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干擾素調(diào)節(jié)因子4在過(guò)敏性哮喘發(fā)病中的作用

發(fā)布時(shí)間:2018-05-22 12:35

  本文選題:過(guò)敏性哮喘 + 干擾素調(diào)節(jié)因子4。 參考:《武漢大學(xué)》2012年博士論文


【摘要】:目的:支氣管哮喘是由多種細(xì)胞參與的慢性氣道炎癥性疾病。研究表明,過(guò)敏性哮喘受輔助性T細(xì)胞的調(diào)節(jié),而干擾素調(diào)節(jié)因子4在輔助性T細(xì)胞的分化中起著很重要的作用。因此,本研究探討干擾素調(diào)節(jié)因子4是否在過(guò)敏性哮喘病人的全身免疫反應(yīng)中起著一定的作用。方法:分別收集29個(gè)過(guò)敏性哮喘患者(過(guò)敏性哮喘組)和12個(gè)健康志愿者(正常對(duì)照組)的外周血15ml,采用密度梯度離心法分離出外周血單個(gè)核細(xì)胞。用實(shí)時(shí)定量逆轉(zhuǎn)錄PCR法和western blot法檢測(cè)外周血單個(gè)核細(xì)胞中干擾素調(diào)節(jié)因子4的基因和蛋白表達(dá)含量。用流式細(xì)胞儀檢測(cè)外周血單個(gè)核細(xì)胞中輔助性T細(xì)胞1、輔助性T細(xì)胞2和輔助性T細(xì)胞17的比例。用ELISA法檢測(cè)血漿和細(xì)胞培養(yǎng)上清中的輔助性T細(xì)胞1、輔助性T細(xì)胞2和輔助性T細(xì)胞17的代表性因子干擾素γ(IFN-γ)、白介素4(IL-4)和白介素17(IL-17)的含量。用實(shí)時(shí)定量逆轉(zhuǎn)錄PCR法檢測(cè)分別控制輔助性T細(xì)胞2、輔助性T細(xì)胞17和調(diào)節(jié)性T細(xì)胞分化的轉(zhuǎn)錄因子GATA3γt和FOXP3。結(jié)果:干擾素調(diào)節(jié)因子4在過(guò)敏性哮喘組中的表達(dá)較正常對(duì)照組明顯增多。輔助性T細(xì)胞2和輔助性T細(xì)胞17及它們的代表性因子IL-4和IL-17在過(guò)敏性哮喘組中的數(shù)量較正常對(duì)照組明顯增多。輔助性T細(xì)胞1及其代表性因子IFN-γ生過(guò)敏性哮喘組和正常對(duì)照組中的表達(dá)沒(méi)有明顯變化。過(guò)敏性哮喘組干擾素調(diào)節(jié)因子4的表達(dá)分別與輔助性T細(xì)胞2、輔助性T細(xì)胞17和調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的關(guān)鍵性轉(zhuǎn)錄因子GATA3、RORγt和FOXP3呈正相關(guān)。結(jié)論:我們的研究結(jié)果提示,干擾素調(diào)節(jié)因子4可能在轉(zhuǎn)錄因子水平促進(jìn)過(guò)敏性哮喘患者輔助性T細(xì)胞2和輔助性T細(xì)胞17的分化,在過(guò)敏性哮喘的發(fā)生發(fā)展中起一定的作用。
[Abstract]:Objective: bronchial asthma is a chronic airway inflammatory disease involving many kinds of cells. Studies have shown that allergic asthma is regulated by helper T cells, while interferon regulatory factor 4 plays an important role in the differentiation of helper T cells. Therefore, this study investigated whether interferon regulatory factor 4 may play a role in systemic immune response in allergic asthma patients. Methods: peripheral blood mononuclear cells were isolated from 29 allergic asthma patients (allergic asthma group) and 12 healthy volunteers (normal control group) by density gradient centrifugation. The gene and protein expression of interferon regulatory factor 4 in peripheral blood mononuclear cells (PBMC) was detected by real-time quantitative reverse transcription PCR and western blot. The proportion of helper T cell 1, helper T cell 2 and helper T cell 17 in peripheral blood mononuclear cells (PBMC) was determined by flow cytometry. The levels of helper T cells (1), helper T cells (2) and IFN- 緯 (IL-4) and IL-17 (IL-17) in plasma and cell culture supernatant were determined by ELISA method. The transcription factors GATA3 緯 t and FOXP3, which control helper T cell 2, helper T cell 17 and regulatory T cell differentiation, were detected by real-time quantitative reverse transcription PCR. Results: the expression of interferon regulatory factor 4 in allergic asthma group was significantly higher than that in normal control group. The number of helper T cell 2 and helper T cell 17 and their representative factors IL-4 and IL-17 in allergic asthma group were significantly higher than that in normal control group. The expression of helper T cell 1 and its representative factor IFN- 緯 in allergic asthma group and normal control group did not change significantly. In allergic asthma group, the expression of interferon regulatory factor 4 was positively correlated with helper T cell 2, helper T cell 17 and regulatory T cell critical transcription factor GATA3, ROR 緯 t and FOXP3, respectively. Conclusion: our results suggest that interferon regulatory factor 4 may promote the differentiation of helper T cell 2 and helper T cell 17 in allergic asthma patients at the transcription factor level, and may play a role in the occurrence and development of allergic asthma.
【學(xué)位授予單位】:武漢大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【學(xué)位授予年份】:2012
【分類號(hào)】:R562.25

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本文編號(hào):1922103

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