本文關(guān)鍵詞：臭氧應(yīng)激對(duì)氣道粘膜細(xì)胞群落和粘蛋白表達(dá)譜的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《湖南師范大學(xué)》 2014年

臭氧應(yīng)激對(duì)氣道粘膜細(xì)胞群落和粘蛋白表達(dá)譜的影響

陳秋霞  

【摘要】：目的：應(yīng)用臭氧應(yīng)激建立哮喘大鼠模型,觀察臭氧應(yīng)激不同時(shí)間大鼠氣道粘膜細(xì)胞群落和粘蛋白表達(dá)譜的變化,并探討二者之間的關(guān)系,以期進(jìn)一步解釋氣道粘液高分泌機(jī)制,尋找氣道高反應(yīng)時(shí)粘液分泌紊亂的潛在干預(yù)靶點(diǎn),為粘液高分泌性氣道疾病的治療提供一種新思路。 方法：①SD大鼠20只,隨機(jī)分為正常對(duì)照組與臭氧應(yīng)激組,每組10只。分別檢測(cè)兩組大鼠的呼氣相氣道阻力(expiratory airway resistance, Re),支氣管肺泡灌洗液中總蛋白含量測(cè)定及細(xì)胞計(jì)數(shù)和分類；測(cè)定血漿IgE含量；肺、支氣管病理切片。②SD大鼠20只,隨機(jī)分為5組：正常對(duì)照組；臭氧分別應(yīng)激1、3、5、7天,各為一組,每組4只。分別取每組大鼠相同部位氣管制作標(biāo)本,采用掃描電鏡方法觀察與正常對(duì)照組相比較,臭氧應(yīng)激不同時(shí)間動(dòng)物氣道上皮細(xì)胞群落的變化。③20只SD大鼠隨機(jī)分為5組：正常對(duì)照組；臭氧分別應(yīng)激1、3、5、7天,各為一組,每組4只。實(shí)時(shí)熒光定量PCR (RT-PCR)實(shí)驗(yàn)研究臭氧應(yīng)激不同時(shí)間大鼠氣道中粘蛋白Muc5ac、Muc5b mRNA表達(dá)量。制作切片,采用PAS染色結(jié)合免疫圖像分析系統(tǒng)對(duì)粘液儲(chǔ)備量進(jìn)行測(cè)定。 結(jié)果：①采用臭氧攻擊支氣管上皮細(xì)胞形成的變異性氣道高反應(yīng)性模型,各項(xiàng)指標(biāo)(Re、BALF中細(xì)胞分類計(jì)數(shù)、血漿IgE含量、肺和支氣管病理切片)的測(cè)定都證實(shí)了氣道高反應(yīng)性的存在；②正常大鼠氣管上皮幾乎全部被纖毛覆蓋,少見或不可見杯狀細(xì)胞與Clara細(xì)胞和基底細(xì)胞。損傷初期纖毛細(xì)胞脫落、數(shù)量減少,暴露出Clara細(xì)胞。隨著臭氧持續(xù)應(yīng)激損傷加重,纖毛細(xì)胞脫落加劇,Clara細(xì)胞數(shù)量減少,杯狀細(xì)胞增多,未在纖毛細(xì)胞脫落處觀察到杯狀細(xì)胞。應(yīng)激至第7天,杯狀細(xì)胞數(shù)密度和比例增加至最多但增幅下降,纖毛細(xì)胞減至25%,少見Clara細(xì)胞。③RT-PCR:臭氧應(yīng)激組大鼠氣道內(nèi)粘蛋白Muc5ac、Muc5b mRNA的表達(dá)均高于正常對(duì)照組,且與臭氧應(yīng)激時(shí)間成正比。PAS：正常大鼠氣道內(nèi)有少量粘液。隨著應(yīng)激時(shí)間延長(zhǎng),粘蛋白染色加深、總量遞增。 結(jié)論：氣道高反應(yīng)模型鼠的呼吸道粘膜上皮細(xì)胞群落中杯狀細(xì)胞的增多可能并非纖毛細(xì)胞轉(zhuǎn)化導(dǎo)致,而是主要由Clara細(xì)胞充當(dāng)干細(xì)胞向杯狀細(xì)胞轉(zhuǎn)化所致。粘蛋白基因表達(dá)譜的變化與細(xì)胞群落變化相關(guān)性強(qiáng),前者可能應(yīng)歸因于細(xì)胞群落的變化。

【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：湖南師范大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R562.25
【目錄】：

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【參考文獻(xiàn)】

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