本文關(guān)鍵詞：FIZZ1在吸煙大鼠COPD模型肺組織的表達(dá)及與氣道炎癥的相關(guān)性，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《暨南大學(xué)》 2012年

FIZZ1在吸煙大鼠COPD模型肺組織的表達(dá)及與氣道炎癥的相關(guān)性

馮一  

【摘要】：目的： 探討FIZZ1(Found in Inflammatory Zone1)在吸煙所致大鼠COPD模型肺組織內(nèi)的表達(dá)及其與COPD慢性氣道炎癥的相關(guān)性，以進(jìn)一步闡明COPD的發(fā)病機(jī)制。 方法： （1）實(shí)驗(yàn)動物及分組：選用70只全雄性Wistar大鼠（體重在150-200g），隨機(jī)平均分為對照組及COPD模型組，每組按制模時(shí)間分為3w、4w、8w、12、16w、20w、24w七個(gè)亞組，每個(gè)亞組5只。 （2）造模方法：采用吸入香煙煙霧制造大鼠COPD模型。具體作法：將模型組大鼠置于一個(gè)100×80×80厘米密閉箱內(nèi)進(jìn)行被動吸煙，每日兩次，每次1小時(shí)，2次間隔6h以上，每次使用12支香煙，持續(xù)六個(gè)月，建立吸煙致大鼠COPD模型。正常對照大鼠除不予以被動吸煙外，置于相同條件下飼養(yǎng)。 （3）標(biāo)本采集及檢測方法、觀察指標(biāo) ①收集左側(cè)支氣管肺泡灌洗液(BALF)進(jìn)行細(xì)胞分類計(jì)數(shù)。 ②HE染色觀察大鼠肺組織病理改變。 ③ELISA法定量檢測對照組及模型組不同時(shí)間點(diǎn)肺泡灌洗液及血清中IL-4、TNF-α的動態(tài)變化。 ④免疫組織化學(xué)法定性分析、Western Blot定量檢測對照組及模型組大鼠肺組織中FIZZ1蛋白在不同時(shí)間表達(dá)的動態(tài)變化。 結(jié)果： （1）COPD大鼠造模成功： HE染色顯示對照組大鼠各時(shí)間點(diǎn)肺組織未見明顯差異，無明顯病理變化。模型組第3周開始即出現(xiàn)符合人類COPD的病理形態(tài)學(xué)改變,第12周至第16周期間炎癥反應(yīng)最重，第20周之后炎癥反應(yīng)呈慢性過程，并逐漸出現(xiàn)肺內(nèi)呼吸性細(xì)支氣管、肺泡管、肺泡囊及肺泡擴(kuò)大,肺泡壁部分?jǐn)嗔�、融合形成肺大泡�? （2）BALF細(xì)胞分類計(jì)數(shù)：模型組大鼠BALF中炎癥細(xì)胞總數(shù)、中性粒細(xì)胞絕對數(shù)、淋巴細(xì)胞絕對數(shù)與對照組比較，在第3、4周無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，之后其余各時(shí)間點(diǎn)均顯著高于對照組(P均0.05)，并從第4周開始隨著COPD病情的進(jìn)展而逐漸增多。而模型組的巨噬細(xì)胞絕對數(shù)在第3周即顯著高于對照組，一直持續(xù)增高至第24周(P均0.05)。中性粒細(xì)胞百分比模型組與對照組比較，在第3、4、8周無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，之后其余各時(shí)間點(diǎn)均顯著高于對照組(P均0.05)，模型16周、20周、24周組尤為顯著。模型組和對照組的單核巨噬細(xì)胞百分比及淋巴細(xì)胞百分比在第3、4周無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，之后模型組隨著造模時(shí)程的推移其表達(dá)呈下降趨勢。 （3）不同時(shí)間點(diǎn)肺泡灌洗液及血清中IL-4、TNF-α的動態(tài)變化：BALF中模型組的IL-4濃度在第3周、16周、20周、24周相比對照組輕度升高，在第8周輕度下降，其余時(shí)間點(diǎn)兩組之間沒有顯著性差異。血清中模型組IL-4在第4周、第8周低于對照組，第20周濃度輕度升高，其余時(shí)間點(diǎn)兩組之間沒有顯著性差異。BALF中模型組的TNF-α在第3周開始即顯著高于對照組，之后其表達(dá)逐漸增強(qiáng)，并在第16周、20周、24周持續(xù)維持峰值濃度(P0.05)。血清中模型組TNF-α的濃度在第3周、4周、12周、24周相比對照組升高，其余時(shí)間點(diǎn)兩組之間沒有顯著性差異。 （4）免疫組織化學(xué)分析發(fā)現(xiàn)，在正常對照組,FIZZ1蛋白表達(dá)較弱，主要分布于支氣管上皮細(xì)胞、肺泡上皮細(xì)胞、肺血管內(nèi)皮細(xì)胞及肺泡巨噬細(xì)胞，呈散在分布。在模型組,FIZZ1蛋白表達(dá)顯著增強(qiáng)，除聚集于支氣管上皮細(xì)胞、肺泡上皮細(xì)胞、肺血管內(nèi)皮細(xì)胞及肺泡巨噬細(xì)胞等炎癥細(xì)胞外，在大鼠各級細(xì)支氣管上皮細(xì)胞出現(xiàn)明顯損傷，支氣管平滑肌層的增生肥大，細(xì)胞外基質(zhì)的沉積和肌成纖維細(xì)胞增生，粘膜下層纖維化，杯狀細(xì)胞增殖，及粘液腺上皮化生等氣道重構(gòu)處，亦可以見到FIZZI蛋白表達(dá)相對較強(qiáng)。 （5）Western blot進(jìn)一步證實(shí)了免疫組化的檢測結(jié)果，模型組大鼠在第3周、第12周與對照組相比無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05)，第4周模型組相比對照組輕度下降，之后FIZZ1蛋白在肺組織內(nèi)的表達(dá)隨著炎癥反應(yīng)的加劇而逐漸增強(qiáng)，并在第20周達(dá)到峰值（P＜0.05)，第24周稍有回落，但仍高于對照組。 （6）COPD模型組大鼠肺組織內(nèi)FIZZ1蛋白與BALF中的白細(xì)胞總數(shù)及中性粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞絕對數(shù)呈正相關(guān)，并隨著其細(xì)胞數(shù)量的增加，F(xiàn)IZZ1蛋白的表達(dá)呈上升趨勢（r分別＝0.585，0.357，0.535，0.578，P均0.05）。FIZZ1的表達(dá)水平與BALF中IL-4、TNF-a濃度呈正相關(guān)（r分別＝0.359，0.561，P均0.05），與血清中TNF-a濃度呈負(fù)相關(guān)（r＝—0.90，P0.05），與血清中IL-4濃度無顯著相關(guān)性（P＞0.05)。 結(jié)論： 1采用吸入香煙煙霧24周制造大鼠COPD模型，，所建模型符合人類COPD特點(diǎn)，提示COPD模型制造成功。 2FIZZ1蛋白隨著COPD病情的進(jìn)展，其表達(dá)水平也隨之明顯增高，在第20周達(dá)到峰值，且主要分布于支氣管上皮細(xì)胞、肺泡上皮細(xì)胞、肺血管內(nèi)皮細(xì)胞、肺泡巨噬細(xì)胞、支氣管平滑肌層及纖維化的肺間質(zhì)。提示FIZZ1作為一種肺組織特異性表達(dá)的炎癥介質(zhì)，參與了COPD炎癥反應(yīng)的發(fā)生與發(fā)展。 3FIZZ1表達(dá)水平的升高可能促進(jìn)了中性粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞在氣道內(nèi)的聚集，并促使其合成和分泌IL-4、TNF-a等炎性介質(zhì)。

【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：暨南大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號】：R563.9
【目錄】：

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9 林小琪;;SD大鼠灌胃百可利30天反復(fù)給藥毒性試驗(yàn)[A];中國毒理學(xué)會第三屆中青年學(xué)者科技論壇暨2011年全國前列腺藥理毒理學(xué)研討會論文集[C];2011年

10 王曦;牛欣;羅致誠;;增齡與雄性大鼠氮氧化物及血清性激素水平變化的關(guān)系[A];全國中醫(yī)藥科研與教學(xué)改革研討會論文集[C];2002年

中國重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 奇 云;[N];大眾科技報(bào);2004年

2 記者 馮衛(wèi)東;[N];科技日報(bào);2014年

3 張?zhí)煨?[N];中國醫(yī)藥報(bào);2003年

4 本報(bào)特約撰稿人 陸志城;[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2004年

5 記者 藍(lán)建中;[N];新華每日電訊;2010年

6 記者 姜澎;[N];文匯報(bào);2009年

7 萬姍姍　記者 王春;[N];科技日報(bào);2009年

8 記者 曹繼軍 顏維琦 通訊員 孫國根;[N];光明日報(bào);2014年

9 記者 白毅 通訊員 孫國根;[N];中國醫(yī)藥報(bào);2014年

10 記者 孫國根;[N];健康報(bào);2014年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 付德明;氯沙坦對慢性心力衰竭大鼠β_1腎上腺素能受體信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路與心功能的調(diào)節(jié)及其機(jī)制研究[D];山西醫(yī)科大學(xué);2009年

2 楊少兵;N-甲基-D-天冬氨酸受體2B亞基鎮(zhèn)痛疫苗應(yīng)用于大鼠的安全性評價(jià)[D];華中科技大學(xué);2009年

3 蓋建芳;低出生體重對大鼠腎臟和血壓的影響及機(jī)制研究[D];中南大學(xué);2009年

4 史敏;慢性間歇性低壓低氧抗大鼠膠原誘導(dǎo)性關(guān)節(jié)炎作用及其免疫學(xué)機(jī)制[D];河北醫(yī)科大學(xué);2011年

5 安平;柴夏煎對甲亢大鼠的影響及作用機(jī)理研究[D];黑龍江中醫(yī)藥大學(xué);2005年

6 周宜;從大鼠性周期的分子變化探討柴胡止血液的作用[D];成都中醫(yī)藥大學(xué);2005年

7 張慶紅;白細(xì)胞介素2和雌激素受體在大鼠垂體前葉的相互關(guān)系研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2000年

8 張海峰;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植對大鼠急性肝功能衰竭治療作用的實(shí)驗(yàn)研究[D];山東大學(xué);2007年

9 常薪霞;鹽酸小檗堿對高脂飲食誘導(dǎo)的SD大鼠非酒精性脂肪肝的療效及機(jī)制研究[D];復(fù)旦大學(xué);2010年

10 頊紅雨;早期應(yīng)激對海馬學(xué)習(xí)、記憶功能的作用和機(jī)制研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2012年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 李寧;鉛、鎘、鉻、汞對大鼠聽力的損傷及銅、錳、鋅、硒的保護(hù)作用研究[D];山東大學(xué);2008年

2 王瑩;慢性腎衰竭大鼠全段甲狀旁腺激素與心肌肌鈣蛋白的相關(guān)性分析[D];山西醫(yī)科大學(xué);2008年

3 鄧旭輝;養(yǎng)精種子湯對缺氧雄性大鼠生殖機(jī)能的影響[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2008年

4 夏長青;活血降脂靈對早期動脈粥樣硬化大鼠的抗氧化應(yīng)激作用研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2009年

5 王海燕;運(yùn)動對SD大鼠與GK大鼠骨骼肌中COUP-TF Ⅰ與COUP-TFⅡ基因表達(dá)的影響[D];華東師范大學(xué);2010年

6 吉星;知母提取物的成分分析及對T2DM大鼠干預(yù)代謝組學(xué)初探[D];廣東藥學(xué)院;2010年

7 曾志;促紅細(xì)胞生成素對新生大鼠缺氧缺血性腦損傷神經(jīng)保護(hù)作用的研究[D];暨南大學(xué);2011年

8 汪春彥;金蕎麥對克雷伯桿菌肺炎大鼠的保護(hù)作用及其機(jī)制[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2011年

9 王媛媛;胡蘆巴總皂苷對大鼠脂肪肝的預(yù)防作用[D];新疆醫(yī)科大學(xué);2005年

10 徐莉;康復(fù)訓(xùn)練對腦梗死大鼠大腦可塑性機(jī)制的研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2002年

  本文關(guān)鍵詞：FIZZ1在吸煙大鼠COPD模型肺組織的表達(dá)及與氣道炎癥的相關(guān)性，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：250625