本文選題：支氣管哮喘 + 嗜酸性粒細(xì)胞�。� 參考：《第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào)》2017年10期

【摘要】：目的研究IL-17A對(duì)哮喘小鼠Th2細(xì)胞分化及其相關(guān)炎癥的作用。方法 24只C57BL/6J小鼠按隨機(jī)數(shù)字表法分為對(duì)照組、哮喘組和IL-17A處理組(n=8)。哮喘組和IL-17A處理組予以卵清蛋白(ovalbumin,OVA)致敏及激發(fā)。每次霧化激發(fā)前1 h,IL-17A處理組給予重組小鼠IL-17A氣道滴入。各步對(duì)照均予以生理鹽水。末次激發(fā)后24 h處死小鼠,收集支氣管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)行細(xì)胞總數(shù)及分類計(jì)數(shù)。ELISA檢測(cè)BALF中IL-4、IL-5、IFN-γ、IL-17A的濃度。HE和PAS染色及半定量評(píng)分評(píng)估小鼠肺部病理變化。流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)脾臟和支氣管淋巴結(jié)Th細(xì)胞分化。免疫磁珠分選健康小鼠幼稚CD4~+T細(xì)胞,用Th2極化培養(yǎng)基體外培養(yǎng),并給予IL-17A或等量PBS干預(yù),檢測(cè)Th2細(xì)胞的增殖、凋亡和分化。結(jié)果哮喘組較對(duì)照組,BALF中細(xì)胞總數(shù)、嗜酸性粒細(xì)胞數(shù)及其比例(P0.05)、IL-4、IL-5、IL-17A濃度均顯著增高(P0.05),IFN-γ濃度顯著下降(P0.05);支氣管、血管周圍炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)和杯狀細(xì)胞化生明顯加重(P0.01);脾臟和淋巴結(jié)Th2細(xì)胞分化比例顯著增高(P0.05)。IL-17A處理組較哮喘組,BALF中的細(xì)胞總數(shù)[(26.00±5.43)×10~4/mL vs(58.40±26.93)×10~4/mL,P0.05]、嗜酸性粒細(xì)胞數(shù)[(8.04±1.98)×10~4/mL vs(31.95±12.28)×10~4/mL,P0.05]及其比例[(29.93±3.03)%vs(53.47±6.62)%,P0.01]顯著降低,而中性粒細(xì)胞數(shù)及其比例無明顯變化;BALF中Th2相關(guān)因子IL-4濃度[(9.86±2.77)pg/mL vs(28.13±4.62)pg/mL,P0.01]、IL-5濃度[(7.30±0.50)pg/mL vs(10.50±1.10)pg/mL,P0.01]均顯著降低;支氣管、血管周圍炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)減輕,HE染色半定量評(píng)分降低[(2.00±0.51)vs(3.12±0.64),P0.05],杯狀細(xì)胞化生減少[(0.80±0.45)vs(2.40±0.55),P0.01];脾臟[(2.24±0.44)%vs(4.82±1.83)%,P0.01]和淋巴結(jié)[(7.05±0.58)%vs(10.57±1.35)%,P0.05]中Th2細(xì)胞分化比例顯著減少。極化培養(yǎng)的幼稚CD4~+T細(xì)胞,予IL-17A干預(yù)后,誘導(dǎo)分化的Th2細(xì)胞比例顯著減少(P0.05),而增殖和凋亡無顯著變化。結(jié)論 IL-17A有抑制Th2細(xì)胞分化,減輕哮喘小鼠氣道嗜酸性粒細(xì)胞炎癥的作用。
[Abstract]:Objective to study the effect of IL-17A on Th2 cell differentiation and related inflammation in asthmatic mice. Methods 24 C57BL/6J mice were randomly divided into control group, asthma group and IL-17A treated group. Asthma group and IL-17A group were sensitized and stimulated by ovalbumin ovalbumin OVA. One hour before each atomization, IL-17A group was treated with recombinant IL-17A. Each step control was given normal saline. The mice were killed 24 hours after the last challenge, and the bronchoalveolar lavage fluido BALFs were collected and counted. Elisa was used to detect the concentration of IL-4 and IL-5IL-5IFN- 緯 IL-17A in BALF. The lung pathological changes were evaluated by HE, PAS staining and semi-quantitative scoring. The differentiation of Th cells in spleen and bronchial lymph nodes was detected by flow cytometry. Immature CD4T cells of healthy mice were separated by immunomagnetic beads and cultured in vitro on Th2 polarization medium. The proliferation, apoptosis and differentiation of Th2 cells were detected by IL-17A or PBS intervention. Results compared with the control group, the total number of cells, the number and proportion of eosinophilic granulocytes in the asthma group were significantly higher than those in the control group. The concentration of IL-4, IL-5, IL-17A in the asthma group was significantly higher than that in the control group, and the concentration of IFN- 緯 in the bronchi was significantly decreased than that in the control group. The infiltration of perivascular inflammatory cells and goblet cell metaplasia increased significantly (P 0.01), the differentiation ratio of Th2 cells in spleen and lymph nodes was significantly higher than that in asthma group [26.00 鹵5.43 脳 10~4/mL vs(58.40 鹵26.93 脳 10 ~ 4% mL0.05], the number of eosinophil cells [8.04 鹵1.98) 脳 10~4/mL vs(31.95 鹵12.28) 脳 10 ~ (4) mL _ (0.05) and the proportion [29.93 鹵3.03)%vs(53.47 鹵6.62] decreased significantly. However, the number and proportion of neutrophils did not change significantly. The concentration of Th2 related factor IL-4 [9.86 鹵2.77)pg/mL vs(28.13 鹵4.62 渭 g / mLP0.01] IL-5 [7.30 鹵0.50)pg/mL vs(10.50 鹵1.10 g / mLP0.01] was significantly decreased in bronchi. The semi-quantitative score of HE staining was decreased [2.00 鹵0.51)vs(3.12 鹵0.64 P05], the metaplasia of goblet cells was decreased [0.80 鹵0.45)vs(2.40 鹵0.55 P0.01], the percentage of differentiation of Th2 cells in spleen [2.24 鹵0.44)%vs(4.82 鹵1.83] and lymph node (7.05 鹵0.58)%vs(10.57 鹵1.35P 0.05) was significantly decreased. After treated with IL-17A, the proportion of differentiated Th2 cells decreased significantly, but the proliferation and apoptosis were not significantly changed. Conclusion IL-17A can inhibit the differentiation of Th2 cells and alleviate the airway eosinophil inflammation in asthmatic mice.
【作者單位】： 第三軍醫(yī)大學(xué)新橋醫(yī)院全軍呼吸內(nèi)科研究所 全軍呼吸病研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目(81270075)~~
【分類號(hào)】：R562.25

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本文編號(hào)：1815306