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實(shí)驗(yàn)性矽肺模型大鼠肺組織中細(xì)胞因子的表達(dá)及意義

發(fā)布時(shí)間:2016-12-21 17:25

  本文關(guān)鍵詞:實(shí)驗(yàn)性矽肺模型大鼠血清中細(xì)胞因子的表達(dá)及意義,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


《安徽醫(yī)科大學(xué)》 2010年

實(shí)驗(yàn)性矽肺模型大鼠肺組織中細(xì)胞因子的表達(dá)及意義

朱文  

【摘要】: 背景:目前我國(guó)仍然是矽肺危害最嚴(yán)重的國(guó)家,接觸矽塵的人數(shù)、新發(fā)矽肺病人、現(xiàn)患矽肺人數(shù)均居世界之首。矽肺發(fā)病機(jī)制至今尚未明確,學(xué)者們?cè)岢鲞^(guò)多種假說(shuō),如炎癥刺激學(xué)說(shuō)、免疫學(xué)說(shuō)、化學(xué)中毒學(xué)說(shuō)、機(jī)械刺激學(xué)說(shuō)、硅酸聚合學(xué)說(shuō)、表面活性學(xué)說(shuō)等,雖然每種學(xué)說(shuō)各有其合理之處,但都難以圓滿地解釋其致病過(guò)程。近年來(lái),細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)在矽肺發(fā)病機(jī)制中的研究開(kāi)始成為熱點(diǎn)。機(jī)體內(nèi),Th1型細(xì)胞因子和Th2型細(xì)胞因子相互影響,相互作用,形成細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)平衡,維持機(jī)體的正常生理狀態(tài)。一旦這種細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)平衡被打破,機(jī)體就會(huì)出現(xiàn)異常反應(yīng)和病理狀態(tài)。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)二氧化硅(SiO2)刺激大鼠建立實(shí)驗(yàn)性矽肺大鼠模型,監(jiān)測(cè)Th1型細(xì)胞因子干擾素-γ(IFN-γ)和Th2型細(xì)胞因子白介素-4(IL-4)在肺組織中的表達(dá)變化情況,探討Th1型細(xì)胞因子和Th2型細(xì)胞因子在矽肺形成過(guò)程中的作用。核因子-κB(NF-κB)和轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1(TGF-β1)都具有多種生物學(xué)功能。已有很多研究表明NF-κB和TGF-β1在肺纖維化發(fā)病過(guò)程中發(fā)揮重要的作用,本實(shí)驗(yàn)通過(guò)監(jiān)測(cè)兩者在矽肺模型組和對(duì)照組大鼠肺組織中的表達(dá),探討其在矽肺發(fā)病機(jī)制中的可能作用。 目的:闡明一次性染塵后實(shí)驗(yàn)性矽肺大鼠肺組織中細(xì)胞因子的動(dòng)態(tài)變化;探討IFN-γ和IL-4在實(shí)驗(yàn)性矽肺大鼠肺組織中的表達(dá)及意義;探討NF-κB和TGF-β1在實(shí)驗(yàn)性矽肺大鼠肺組織中的表達(dá)情況及可能作用。 方法:建立大鼠矽肺模型,一次性染塵,分別在染塵后第1、7、14、21、28、35d(天)各處死3只模型組和2只對(duì)照組大鼠,取肺組織制作組織切片。免疫組化SABC法檢測(cè)IFN-γ和IL-4在18例實(shí)驗(yàn)性矽肺模型大鼠和12例正常大鼠肺組織中的表達(dá),采用圖像分析系統(tǒng)對(duì)IFN-γ和IL-4的表達(dá)進(jìn)行定量分析;免疫組化S-P法檢測(cè)NF-κB和TGF-β1在18例實(shí)驗(yàn)性矽肺模型大鼠和12例正常大鼠肺組織中的表達(dá),對(duì)NF-κB和TGF-β1的表達(dá)也進(jìn)行定量分析。 結(jié)果:與對(duì)照組相比,一次性染塵后第1、7、14、21d時(shí),模型組大鼠肺組織中IFN-γ表達(dá)顯著增強(qiáng)(P0.05),IL-4的表達(dá)明顯減少(P0.05);染塵后第28、35d時(shí),模型組大鼠肺組織中IFN-γ表達(dá)有所減弱,與對(duì)照組沒(méi)有顯著性差異(P0.05);IL-4的表達(dá)量明顯增加,明顯高于對(duì)照組(P0.05)。染矽塵后第1、7、14d時(shí),矽肺大鼠肺組織中NF-κB和TGF-β1的表達(dá)與對(duì)照組相比明顯增加(P0.05);二者表達(dá)水平都于21d時(shí)開(kāi)始下降,28d時(shí)二者表達(dá)水平接近于對(duì)照組,與對(duì)照組比較無(wú)顯著性差異(P0.05)。至35d時(shí),NF-κB的表達(dá)明顯減弱,與對(duì)照組相比有顯著性差異(P0.05),而TGF-β1的表達(dá)與對(duì)照組之間無(wú)顯著性差異(P0.05)。 結(jié)論:在實(shí)驗(yàn)早期(1-21d),Th1型細(xì)胞因子IFN-γ表達(dá)明顯增加,表明矽肺大鼠體內(nèi)以Th1型細(xì)胞因子介導(dǎo)的細(xì)胞免疫反應(yīng)為主;而實(shí)驗(yàn)后期(28-35d),Th2型細(xì)胞因子IL-4的表達(dá)顯著增強(qiáng),同時(shí)IFN-γ表達(dá)有所減弱,說(shuō)明矽肺大鼠體內(nèi)細(xì)胞免疫反應(yīng)開(kāi)始降低,以Th2型細(xì)胞因子介導(dǎo)的體液免疫應(yīng)答開(kāi)始增強(qiáng)。矽肺模型建立后的早期(1-14d),NF-κB和TGF-β1的表達(dá)均明顯增強(qiáng),說(shuō)明二者可能參與早期矽肺纖維化的形成。

【關(guān)鍵詞】:
【學(xué)位授予單位】:安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2010
【分類號(hào)】:R135.2
【目錄】:

  • 中英文縮略詞表7-9
  • 中文摘要9-11
  • 英文摘要11-14
  • 1 前言14-15
  • 2 材料與方法15-22
  • 2.1 實(shí)驗(yàn)材料15-18
  • 2.1.1 動(dòng)物15-16
  • 2.1.2 主要試劑16
  • 2.1.3 主要儀器16
  • 2.1.4 主要溶液的配制16-18
  • 2.2 實(shí)驗(yàn)方法18-22
  • 2.2.1 大鼠矽肺模型的建立18-19
  • 2.2.1.1 氣管非暴露插管灌注法18
  • 2.2.1.2 造模18-19
  • 2.2.2 蘇木素-伊紅(HE)染色19
  • 2.2.2.1 用于 HE 染色的載玻片處理19
  • 2.2.2.2 HE 染色操作步驟19
  • 2.2.2.3 結(jié)果判斷19
  • 2.2.3 免疫組織化學(xué)19-22
  • 2.2.3.1 用于免疫組化的載玻片處理20
  • 2.2.3.2 免疫組化SABC 法操作步驟20
  • 2.2.3.3 免疫組化S-P 法操作步驟20-21
  • 2.2.3.4 免疫組化染色結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn)21-22
  • 2.2.3.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析22
  • 3 結(jié)果22-35
  • 3.1 一次性染塵后大鼠肺組織結(jié)構(gòu)的變化22-25
  • 3.1.1 肉眼觀察22
  • 3.1.2 HE 染色鏡下觀察22-25
  • 3.2 IFN-γ和IL-4 在大鼠肺組織中的表達(dá)25-29
  • 3.2.1 IFN-γ在大鼠肺組織中的表達(dá)25-27
  • 3.2.2 IL-4 在大鼠肺組織中的表達(dá)27-28
  • 3.2.3 IFN-γ和IL-4 陽(yáng)性細(xì)胞平均光密度的測(cè)定28-29
  • 3.3 NF-κB 和TGF-β1 在大鼠肺組織中的表達(dá)29-35
  • 3.3.1 NF-κB 在大鼠肺組織中的表達(dá)29-31
  • 3.3.2 TGF-β1 在大鼠肺組織中的表達(dá)31-33
  • 3.3.3 NF-κB 和 TGF-β1 陽(yáng)性細(xì)胞平均光密度的測(cè)定33-35
  • 4 討論35-42
  • 5 結(jié)論42-43
  • 參考文獻(xiàn)43-48
  • 附錄48-50
  • 致謝50-51
  • 綜述及參考文獻(xiàn)51-60
  • 下載全文 更多同類文獻(xiàn)

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    【引證文獻(xiàn)】

    中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

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    【參考文獻(xiàn)】

    中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

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    【共引文獻(xiàn)】

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    中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

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    中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

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    【同被引文獻(xiàn)】

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    相關(guān)機(jī)構(gòu)

    >吉林大學(xué)

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