閉塞性細支氣管炎小鼠模型的建立與評價
本文選題:閉塞性細支氣管炎 + 丁二酮; 參考:《第三軍醫(yī)大學學報》2014年22期
【摘要】:目的探討建立閉塞性細支氣管炎(bronchiolitis obliterans,BO)小鼠動物模型的方法。方法將SPF級C57BL/6雄性小鼠(6~8周)按隨機數字表法分為兩組:對照組和模型組(BO組),每組6只。模型組構建采用初次氣管內滴注2,3丁二酮(DA)(490 mg/m L即500 mg/kg)1次,對照組采用初次氣管內滴注已消毒的蒸餾水代替,其余實驗條件和方法 2組相同。飼養(yǎng)于SPF級動物中心,至第3天和第7天收集標本,分別留取支氣管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)和左肺行病理學檢測。飼養(yǎng)期間觀察小鼠一般狀態(tài),監(jiān)測兩組體質量變化,用無創(chuàng)肺功能體描儀行小鼠氣道高反應監(jiān)測,支氣管肺泡灌洗,細胞計數及炎性細胞分類計數;左肺行病理切片、HE染色、圖像分析與采集。結果模型組小鼠給予DA后1 d可出現(xiàn)吼喘、呼吸加快等,監(jiān)測體質量顯著低于對照組(P0.05)。與對照組相比,模型組肺功能(霧化乙酰甲膽堿濃度為50 mg/m L時)增強呼氣間歇(enhanced pause,Penh)值明顯升高(P0.05)。模型組小鼠BALF炎性細胞總數及分類計數可見第3天時中性粒細胞總數顯著高于對照組(P0.05),第7天時淋巴細胞總數、巨噬細胞總數顯著高于對照組(P0.05)。病理切片HE染色可見典型的BO改變。3 d模型組細支氣管腔內及管腔周圍大量炎性細胞浸潤,管腔嚴重閉塞,組織急性期出血嚴重;7 d模型組基底細胞嚴重壞死,氣道上皮細胞雖附著于基底,但可見細胞明顯增生肥大,細胞核丟失嚴重,管腔內炎性細胞浸潤,管腔壁增厚,類纖維化表現(xiàn)。結論 C57BL/6小鼠給予氣管內滴注DA(500 mg/kg)1次,可于第7天觀察到典型的急性期BO改變,可以成功建立BO小鼠模型。
[Abstract]:Objective to establish an animal model of bronchiolitis obliterans Bos. Methods SPF grade C57BL/6 male mice were randomly divided into two groups: control group and model group with 6 rats in each group. The model group was constructed with the first intratracheal instillation of 490mol / L of 2-butanedione diketone, or 500 mg/kg)1, while the control group was replaced by the first intratracheal drip of disinfected distilled water. The other experimental conditions were the same as those of the two groups. The specimens were collected on the 3rd and 7th day after feeding in the SPF animal center. Bronchoalveolar lavage lavage were collected from bronchoalveolar lavage fluid (BALF) and the left lung was examined by pathology. During feeding, we observed the general state of the mice, monitored the changes of body mass in the two groups, monitored the airway hyperresponsiveness, bronchoalveolar lavage, cell count and inflammatory cell classification of the mice by noninvasive pulmonary function scintigraphy, and the left lung was stained with HE in pathological sections. Image analysis and collection. Results 1 day after DA administration, the mice in the model group developed wheezing and breathing quickening, and the body mass of the monitoring group was significantly lower than that of the control group (P 0.05). Compared with the control group, the pulmonary function (50 mg/m / L nebulized methacholine) in the model group was significantly increased by enhanced intermittent expiratory enhancement of Penhs (P 0.05). The total number and classification of BALF inflammatory cells in the model group were significantly higher than those in the control group on the 3rd day (P 0.05), the number of lymphocytes and macrophages on the 7th day was significantly higher than that in the control group (P 0.05). He staining of pathological sections showed that typical BO changed a large number of inflammatory cells in and around the bronchiole lumen of the model group at day 3.The lumen was severely occluded and the basal cell necrosis was severe in the model group after 7 days of acute hemorrhage. Although the airway epithelial cells attached to the basement, the cells were obviously hyperplastic and hypertrophic, with serious nuclear loss, inflammatory cell infiltration in the lumen, thickening of the lumen wall, and fibrosis. Conclusion the intratracheal instillation of DA(500 mg/kg)1 in C57BL/6 mice can observe the typical changes of BO in acute phase on the 7th day, and the model of BO mice can be established successfully.
【作者單位】: 重慶醫(yī)科大學附屬兒童醫(yī)院兒童發(fā)育疾病研究教育部重點實驗室;重慶醫(yī)科大學附屬兒童醫(yī)院重慶市干細胞治療工程技術研究中心;重慶醫(yī)科大學兒童醫(yī)院臨床分子醫(yī)學中心;重慶醫(yī)科大學附屬兒童醫(yī)院呼吸中心;
【基金】:重慶市衛(wèi)生和計劃生育委員會醫(yī)學科研計劃重點項目(20141008)~~
【分類號】:R-332;R562.21
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,本文編號:1782734
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