【摘要】：研究背景及目的 急性肺損傷(Aucte lung injury, ALI)/急性呼吸窘迫綜合征(acute respiratory distress syndrome, ARDS)是常見的臨床危重癥,是由心源性以外的各種肺內(nèi)外致病因素(嚴(yán)重感染、休克、創(chuàng)傷、燒傷和吸入有害氣體等)造成彌漫性的肺間質(zhì)、肺泡水腫和肺部急性炎癥。臨床表現(xiàn)為呼吸窘迫和頑固性的低氧血癥等。ALI/ARDS進(jìn)展迅速,可轉(zhuǎn)變成為多臟器功能衰竭,預(yù)后差,病死率高。ALI/ARDS確切發(fā)病機制尚不完全清楚,可能與炎性介質(zhì)、氧化應(yīng)激產(chǎn)物、肺泡上皮和血管內(nèi)皮損傷、凋亡等多種因素有關(guān)。大量炎性介質(zhì)和細(xì)胞因子導(dǎo)致肺微血管通透性增加、肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞受損,表面活性物質(zhì)生成減少,加上水腫液稀釋作用,表面活性物質(zhì)含量更低,肺表面張力增大、肺的順應(yīng)性降低,肺泡塌陷和有效通氣面積減少,通氣／血流比例嚴(yán)重失調(diào),形成進(jìn)行性的低氧血癥。目前研究發(fā)現(xiàn),抗炎、抗氧化是有力的保護(hù)措施,對ALI/ARDS患者早期給予抗炎等綜合治療,有助于炎癥的消退和肺功能的改善。因此,在ALI/ARDS的治療策略方面,及時有效的抗炎、抗氧化治療,對提高肺組織的氧合能力,糾正低氧血癥、改善肺功能等有重要意義。 轉(zhuǎn)錄因子NF-E2相關(guān)因子(NF-E2-related factor2, Nrf2)是細(xì)胞抗氧化反應(yīng)的中樞調(diào)節(jié)者,是細(xì)胞氧化應(yīng)激反應(yīng)中的關(guān)鍵因子,Nrf2通過與抗氧化反應(yīng)元件(antioxidant response element, ARE)相互作用,在抗炎、抗氧化機制中具有重要作用。多種刺激或藥物能誘導(dǎo)Nrf2過表達(dá),Nrf2/ARE信號通路激活后,調(diào)節(jié)抗氧化蛋白和Ⅱ相解毒酶表達(dá),主要有血紅素加氧酶(HO-1)、硫氧還蛋白(Trx)、過氧化氫酶(CAT)、谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶(GST)、環(huán)氧化物水解酶(EH)、磺基轉(zhuǎn)移酶(SULT)、乙醛基轉(zhuǎn)移酶、乙醛脫氫酶(ALDH)、醌氧化還原酶(NQO1)、葡糖醛酸轉(zhuǎn)移酶(UGT)、γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)、谷胱甘肽合成酶等,它們能清除體內(nèi)多種致癌物質(zhì)或其他毒性及氧化性物質(zhì),減少對DNA及生物功能蛋白破壞,以維持機體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定。 NF-κB屬于Rel蛋白家族,是一種普遍存在的誘導(dǎo)型核轉(zhuǎn)錄因子,細(xì)胞受到外界刺激后,NF-κB從胞質(zhì)進(jìn)人細(xì)胞核,與DNA鏈上特異的部位結(jié)合,調(diào)控基因轉(zhuǎn)錄。NF-κB調(diào)控多種細(xì)胞因子、黏附分子和炎性介質(zhì),如TNF-α、IL-1β、 IL-6、iNOS、COX-2、ICAM-1等。NF-κB過度激活可引起炎癥介質(zhì)大量合成、釋放,導(dǎo)致炎癥瀑布效應(yīng),加快ALI及ARDS的進(jìn)程。促炎癥因子(TNF-α, IL-1β)是機體應(yīng)激后產(chǎn)生最早、并起到核心作用的炎癥介質(zhì),通過增強炎癥細(xì)胞活性,產(chǎn)生活性氧,血小板活化因子等,引起炎性損傷；炎癥介質(zhì)過度釋放及氧化應(yīng)激產(chǎn)物增多,與ALI/ARDS發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)。 ICAM-1是一種免疫球蛋白超家族細(xì)胞間粘附分子,表達(dá)于內(nèi)皮細(xì)胞、淋巴細(xì)胞,介導(dǎo)單核細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、中性粒細(xì)胞及激活內(nèi)皮細(xì)胞。ICAM-1參與免疫、炎癥及腫瘤轉(zhuǎn)移等一系列重要生理和病理過程。研究發(fā)現(xiàn)ICAM-1介導(dǎo)的白細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞粘附是白細(xì)胞聚集、活化和釋放炎性介質(zhì)的關(guān)鍵,加重炎癥級聯(lián)反應(yīng),在ALI中起著重要作用。 依布硒林(Ebs),化學(xué)名為2-苯基-1,2-苯并異硒唑-3(2H)-酮,是一類小分子有機硒化合物。在對有機硒化合物研究中,最初發(fā)現(xiàn)它們具有毒性小且穩(wěn)定的特點,隨后在對其活性的測試中發(fā)現(xiàn),此類物質(zhì)還具有增強組織抗氧化能力,抗腫瘤及抗微生物等活性,引起了研究人員的極大興趣。Ebs是目前公認(rèn)具有模擬谷胱甘肽過氧化物酶(GPX)作用最好的藥物之一,Ebs在抗炎、抗腫瘤、抗動脈粥樣硬化,治療心肌和腦缺血以及免疫調(diào)節(jié)等方面有顯著的效果,特別是在多種因素誘導(dǎo)的肺損傷模型中,Ebs均顯示出強大的保護(hù)作用。多種疾病模型中,Ebs能夠誘導(dǎo)Nrf2及其下游基因HO-1和Trx表達(dá),但未見Ebs對靜脈注射LPS誘導(dǎo)的內(nèi)毒素性急性肺損傷的研究報道。 本研究通過觀察Nrf2在內(nèi)毒素性肺損傷中動態(tài)表達(dá),了解其在ALI中的作用。探討Ebs是否可以通過調(diào)控Nrf2,進(jìn)而誘導(dǎo)下游抗炎、抗氧化基因表達(dá),發(fā)揮保護(hù)作用,為臨床防治急性肺損傷提供一個新的思路和方法。 第一章內(nèi)毒素性急性肺損傷模型建立及Nrf2的表達(dá) 目的建立內(nèi)毒素性急性肺損傷模型,觀察Nrf2、炎癥因子及氧化應(yīng)激產(chǎn)物的動態(tài)表達(dá),探討機體對內(nèi)毒素刺激的應(yīng)答機制。 方法將36只體重180-220g的SD雄性大鼠隨機分為兩組：正常對照組(n=18)和模型組(n=18),模型組尾靜脈注射LPS (5mg/kg),而正常對照組尾靜脈注射相應(yīng)的生理鹽水。分別于造模后6h、24h、72h分批放血處死動物后,各組各時間點均取6只動物,收集血清、支氣管肺泡灌洗液(BALF)和肺組織。觀察和比較各組各個時間點動脈血氣、肺干濕比、BALF中蛋白含量、肺組織病理,血中炎癥因子(TNF-α、IL-1β)、肺組織中氧化應(yīng)激產(chǎn)物(MDA、SOD、MPO)及抗氧化轉(zhuǎn)錄因子Nrf2表達(dá)。采用析因設(shè)計方差分析進(jìn)行比較后,再進(jìn)行多重比較。取P0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。 結(jié)果 1.各組大鼠Pa02變化：時間和組別不存在交互效應(yīng)(F=2.253,P=0.123),C組三個時間點,Pa02介于(91.10±3.55)mmHg至(93.27±3.45)mmHg,三組比較,統(tǒng)計學(xué)無差異(F=0.756,P=0.487),而LPS組三個時間點有增高趨勢,介于(72.60±6.20)mmHg至(78.93±5.03)mmHg,但差異仍無統(tǒng)計學(xué)意義(F=1.702,P=0.218)。LPS組從T1時開始,大鼠Pa02均較對照組同一時間點的數(shù)值低,且組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(T1、T2時P均0.000,T3時P=0.001)。 2.各組大鼠PaCO2變化：時間和組別不存在交互效應(yīng)(F=2.566,P=0.094),C組三個時間點,PaCO2介于(45.82±3.21)mmHg至(46.58±4.05)mmHg,各時間點比較,未見統(tǒng)計學(xué)差異(F=0.358,P=0.705),而LPS組有降低趨勢,介于(57.67±2.55)mmHg和(53.37±3.80)mmHg之間,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(F=3.988,P=0.051)。LPS組從T1時開始,大鼠PaCO2均較對照組同一時間點的數(shù)值要高,且組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(T1時P=0.000、T2時P=0.002,T3時P=0.024)。 3.各組大鼠肺濕重／干重比(W/D):時間和組別不存在交互效應(yīng)(F=0.819,P=0.451),C組各時間介于(3.88±0.17)至(4.11±0.27)。各個時間點比較,未見統(tǒng)計學(xué)差異(F=1.153,P=0.252),而LPS組介于(5.35±0.26)至(5.11±0.34),有降低趨勢,但差異仍無統(tǒng)計學(xué)意義(F=1.014,P=0.383)。LPS組從T1時開始,大鼠W/D均較對照組同一時間點的數(shù)值要高,且組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(T1、T2、T3時P均0.000)。 4.各組大鼠BALF中蛋白；時間和組別不存在交互效應(yīng)(F=2.573,P=0.094)。C組各時間點介于(186.19±23.86)mg/L至(192.77±28.58)mg/L,各個時間點比較,未見統(tǒng)計學(xué)差異(F=0.101,P=0.906),而LPS組介于(378.43±32.75)mg/L至(321.97±31.44)mg/L,有降低趨勢,T3明顯低于T1,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(F=4.503,P=0.031)。LPS組從T1時開始,大鼠BALF中蛋白均較對照組同一時間點的數(shù)值要高,且組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(T1、T2、T3時P均0.000)。 5.各組大鼠肺組織病理學(xué)改變：光鏡下可見各組三個時間點肺組織病理改變較小,C組肺組織結(jié)構(gòu)清晰,肺泡腔無炎性細(xì)胞浸潤,肺泡壁薄,間質(zhì)血管無擴張,支氣管粘膜上皮完整。LPS組肺泡結(jié)構(gòu)受到廣泛破壞,肺組織水腫及肺間質(zhì)明顯的增寬,肺泡腔內(nèi)有漿液性滲出,可見大量紅細(xì)胞以及中性粒細(xì)胞。 6.各組大鼠肺組織MDA表達(dá)：時間和組別不存在交互效應(yīng)(F=2.755,P=0.080)。C組各時間點MDA介于(7.01±2.52)nmol/mg至(7.44±2.10)nmol/mg;各個時間點比較,未見統(tǒng)計學(xué)差異(F=0.048,P=0.954),而LPS組介于(26.47±4.80)nmol/mg至(19.36±3.68)nmol/mg,有降低趨勢,但差異無統(tǒng)計學(xué)意義(F=3.112,P=0.076)。LPS組從T1時開始,大鼠肺組織MDA均較對照組同一時間點的數(shù)值要高,且組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(T1、T3時P均0.000,T2時P=0.003)。 7.各組大鼠肺組織SOD活性：時間和組別不存在交互效應(yīng)(F=2.864,P=0.073)。C組各時間點肺組織SOD活性介于(193.07±17.39)U/mg至(203.60±16.89)U/mg,各時間點比較,未見統(tǒng)計學(xué)差異(F=0.657,P=0.533)。而LPS組介于(93.08±12.53)U/mg至(115.70±13.64)U/mg,隨時間推移逐漸升高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(F=4.211,P=0.037)。LPS組從T1時開始,大鼠肺組織SOD均較對照組同一時間點的數(shù)值低,且組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(T1、T2、T3時P均0.000)。 8.各組大鼠肺組織MPO活性：時間和組別不存在交互效應(yīng)(F=1.713,P=0.198)。C組各時間點肺組織MPO介于(2.17±0.52)U/g至(2.02±0.78)U/g;各個時間點之間差異未見未見統(tǒng)計學(xué)差異(F=0.091,P=0.914)。LPS組介于(7.78±1.59)U/g至(6.30±1.03)U/g,有降低趨勢,但差異無統(tǒng)計學(xué)意義(F=1.686,P=0.221)。LPS組從T1時開始,大鼠肺組織MPO均較對照組同一時間點的數(shù)值高,且組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(T1、T2、T3時P均0.000)。 9.各組大鼠血清TNF-α表達(dá)：時間和組別存在交互效應(yīng)(F=4.909,P=0.015)。C組各時間點血清TNF-α介于(93.43±20.69)pg/ml至(90.53±19.99)pg/ml,各個時間點比較,未見統(tǒng)計學(xué)差異(F=0.031,P=0.970),而LPS組介于(379.05±41.85)pg/ml至(298.95±39.52)pg/ml,有降低趨勢,T3明顯低于T1,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(F=6.554,P=0.010)。LPS組從T1時開始,大鼠血清中TNF-α均較對照組同一時間點的數(shù)值高,且組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(T1、T2、T3時P均0.000)。 10.各組大鼠血清IL-1β表達(dá)：時間和組別不存在交互效應(yīng)(F=3.284,P=0.052)。C組各時間點血清IL-1β介于(81.76±20.43)pg/ml至(74.23±20.10)pg/ml,未見統(tǒng)計學(xué)差異(F=0.239,P=0.790),而LPS組介于(344.89±46.94)pg/ml至(270.38±41.71)pg/ml,有降低趨勢,T3明顯低于T1,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(F=4.046,P=0.041)。LPS組從T1時開始,大鼠血清中IL-1β均較對照組同一時間點的數(shù)值高,且組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(T1、T2、T3時P均0.000)。11.各組大鼠肺組織Nrf2相對表達(dá)量比較：時間和組別不存在交互效應(yīng)(F=2.682,P=0.109)。C組各時間點未見統(tǒng)計學(xué)差異(F=0.273,P=0.770),而LPS組T2時達(dá)到高峰,但三個時間點差異無統(tǒng)計學(xué)意義(F=2.114,P=0.202)。LPS組從T1時開始,大鼠肺組織Nrf2均較對照組同一時間點的數(shù)值高,且組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(T1時P=0.013,T2時P=0.011、T3時P=0.025)。 結(jié)論5mg/kg的LPS尾靜脈注射能夠?qū)е麓笫?h、24h、72h三個時間點氧合障礙、肺部間質(zhì)水腫、氧化應(yīng)激和炎癥反應(yīng)增加,以6h時最明顯；并且能激活體內(nèi)的抗氧化系統(tǒng),使Nrf2表達(dá)增多,但隨時間變化不明顯�？梢姳狙芯坎捎�5mg/kg的LPS能夠成功制備ALI大鼠模型。該研究可為以后研究提供ALI動物模型。 第二章依布硒啉對內(nèi)毒素性急性肺損傷保護(hù)作用及機制 目的通過建立內(nèi)毒素性急性肺損傷模型,觀察依布硒啉對內(nèi)毒素性急性肺損傷炎癥因子和氧化應(yīng)激影響,通過研究抗氧化轉(zhuǎn)錄因子Nrf2及其下游的抗氧化基因HO-1和Trx-1,以及NF-κB、ICAM-1等,闡明依布硒啉對內(nèi)毒素性肺損傷保護(hù)作用分子機制。 方法將48只體重180-220g的SD雄性大鼠隨機分為6組(每組8只)：正常對照組(C組)、模型組(LPS)、依布硒啉低劑量組(EbsL組)、中劑量組(EbsM組)、高劑量組(EbsH組)和地塞米松組(DEX組)。LPS組：尾靜脈注射LPS5mg/kg+腹腔注射溶劑；EbsL組：尾靜脈注射LPS5mg/kg+腹腔注射依布硒啉7.5mg/kg; EbsM組：尾靜脈注射LPS5mg/kg+腹腔注射依布硒啉15mg/kg; EbsH組：尾靜脈注射LPS5mg/kg+腹腔注射依布硒啉30mg/kg; DEX組：尾靜脈注射LPS5mg/kg+腹腔注射地塞米松5mg/kg; C組：尾靜脈注射等量生理鹽水+腹腔注射溶劑。分別于造模后6h,分批放血處死動物。收集血清、支氣管肺泡灌洗液(BALF)和肺組織。觀察和比較各組動脈血氣、肺干濕比、BALF中蛋白含量、肺組織病理,肺組織中氧化應(yīng)激和炎癥因子、抗氧化基因(HO-1、Trx-1)和轉(zhuǎn)錄因子(Nrf2、NF-κB)及粘附分子ICAM-1的表達(dá)。 結(jié)果 1.各組大鼠Pa02的變化：采用One-way ANOVA檢驗,各組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(F=15.517,P=0.000)。LPS組較對照組降低,組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.000)；而EbsL組與LPS比較,組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.060);EbsM組、EbsH組、Dex組均較LPS組高,組間差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P分別為0.041、0.003、0.000)。Ebs抑制急性肺損傷大鼠動脈Pa02降低。 2.各組大鼠PaCO2的變化：采用One-way ANOVA檢驗,各組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(F=13.815,P=0.000)。LPS組較對照組升高,組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.000)；而EbsL組、EbsM組與LPS比較,組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P分別為0.332、0.070)；EbsH組、Dex組均較LPS組降低,組間差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P均=0.000)。Ebs改善大鼠急性肺損傷造成血氧交換障礙。 3.各組大鼠肺組織濕重／干重(W/D)的變化：采用One-way ANOVA檢驗,各組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(F=17.862,P=0.000)。LPS組較對照組升高,組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.000)；而EbsL組、EbsM組與LPS比較,組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P分別為0.336、0.087)；EbsH組、Dex組均較LPS組降低,組間差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P分別為0.003、0.000)。Ebs減輕急性肺損傷大鼠肺濕干重比,表明Ebs可以減輕大鼠急性肺損傷造成的肺水腫。 4.各組大鼠BALF中蛋白含量改變：采用One-way ANOVA檢驗,各組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(F=53.602,P=0.000)。LPS組較對照組升高,組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.000)；而EbsL組、EbsM組與LPS比較,組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P分別為0.246、0.066)；EbsH組、Dex組均較LPS組降低,組間差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P均=0.000)。Ebs減輕ALI大鼠BALF中蛋白含量,表明Ebs可以減輕大鼠ALI造成的肺血管通透性增加。 5.各組大鼠病理改變：光鏡下可見C組肺泡結(jié)構(gòu)清晰,肺泡壁薄,肺泡壁與間質(zhì)內(nèi)無炎性細(xì)胞浸潤。LPS組血管周圍間隙增寬,肺間隔增寬,可見大量紅細(xì)胞以及中性粒細(xì)胞,部分肺間隔變薄、斷裂,肺泡腔內(nèi)可見出血、炎癥細(xì)胞及液體滲出。EbsL、EbsM組肺泡結(jié)構(gòu)部分被破壞,肺間隔增寬,肺泡腔內(nèi)有多量滲出的紅細(xì)胞及炎性細(xì)胞浸潤。EbsH組、DEX組肺泡結(jié)構(gòu)保持相對完整,肺間隔稍增寬,肺泡腔內(nèi)紅細(xì)胞及炎性細(xì)胞的浸潤明顯減少。 6.各組大鼠肺組織MDA變化：采用One-way ANOVA檢驗,各組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(F=7.149,P=0.000)。LPS組較對照組升高,組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.000); EbsM組、EbsH組、Dex組均較LPS組降低,組間差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P分別為0.027、0.009、0.001)；而EbsL組、組與LPS比較,組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.187)。Ebs的應(yīng)用可降低ALI大鼠肺組織MDA含量,表明Ebs可以減少大鼠內(nèi)毒素性ALI氧自由基產(chǎn)生,減輕肺組織氧化應(yīng)激損傷。 7.各組大鼠肺組織SOD變化：采用One-way ANOVA檢驗,各組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(F=13.064,P=0.000)。LPS組較對照組降低,組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.000); EbsM組、EbsH組、Dex組均較LPS組升高,組間差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P分別為0.010、0.001、0.000)；而EbsL組與LPS比較,組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.275)。Ebs的應(yīng)用可增加ALI大鼠肺組織SOD含量,表明Ebs可以抑制大鼠內(nèi)毒素性ALI造成的抗氧化酶降低,改善肺組織氧化應(yīng)激。 8.各組大鼠肺組織MPO變化：采用One-way ANOVA檢驗,各組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(F=8.947,P=0.000)。LPS組較對照組升高,組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.000);、EbsH組、Dex組均較LPS組降低,組間差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P分別為0.013、0.001)；而EbsM組、EbsL組與LPS比較,組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P分別為0.158、0.059)。Ebs可降低ALI大鼠肺組織MPO含量,Ebs抑制內(nèi)毒素性ALI肺組織中性粒細(xì)胞在肺組織聚集。 9.各組大鼠肺組織TNF-α變化：采用One-way ANOVA檢驗,各組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(F--43.971,P=0.000)。LPS組較對照組升高,組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.000)；EbsM組、EbsH組、Dex組均較LPS組降低,組間差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P分別為0.001、0.000、0.000)；而EbsL組與LPS比較,組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.118)。Ebs的應(yīng)用可降低ALI大鼠肺組織TNF-α含量,表明Ebs減輕內(nèi)毒素性ALI大鼠肺組織促炎癥介質(zhì)TNF-α,抑制炎癥反應(yīng)發(fā)展。 10.各組大鼠肺組織IL-1β變化：采用One-way ANOVA檢驗,各組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(F=61.297,P=0.000)。LPS組較對照組升高,組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.000)；EbsH組、Dex組均較LPS組降低,組間差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P分別為0.002、0.000)；而EbsM組、EbsL組與LPS比較,組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P分別為0.262、0.059)。Ebs可降低ALI大鼠肺組織IL-1β含量,表明Ebs減輕內(nèi)毒素性ALI大鼠肺組織促炎癥介質(zhì)IL-1β,起到抗炎作用。 11.各組大鼠肺組織Trx-1蛋白表達(dá)變化：采用One-way ANOVA檢驗,各組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(F=58.187,P=0.000)。LPS組較對照組增高,組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.047)；而EbsM組、EbsH組均較LPS組升高,組間差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P分別為0.022、0.045)；、EbsL組與LPS比較,組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P分別為0.945)。Ebs的應(yīng)用可增加ALI大鼠肺組織Trx-1含量,表明Ebs能誘導(dǎo)內(nèi)毒素性ALI大鼠肺組織抗氧化因子Trx-1表達(dá),抑制氧化應(yīng)激和炎癥反應(yīng)。 12.各組大鼠肺組織HO-1蛋白表達(dá)變化：采用One-way ANOVA檢驗,各組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(F=126.725,P=0.000)。LPS組較對照組增高,組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.019);而EbsL組、EbsM組、EbsH組均較LPS組增高,組間差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P均為0.000)。Ebs明顯增加ALI大鼠肺組織HO-1含量,表明Ebs能通過調(diào)節(jié)抗氧化因子表達(dá)的水平改善肺內(nèi)氧化應(yīng)激和炎癥反應(yīng)。 13.各組大鼠肺組織ICAM-1蛋白表達(dá)變化：采用One-way ANOVA檢驗,各組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(F=101.524,P=0.000)。LPS組較對照組增高,組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.000)；而EbsL組、EbsM組、EbsH組均較LPS組明顯降低,組間差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P分別為0.021、0.000、0.000)。表明Ebs明顯降低內(nèi)毒素性ALI大鼠肺組織ICAM-1表達(dá),抑制炎癥反應(yīng)發(fā)展。 14.各組肺組織Nrf2蛋白表達(dá)變化：采用One-way ANOVA檢驗,各組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(F=91.602,P=0.000)。LPS組較對照組增高,組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.034)；而EbsL組、EbsM組、EbsH組均較LPS組增高,組間差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P分別為0.001、0.000、0.000)。表明Ebs明顯誘導(dǎo)內(nèi)毒素性ALI大鼠肺組織Nrf2表達(dá),增加機體抗炎、抗氧化能力。 15.各組肺組織NF-κB蛋白表達(dá)變化：采用One-way ANOVA檢驗,各組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(F=46.037,P=0.000)。LPS組較對照組增高,組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.000)；而EbsL組、EbsM組、EbsH組均較LPS組降低,組間差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P分別為0.011、0.000、0.000)。表明Ebs抑制內(nèi)毒素性ALI大鼠肺組織NF-κB磷酸化,減輕炎癥反應(yīng)。 結(jié)論Ebs對內(nèi)毒素性ALI有保護(hù)作用,可能與誘導(dǎo)肺組織Nrf2生成,增強Trx-1和HO-1的表達(dá),抑制肺組織NF-κB的激活,降低氧化應(yīng)激產(chǎn)物MDA、MPO及炎癥因子TNF-α、IL-1β的釋放以及ICAM-1粘附分子的產(chǎn)生,最終減輕肺組織的損傷。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：南方醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號】：R563.8

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前3條

1 劉志勇;艾宇航;張麗娜;;血晶素對大鼠重癥急性胰腺炎肺損傷的保護(hù)作用及其機制[J];中南大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2009年03期

2 ;Ebselen-An in vivo Immune Response Modifier[J];Biomedical and Environmental Sciences;1997年Z1期

3 朱運福;戴愛國;胡瑞成;;支氣管哮喘豚鼠肺組織中Nrf2對γ-GCS的作用[J];中國應(yīng)用生理學(xué)雜志;2006年04期

，

本文編號：2335759