本文關鍵詞：PPARα基因多態(tài)性及mRNA表達與COPD骨骼肌線粒體功能、超微結構研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《昆明醫(yī)學院》 2010年

PPARα基因多態(tài)性及mRNA表達與COPD骨骼肌線粒體功能、超微結構研究

龍翔宇  

【摘要】： 目的:探索COPD病人股外側肌肉PPARα基因rs45550937(C/G),rs45552534(A/G),rs45576140(C/G),rs45528736(A/G),rs45576734(A/G)五個位點的多肽性及mRNA表達水平與肌肉中線粒體呼吸功能、超微結構關系。 方法:對昆明地區(qū)123例COPD患者和61例年齡匹配正常對照者的身體組成及肺功能進行測量,并對PPARα的五個突變位點rs45550937(C/G),rs45552534(A/G),rs45576140(C/G),rs45528736(A/G),rs45576734(A/G)采用多聚酶鏈和測序的方法進行多態(tài)性分析。并隨機對其中的6例健康對照組(Control),8例COPD正常體重(BMIN)及6例低體重COPD(BMIL)病人,行股外側肌活檢,對活檢的肌肉用實時定量PCR檢測PPARα基因的mRNA,冷凍離心法提取肌肉中線粒體,Clark氧電極法測定線粒體呼吸功能,根據(jù)線粒體呼吸耗氧量換算出ST3、ST4、RCR(ST3/ST4),并在透射電鏡下觀察單位骨骼肌橫切面積上線粒體數(shù)目,線粒體面積,Z線寬度。 結果:在正常對照和COPD患者中,PPARα的上述五個位點未發(fā)現(xiàn)有突變; PPARα基因的mRNA表達在三組中分別為(單位:AU):0.82±0.10,0.64±0.09,0.41±0.12,在COPD病人中表達下降,在低體重COPD病人中下降明顯(p＜0.01); 線粒體呼吸控制率RCR(ST3/ST4)在COPD病人中降低(5.13±0.35vs3.50±0.71),各組間均可見差異(p＜0.01); 電鏡下COPD病人單位肌肉截面積線粒體數(shù)目在Control、BMIN、BMIL三組中分別為0.52±0.06、0.43±0.08、0.32±0.07,線粒體橫截面積百分比在三組中分別為4.31±0.76、3.71±0.47、2.50±0.37。與Control相比,BMIN組的線粒體數(shù)目面積(線粒體體積密度)下降不明顯(p均＞0.05),BMIL組中明顯下降(p均＜0.01)。Z線(代表肌纖維類型)在BMIL組明顯下降(103.2±6.42vs87.2±8.79,p=0.024)。 PPARα基因的mRNA表達水平與RCR,單位肌肉橫切面積內線粒體數(shù)目n、面積百分比正相關,其r值分別為0.71,r=0.69,r=0.75,p均＜0.01。PEARα的mRNA表達與Z線寬度(代表肌纖維類型)正相關(r=0.63,p＜0.01) 結論:在COPD病人中,上述PPARα基因位點昆明在地區(qū)突變率低,與其mRNA表達下調無關。需要進一步篩查PPARα的其他基因位點。 COPD患者的骨骼肌質量還未下降(FFMI評估),線粒體的電子傳遞鏈和氧化磷酸化(RCR評估)即出現(xiàn)了異常,但線粒體的體積密度得到了維持,而在低體重的COPD患者中,二者均下降。線粒體的電子傳遞鏈和氧化磷酸化先于線粒體的體積密度改變,是COPD患者骨骼肌功能障礙的早期事件。 PPARα基因的mRNA表達下調,并與線粒體呼吸功能,單位肌肉橫切面積內線粒體面積比分下降相關,或許,PPARα基因的mRNA的表達下降是線粒體呼吸功能下降,體積密度減少的一個原因。

【關鍵詞】：
【學位授予單位】：昆明醫(yī)學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2010
【分類號】：R563.9
【目錄】：

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