本文關(guān)鍵詞：慢性阻塞性肺疾病患者肺組織中Nrf2、Bach1、γ-GCS表達(dá)的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《鄭州大學(xué)》 2013年

慢性阻塞性肺疾病患者肺組織中Nrf2、Bach1、γ-GCS表達(dá)的研究

馮青青  

【摘要】：背景及目的 慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease, COPD)是呼吸系統(tǒng)疾病中比較常見的慢性疾病。該病患病人數(shù)多,病死率高,且呈進(jìn)行性發(fā)展,到疾病的終末期嚴(yán)重影響了患者的勞動力,生活質(zhì)量亦明顯下降。目前COPD的發(fā)病機(jī)制尚未完全明了,但研究證實(shí)氧化應(yīng)激是COPD重要的發(fā)病機(jī)制之一。核因子相關(guān)因子-2(Nuclear factor erythroid2-related factor2,Nrf2)是氧化應(yīng)激反應(yīng)中位于核心地位的轉(zhuǎn)錄因子,能夠上調(diào)多種抗氧化基因的表達(dá),在COPD的發(fā)病過程中發(fā)揮了重要的作用。BTB-CNC異體同源體1(BTB and CNC homolog1, Bachl)是廣泛存在于體內(nèi)的一種亞鐵血紅素結(jié)合蛋白,它與Nrf2不同,可以阻遏抗氧化基因的轉(zhuǎn)錄。還原型谷胱甘肽(GSH)是肺組織內(nèi)重要的抗氧化劑之一,在氧化劑對肺組織造成氧化損傷的過程中發(fā)揮了重要的保護(hù)作用。在GSH的合成反應(yīng)過程中,調(diào)節(jié)GSH合成速度和數(shù)量的重要限速酶是γ-谷氨酸半胱氨酸合成酶(y-Glutamylcysteine Synthetase,y-GCS)。γ-GCS表達(dá)的調(diào)節(jié)主要集中在轉(zhuǎn)錄水平,因此,我們可以在轉(zhuǎn)錄水平對γ-GCS的表達(dá)進(jìn)行調(diào)節(jié),從而來增加GSH的合成,提升肺部的抗氧化能力。在對COPD大鼠的研究中表明Nrf2、Bachl在大鼠COPD的發(fā)病過程中可能對抗氧化基因γ-GCS的表達(dá)起到競爭調(diào)節(jié)的作用。國外有研究發(fā)現(xiàn)Bachl可以與Nrf2競爭抗氧化反應(yīng)原件結(jié)合位點(diǎn),從而下調(diào)抗氧化基因的表達(dá)。本實(shí)驗(yàn)旨在對COPD臨床患者肺組織中Nrf2、Bachl、γ-GCS的表達(dá)水平的變化及相關(guān)性進(jìn)行研究,探討三者在COPD發(fā)病機(jī)制中的作用,并初步探索Nrf2、Bachl對γ-GCS表達(dá)的調(diào)控作用。 對象和方法 選取2011年3月至2012年5月因肺腫瘤于鄭州大學(xué)第二附屬醫(yī)院胸外科行肺葉切除術(shù)的患者40例。術(shù)前均詢問病史,完善常規(guī)體檢、拍攝胸部X線或CT、測肺功能等資料。凡符合中華醫(yī)學(xué)會呼吸病學(xué)分會制定的慢性阻塞性肺疾病診治指南者,入選COPD組(20例),不符合者則入選對照組(20例)。所有患者均排除合并患有心、肝、腎、皮膚、乳腺、腎臟、消化道、卵巢、血液等方面的疾病,并排除支氣管擴(kuò)張癥、肺結(jié)核和其它可以影響肺功能的疾病,且術(shù)前均未行放化療治療。凡是符合入選標(biāo)準(zhǔn)的患者都已告知本課題的目的及方法,簽署知情同意書,并給予患者適當(dāng)?shù)慕?jīng)濟(jì)補(bǔ)償。 距離腫瘤組織4cm以上取材,肉眼未觀察到肺癌浸潤的外周肺組織,于4%多聚甲醛(含1‰焦炭酸二乙酯)中固定,常規(guī)行石蠟包埋,切片。取肺組織切片行HE染色；原位雜交法檢測肺組織標(biāo)本中Nrf2、Bach1、γ-GCSmRNA的表達(dá)；免疫組化法檢測肺組織標(biāo)本中Nrf2、Bach1、γ-GCS蛋白的表達(dá)；用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件對實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。 結(jié)果 1、臨床患者肺組織切片HE染色結(jié)果：在光鏡下可見COPD組肺泡壁變薄,肺泡腔變大,有的肺泡壁出現(xiàn)不同程度的斷裂,同時可見有的斷裂的肺泡壁融合。而對照組患者肺泡結(jié)構(gòu)正常。 2、原位雜交結(jié)果：Nrf2、Bachl和γ-GCS mRNA主要表達(dá)于肺泡上皮細(xì)胞和炎癥細(xì)胞；Nrf2和Bachl mRNA在COPD組患者肺組織中均呈強(qiáng)陽性表達(dá),二者在對照組的相應(yīng)部位呈弱陽性表達(dá),兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。而γ-GCS mRNA在COPD組患者肺組織中呈陽性表達(dá),在對照組的相應(yīng)部位呈弱陽性表達(dá),兩組比較差異亦有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。 3、免疫組化結(jié)果：Nrf2、Bach1、γ-GCS蛋白主要表達(dá)在肺泡上皮細(xì)胞和炎癥細(xì)胞。Nrf2、Bachl、γ-GCS蛋白在COPD組患者肺組織中均呈強(qiáng)陽性表達(dá),與對照組相比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。 4、COPD組指標(biāo)間的相關(guān)性分析：Nrf2、γ-GCS蛋白與FEV1/FVC(%)、FEV1(%)均呈正相關(guān)(P0.01),Bachl蛋白與FEV1/FVC(%)、FEV1(%)呈負(fù)相關(guān)(P＜0.01)。Nrf2蛋白與γ-GCS mRNA及其蛋白的表達(dá)呈正相關(guān)(P＜0.01),Bachl蛋白與γ-GCS mRNA及其蛋白的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)(P＜0.01)。 結(jié)論 1、COPD患者肺組織中Nrf2、Bach1、γ-GCS mRNA及蛋白的表達(dá)均較對照組增強(qiáng),提示三者在COPD氧化/抗氧化系統(tǒng)中發(fā)揮了重要作用。 2、Nrf2、Bachl、γ-GCS蛋白與診斷及評估COPD的關(guān)鍵指標(biāo)FEV1/FVC(%).FEV1(%)的相關(guān)性分析結(jié)果進(jìn)一步證實(shí)三者可能與COPD的發(fā)病有著密切的關(guān)系。 3、在COPD的發(fā)病過程中,Nrf2蛋白對γ-GCS的基因表達(dá)可能起到正向調(diào)控的作用,Bachl蛋白對γ-GCS的基因表達(dá)可能起到負(fù)向調(diào)控的作用,為γ-GCS的調(diào)控機(jī)制提供了新的理論依據(jù)。

【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：鄭州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R563
【目錄】：

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7 江剛;戴愛國;胡瑞成;;香煙煙霧提取物通過aPKC_(ι/ζ)-Nrf2通路對大鼠氣道上皮細(xì)胞γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶的調(diào)控作用[A];中國生理學(xué)會第23屆全國會員代表大會暨生理學(xué)學(xué)術(shù)大會論文摘要文集[C];2010年

8 高軍麗;戴愛國;;PERK、Nrf2與γ-谷氨酰半胱氨酸合酶在大鼠慢性阻塞性肺疾病肺組織中的表達(dá)[A];中國生理學(xué)會第23屆全國會員代表大會暨生理學(xué)學(xué)術(shù)大會論文摘要文集[C];2010年

9 李潔;戴愛國;王梅芳;胡瑞成;朱黎明;;PGC-1α與Nrf2協(xié)同調(diào)控γ-谷氨酰半胱氨酸合酶對大鼠慢性阻塞性肺疾病的作用[A];中國生理學(xué)會第23屆全國會員代表大會暨生理學(xué)學(xué)術(shù)大會論文摘要文集[C];2010年

10 蒲麗君;牛翠娟;;中華鱉轉(zhuǎn)錄因子Nrf2及過氧化物歧化酶和過氧化氫酶的克隆[A];第七屆全國野生動物生態(tài)與資源保護(hù)學(xué)術(shù)研討會論文摘要集[C];2011年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前5條

1 伍頌怡;[N];中國包裝報;2009年

2 譚海洋 陳庚文;[N];中國企業(yè)報;2000年

3 ;[N];中國高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)導(dǎo)報;2001年

4 小天;[N];中國機(jī)電日報;2001年

5 四川大學(xué)華西醫(yī)院內(nèi)分泌科主任醫(yī)師 教授 冉興無;[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報;2011年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 王洪波;Nrf2及齊墩果酸在酒精性肝纖維化中的作用機(jī)制研究[D];山東大學(xué);2011年

2 張曉梅;Nrf2在病毒性心肌炎小鼠中的作用及葛根素干預(yù)的研究[D];吉林大學(xué);2013年

3 劉景詩;冠脈轉(zhuǎn)染Nrf2基因?qū)Υ笫笕毖俟嘧⑿募〉谋Ｗo(hù)作用及機(jī)制的研究[D];中南大學(xué);2010年

4 段偉松;Nrf2-ARE通路在老化和突變SOD1G93A星形膠質(zhì)細(xì)胞中的改變[D];河北醫(yī)科大學(xué);2009年

5 李航;Nrf2-ARE信號通路對Ⅰ型糖尿病小鼠腎臟氧化應(yīng)激的影響及其作用機(jī)制的研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2010年

6 馬亮亮;免疫性血小板減少癥糖皮質(zhì)激素受體表達(dá)調(diào)控及其與激素抵抗相關(guān)性的研究[D];大連醫(yī)科大學(xué);2012年

7 陳寧;Nrf2參與子宮內(nèi)膜漿液性癌發(fā)病及耐藥機(jī)制的研究[D];山東大學(xué);2011年

8 應(yīng)英華;轉(zhuǎn)錄因子Nrf2在香煙煙霧誘導(dǎo)粘蛋白MUC5AC表達(dá)中的作用[D];浙江大學(xué);2012年

9 甯交琳;Nrf2在大鼠肢體爆炸傷后短暫低溫肺保護(hù)中的作用及機(jī)制[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2008年

10 徐曉紅;NRF2基因多態(tài)性與2型糖尿病及其并發(fā)癥關(guān)系的研究[D];吉林大學(xué);2013年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 馮青青;慢性阻塞性肺疾病患者肺組織中Nrf2、Bach1、γ-GCS表達(dá)的研究[D];鄭州大學(xué);2013年

2 陳哲;苦參堿對肺纖維化大鼠肺組織中Nrf2和γ-GCS表達(dá)的影響[D];南華大學(xué);2010年

3 劉曉燕;慢性阻塞性肺疾病中轉(zhuǎn)錄因子ATF3/ATF4和KLF2在Nrf2/γ-GCS通路中的作用及意義[D];南華大學(xué);2011年

4 羅卿;Nrf2、γ-GCS表達(dá)在苦參堿干預(yù)博來霉素誘導(dǎo)大鼠肺纖維化中的作用[D];南華大學(xué);2011年

5 王凱;大蒜素對慢性氣道炎癥大鼠肺組織NRF2與γ-GCS表達(dá)的影響[D];鄭州大學(xué);2011年

6 陳健;PPARγ/PGC-1α對Nrf2/γ-GCS-h表達(dá)的影響及其在支氣管哮喘發(fā)病中作用[D];南華大學(xué);2010年

7 龍飛;高血壓腦出血患者GCS評分與早期再出血率的相關(guān)性[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2011年

8 楊國青;GCS和MDR1在白血病細(xì)胞多藥耐藥形成中相關(guān)性的研究[D];蘇州大學(xué);2010年

9 李潔;PPARγ和PGC-1α協(xié)同調(diào)節(jié)Nrf2和γ-GCS在慢性阻塞性肺疾病中的作用[D];南華大學(xué);2010年

10 李平平;γ-GCS-GS（谷胱甘肽合成酶）在原核和真核細(xì)胞中的表達(dá)和重金屬耐受性研究[D];東北林業(yè)大學(xué);2011年

  本文關(guān)鍵詞：慢性阻塞性肺疾病患者肺組織中Nrf2、Bach1、γ-GCS表達(dá)的研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：220451