本文關鍵詞：miR-29b對與A549細胞共培養(yǎng)的人胚肺成纖維細胞抗纖維化作用的研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《江蘇大學》 2016年

miR-29b對與A549細胞共培養(yǎng)的人胚肺成纖維細胞抗纖維化作用的研究

陸小威  

【摘要】：目的特發(fā)性肺纖維化(idiopathic pulmonary fibrosis,IPF)是一種慢性進展性的病因不明的肺部疾病,且缺乏有效的治療手段。過多的肺成纖維細胞、肌成纖維細胞聚集和細胞外基質(zhì)的過度沉積是IPF的重要病理特點。micro RNA是一種小分子非編碼的RNA,在體內(nèi)眾多生理病理過程中扮演重要的角色。研究表明micro RNA同樣參與IPF的發(fā)病機理。本研究通過觀察mi R-29b對與A549細胞共培養(yǎng)的人胚肺成纖維細胞(MRC-5)合成I型膠原蛋白(Collagen I,Col I)的影響,探討其在抗肺纖維化中的作用,為探尋IPF新的治療靶點提供一定的研究依據(jù)。方法應用Transwell小室構(gòu)建MRC-5與A549細胞跨室共培養(yǎng)模型,利用脂質(zhì)體介導法將mi R-29b轉(zhuǎn)染至MRC-5細胞以及使用TGF-β1刺激相應細胞組,并設空白對照組,TGF-β1刺激組,mi R-29b陰性轉(zhuǎn)染對照+TGF-β1刺激組,mi R-29b轉(zhuǎn)染+TGF-β1刺激組,mi R-29b轉(zhuǎn)染組。通過實時定量PCR法檢測各組細胞中Col I和mi R-29b的m RNA相對表達水平。Western blotting法檢測各組細胞中Col I蛋白表達水平。結(jié)果(1)PCR檢測分析顯示,與空白對照組相比,mi R-29b在轉(zhuǎn)染組表達水平增加了127倍(P0.01),使用Lipofectamin2000在MRC-5細胞轉(zhuǎn)染組中過表達mi R-29b成功。(2)通過PCR檢測分析顯示與TGF-β1刺激組和mi R-29b陰性轉(zhuǎn)染+TGF-β1刺激組相比,mi R-29b轉(zhuǎn)染+TGF-β1刺激組中Col I表達降低(P0.05)。(3)Western blotting法檢測各組細胞Col I蛋白表達,mi R-29b轉(zhuǎn)染+TGF-β1刺激組中Col I表達較TGF-β1刺激組和mi R-29b陰性轉(zhuǎn)染+TGF-β1刺激組相比表達降低(P0.05)結(jié)論實驗表明在mi R-29b轉(zhuǎn)染的MRC-5細胞中存在過表達mi R-29b,后者可減少與A549細胞共培養(yǎng)的MRC-5細胞TGF-β1刺激后Col I蛋白表達水平,進而減少細胞外基質(zhì)的合成,顯示對肺纖維化有潛在的抑制作用。

【關鍵詞】：
【學位授予單位】：江蘇大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R563
【目錄】：

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