【摘要】：目的:通過嗎替麥考酚酯(MMF)對體外培養(yǎng)肺成纖維細胞(LF)轉(zhuǎn)化為肌成纖維細胞(MF)過程的干預(yù),觀察MMF對LF轉(zhuǎn)化及CTGF、FN蛋白表達的影響。方法:體外培養(yǎng)新生大鼠來源的LF,加入轉(zhuǎn)化生長因子-β1(TGF-β1)誘導(dǎo)轉(zhuǎn)化為MF,分別加入終濃度為0μmol/L(對照組)、0.1μmol/L(低濃度組)、1μmol/L(中濃度組)、10μmol/L(高濃度組)的MMF進行干預(yù);倒置顯微鏡下觀察LF和MF形態(tài),并用細胞免疫熒光的方法鑒定波形蛋白和α-平滑肌肌動蛋白(α-SMA),分析MMF對LF轉(zhuǎn)化的影響;ELISA方法檢測結(jié)締組織生長因子(CTGF)和纖維連接蛋白(FN)的水平。結(jié)果:LF經(jīng)TGF-β1誘導(dǎo)96 h后轉(zhuǎn)化成MF,細胞免疫熒光結(jié)果顯示MMF能夠抑制α-SMA的表達,但對已分化的肌成纖維細胞表型變化無影響;ELISA結(jié)果顯示與對照組比較,MMF組CTGF和FN分泌水平均顯著下降(P0.05),并呈一定的濃度依賴。結(jié)論:MMF能夠抑制肺成纖維細胞轉(zhuǎn)化和CTGF、FN表達,提示MMF有抗纖維化作用,影響CTGF和FN表達可能是作用途徑之一。
[Abstract]:Aim: to investigate the effect of mycophenolate mofetil (MMF) on LF transformation and CTGF,FN protein expression in cultured lung fibroblasts by interfering with the process of transforming (LF) into myofibroblasts (MF) in vitro. Methods: LF, derived from neonatal rats were induced by transforming growth factor- 尾 1 (TGF- 尾 1) into MF, with final concentration of 0 渭 mol/L (control group), 0.1 渭 mol/L (low concentration group) and 1 渭 mol/L (medium concentration group), respectively. The MMF of 10 渭 mol/L (high concentration group) was interfered with. The morphologies of LF and MF were observed under inverted microscope. Vimentin and 偽-smooth muscle actin (偽-SMA),) were identified by immunofluorescence. The effect of MMF on the transformation of LF was analyzed. The levels of connective tissue growth factor (CTGF) and fibronectin (FN) were detected by ELISA. Results: LF was induced by TGF- 尾 1 for 96 h and transformed into MF, cells. The results of immunofluorescence showed that MMF could inhibit the expression of 偽-SMA, but had no effect on the phenotypic changes of differentiated myofibroblasts. The results of ELISA showed that the levels of CTGF and FN in MMF group were significantly lower than those in control group (P0.05), and in a certain concentration dependent manner. Conclusion: MMF can inhibit the transformation of pulmonary fibroblasts and the expression of CTGF,FN, suggesting that MMF has anti-fibrosis effect, and the influence of CTGF and FN expression may be one of the mechanisms.
【作者單位】： 徐州醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院風(fēng)濕免疫科;
【基金】：徐州市科技項目(KC16SH111)基金資助
【分類號】：R563

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本文編號：2404720