HTR2B在纖維化大鼠肺組織中的表達(dá)變化及其與上皮細(xì)胞間質(zhì)轉(zhuǎn)化的關(guān)系
本文關(guān)鍵詞:5-HTR2B在纖維化大鼠肺組織中的表達(dá)變化及其與上皮細(xì)胞間質(zhì)轉(zhuǎn)化的關(guān)系,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
《南華大學(xué)》 2014年
5-HTR2B在纖維化大鼠肺組織中的表達(dá)變化及其與上皮細(xì)胞間質(zhì)轉(zhuǎn)化的關(guān)系
涂容芳
【摘要】:目的: 觀察5-羥色胺2B受體(5-Hydroxytryptamine2B receptor,5-HTR2B)在博萊霉素(bleomycin,BLM)致大鼠肺纖維化中的表達(dá)變化,探討5-HTR2B在肺纖維化發(fā)生中的作用及與上皮細(xì)胞間質(zhì)轉(zhuǎn)化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的關(guān)系。 方法: 健康雄性SD大鼠45只,隨機(jī)數(shù)字表法分為對(duì)照組、BLM組、潑尼松+BLM組,每組各15只。BLM組和潑尼松+BLM組用BLM(5mg/kg)一次性氣管內(nèi)灌注復(fù)制肺纖維化模型。從造模當(dāng)天開始,對(duì)照組、BLM組分別每天給予生理鹽水灌胃,劑量為14mL/kg。潑尼松+BLM組大鼠給予醋酸潑尼松混懸液,給藥劑量為每天0.56mg/kg。各組分別于第7、14和28d處死動(dòng)物5只,取出肺組織,行蘇木精-伊紅(Haematoxylin–eosin,HE)、Masson染色,觀察大鼠肺組織炎癥和纖維化的程度;堿性水解法檢測(cè)肺組織中羥脯氨酸的量;免疫組化法及逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(Reverse Transcription Ploymerase Chain Reaction,RT-PCR)法檢測(cè)肺組織中5-HT R2B、上皮細(xì)胞標(biāo)記物E-鈣粘素(e-cadherin,E-Cad)和間質(zhì)細(xì)胞標(biāo)記物α-平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-smooth muscle action,α-SMA)mRNA及蛋白的表達(dá)水平。 結(jié)果: 1、HE染色:與對(duì)照組相比,BLM組7d以炎癥反應(yīng)為主,14d開始出現(xiàn)較多肺成纖維細(xì)胞;28d肺組織見大量肌成纖維細(xì)胞,肺纖維化模型形成;潑尼松+BLM組也出現(xiàn)肺纖維化改變,但纖維化程度較BLM組輕。 2、HYP含量:與對(duì)照組相比,BLM組HYP含量均增高(P 0.05),以28d時(shí)達(dá)最高。潑尼松+BLM組較BLM組含量下降(P 0.05)。 3、5-HTR2B、α-SMA及E-cad蛋白與mRNA表達(dá)情況:正常肺組織中,5-HTR2B、α-SMA為低表達(dá),E-cad為高表達(dá)。與對(duì)照組織相比較,免疫組化及RT-PCR結(jié)果顯示肺纖維化大鼠肺組織中5-HTR2B、α-SMA的蛋白及mRNA表達(dá)均增強(qiáng)(P0.05),28d時(shí)達(dá)高峰;E-cad蛋白及mRNA表達(dá)均減弱(P0.05),28d時(shí)達(dá)最低;潑尼松+BLM組,相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)5-HTR2B、α-SMA蛋白及mRNA表達(dá)有所下降(P0.05),E-cad蛋白及mRNA表達(dá)不同程度增強(qiáng)(P0.05)。 4、相關(guān)性分析:肺纖維化大鼠肺組織中5-HTR2B與α-SMA間的蛋白表達(dá)呈正相關(guān)性(r=0.976,P0.05),5-HTR2B與E-Cad間的蛋白表達(dá)呈負(fù)相關(guān)性(r=-0.927,P0.05)。 結(jié)論: 5-HTR2B參與BLM致肺纖維化機(jī)制,機(jī)制之一可能與誘導(dǎo)EMT發(fā)生有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】:
【學(xué)位授予單位】:南華大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2014
【分類號(hào)】:R563.9
【目錄】:
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