后3h迅速增高,9h、24h較3h略有增高,claudin-5與肺損傷評分無明顯相關性。 結論1BALF中Claudin-3、-4和-18含量在P-3h、P-9h和P-24h逐漸升高,并與肺損傷嚴重程度正相關,可能成為PA感染所致ALI早期肺泡上皮細胞損傷潛在的分子標記物。2.BALF中claduin-5含量在3h、9h和24h均升高但與肺損傷嚴重程度無明顯相關,提示BALF中claduin-5含量增高不能作為早期肺損傷微血管內皮細胞破壞的分子標記物。
【關鍵詞】：Claudin 急性肺損傷 銅綠假單胞菌 Claudin 急性肺損傷 肺泡灌洗液 超微結構
【學位授予單位】：復旦大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2012
【分類號】：R563.8
【目錄】：

• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-9
• 引言9-14
• 參考文獻11-14
• 第一部分 Claudin在銅綠假單胞菌感染所致急性肺損傷中表達變化情況14-40
• 前言14-15
• 材料和方法15-25
• 結果25-33
• 討論33-36
• 參考文獻36-40
• 第二部分 Claudin在銅綠假單胞菌感染所致急性肺損傷中表達變化的意義40-58
• 前言40-41
• 材料與方法41-47
• 結果47-54
• 討論54-56
• 參考文獻56-58
• 全文小結58-59
• 綜述59-68
• 參考文獻64-68
• 碩士期間成果68-69
• 致謝69-71

【參考文獻】

中國期刊全文數據庫 前4條

1 宋琳,瞿介明;銅綠假單胞菌肺部炎癥及其肺損傷的發(fā)病機制[J];國外醫(yī)學.呼吸系統(tǒng)分冊;2005年07期

2 王志芳;張旭剛;;呼吸道感染的銅綠假單胞菌質粒介導的AmpCβ-內酰胺酶耐藥性研究[J];臨床薈萃;2007年24期

3 李倬哲,瞿介明,何禮賢,陳雪華,王葆青;粒細胞減少大鼠銅綠假單胞菌肺部感染模型的建立及炎癥反應研究[J];中華結核和呼吸雜志;2001年11期

4 程曉明,朱波,張彥琦,錢桂生;急性肺損傷和急性呼吸窘迫綜合征604例臨床分析[J];中國現代醫(yī)學雜志;2004年15期

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本文編號：254068