肺炎性衰老的機制與白藜蘆醇的干預(yù)研究
本文關(guān)鍵詞:肺炎性衰老的機制與白藜蘆醇的干預(yù)研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:目的:應(yīng)用基因芯片技術(shù)篩選炎性衰老特征性的炎癥細(xì)胞因子與受體基因,以及白藜蘆醇作用的靶基因,同時檢測老年大鼠肺組織中炎性衰老特征性炎性細(xì)胞因子IL-1β、IL-6、IL-10 和 TNF-α mRNA表達水平及白藜蘆醇的干預(yù)作用。探討炎性衰老在機體衰老中的作用,以及白藜蘆醇干預(yù)衰老的可能機制方法:1、清潔級雄性健康SD大鼠30只,隨機分為4m、24m和24m+白藜蘆醇(Res)三組,每組各10只。自21月滿當(dāng)天開始,24m+Res組予Res(按60mg/kg/d,融于5ml蒸餾水中)灌胃;24m組給予等量蒸餾水灌胃,連續(xù)90天。分別取出各組大鼠的肺組織。(1)應(yīng)用包含112個DNA的炎癥細(xì)胞因子與受體基因芯片對4m、24m和24m+Res各組大鼠肺組織基因表達進行檢測。提取等量的大鼠肺組織mRNA后,分別用cy-3、cy-5逆轉(zhuǎn)錄熒光標(biāo)記,制作cDNA探針,混合后與上述微矩陣芯片雜交。用Scan Array 3000掃描儀掃描雜交信號熒光強度,并利用生物信息學(xué)方法對檢測結(jié)果進行分析,分別繪制4m、24m和24m+Res各組肺組織基因表達譜,對芯片資料進行統(tǒng)計分析以尋找待比較組之間有表達差異的基因。2、取各組大鼠肺組織,抽取總mRNA.采用Realtime PCR法檢測肺組織中IL-1β、IL-6、IL-10和TNF-α mRNA表達水平。結(jié)果:1、在肺組織中,與4m組相比,24m組表達上調(diào)(信號比的對數(shù)值SLR2)的促炎性反應(yīng)細(xì)胞因子與受體基因10個:Cxcl2、IL-1α、IL-1β、IL-2、IL-1r Ⅱ、IL-6、IL-7、TNF、TNFsf4、TNFsf11,表達下調(diào)(SLR-2)的抗炎細(xì)胞因子與受體基因有:IL-10rα、TGF-α、TGF-β1共3個。與24m組相比,24m+Res組中表達上調(diào)(SLR2)的抗炎細(xì)胞因子與受體基因有:IL-10、IL-10rα、 Ccl2、TGF-β3、TGF-βrII共5個,下調(diào)(SLR-2)的促炎細(xì)胞因子與受體基因有:IL-1β、IL-6、TNF、TNFsf4共4個;上述各組之間的比較都具有統(tǒng)計學(xué)顯著差異(P0.05)。上述差異表達的炎癥細(xì)胞因子與受體基因涉及白介素、趨化因子、腫瘤壞死因子等。2、24m組肺組織中TNF-α、IL-6和IL-1β mRNA表達水平都顯著高于4m組(P0.01),而IL-10 mRNA表達水平明顯降低(P0.01);與24m組比較,24m+Res組TNF-α、IL-6和IL-1βmRNA表達水平都明顯降低(P0.01);24m+Res組中IL-10 mRNA水平均顯著高于24m組(P0.01),與前面基因芯片結(jié)果相符合。結(jié)論:1、老年大鼠肺組織內(nèi)存在促炎性細(xì)胞因子基因表達上調(diào),抗炎性細(xì)胞因子基因表達下調(diào),導(dǎo)致促-抗炎性細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)和促-抗炎反應(yīng)體系平衡失調(diào),這可能是肺炎性衰老發(fā)生的機制。2、Res通過下調(diào)促炎性細(xì)胞因子基因表達和上調(diào)抗炎性細(xì)胞因子基因表達,重塑促炎/抗炎細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)動態(tài)平衡,達到干預(yù)炎性衰老的目的。
【關(guān)鍵詞】:炎性衰老 基因芯片 Realtime PcR 白藜蘆醇 肺 炎癥細(xì)胞因子 網(wǎng)絡(luò)
【學(xué)位授予單位】:復(fù)旦大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2014
【分類號】:R563.1
【目錄】:
- 英文縮略詞表4-6
- 中文摘要6-8
- 英文摘要8-10
- 前言10-12
- 材料與方法12-24
- 結(jié)果24-38
- 討論38-45
- 結(jié)論45-46
- 參考文獻46-51
- 綜述 炎性反應(yīng)與衰老51-58
- 參考文獻55-58
- 致謝58-59
- 附錄59-60
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,本文編號:253017
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