細(xì)菌性肺炎(bacterial pneumonia)占醫(yī)院各類病原體肺炎的80%。而在過去的半個(gè)世紀(jì)中，大量廣譜或超廣譜抗菌素投入臨床并未使肺炎的死亡率下降，反而使得細(xì)菌的耐藥率不斷增高。有報(bào)告顯示住院死亡病人約15%與肺炎有關(guān)。社區(qū)獲得性肺炎(CAP)死亡率為5%-10%，而醫(yī)院獲得性肺炎(HAP)的病死率則高達(dá)20%-50%。 細(xì)菌性肺炎是感染性肺炎中較常見的類型，如果沒有及時(shí)有效的治療，嚴(yán)重細(xì)菌感染可以導(dǎo)致高死亡率�？股厥侵委熂�(xì)菌感染性疾病最有效的武器，然而隨著抗生素的濫用，細(xì)菌的耐藥性問題日益加劇，抗生素的殺菌作用受到嚴(yán)峻挑戰(zhàn)。耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(Methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)、廣譜耐藥嗜麥芽窄食單胞菌(Stenotrophomonas maltophilia, SMA)、耐青霉素肺炎鏈球菌(PRSP)和耐萬古霉素金黃色葡萄球菌(VRSA)等多重耐藥菌是醫(yī)院獲得性感染的主要致病菌，其超強(qiáng)耐藥性往往導(dǎo)致感染者不治身亡。 本研究利用臨床分離鑒定的嗜麥芽窄食單胞菌、耐甲氧西林金黃色葡萄球菌建立了細(xì)菌感染小鼠肺部模型。在感染前注射免疫抑制劑地塞米松、環(huán)磷酰胺，造成小鼠自身的免疫抑制，以滴鼻的方式滴入新鮮菌液，時(shí)相性監(jiān)測細(xì)菌感染后小鼠的臨床癥狀、體重、體溫、肺重、血細(xì)胞與組織病理學(xué)變化。結(jié)果顯示，感染肺炎的模型組動物精神萎靡，活動較少，體溫迅速降低，體重下降明顯，肺重增加，，免疫細(xì)胞（WBC、GRAN、LYM、MONO）處在極低水平，小鼠死亡率較高，肺部病理切片觀察結(jié)果顯示：實(shí)驗(yàn)結(jié)束小鼠肺組織結(jié)構(gòu)明顯異常，肺間質(zhì)血管周圍水腫、出血和壞死，肺泡腔炎性細(xì)胞浸潤，肺組織存在明顯的細(xì)菌集團(tuán)。 為了獲得重組溶葡球菌酶，構(gòu)建了pQE30重組質(zhì)粒載體，誘導(dǎo)表達(dá)后得到了目的蛋白，并且證明在體外有殺金黃色葡萄球菌的活性。同時(shí)以耐甲氧西林金黃色葡萄球菌感染小鼠肺炎模型評價(jià)重組溶葡球菌酶治療效果，通過對小鼠體重、體溫、肺重、脾重、血細(xì)胞與組織病理學(xué)變化的時(shí)相性監(jiān)測，評價(jià)重組溶葡球菌酶的療效。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，重組溶葡球菌酶可以減少肺炎小鼠體重、肺重的降低和脾重增加，促進(jìn)動物體溫和免疫細(xì)胞（WBC、GRAN、LYM、MONO）數(shù)量的恢復(fù)，并且減少小鼠死亡例數(shù)，延長死亡小鼠的生存時(shí)間、死亡中位時(shí)間，生存曲線右移，保護(hù)了動物在感染后期免于死亡。實(shí)驗(yàn)表明，重組溶葡球菌酶對臨床分離的耐甲氧西林金黃色葡萄球菌感染小鼠肺炎的治療效果優(yōu)于臨床常用抗生素萬古霉素，在感染肺炎后4小時(shí)，給予高劑量的重組溶葡球菌酶的療效最顯著。 已有研究資料表明溶葡球菌酶對金葡菌具有良好的體內(nèi)、外抗菌作用，有進(jìn)一步開發(fā)成抗金葡菌感染用藥的潛在價(jià)值。但是對于溶葡球菌酶治療金黃色葡萄球菌感染的肺炎還鮮有報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)對重組溶葡球菌酶治療耐甲氧西林金黃色葡萄球菌感染肺炎的效果進(jìn)行了深入研究，找到了有效的治療時(shí)間和藥物劑量，為臨床上進(jìn)一步開發(fā)和應(yīng)用溶葡萄球菌酶治療耐甲氧西林金葡菌感染肺炎提供了實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。

【學(xué)位授予單位】：安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R-332;R563.1
【目錄】：

【共引文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 吳宏;房偉;袁璟;彭惠;張學(xué)成;王永中;肖亞中;;溶葡球菌酶的定點(diǎn)突變與PEG巰基定點(diǎn)修飾[J];生物工程學(xué)報(bào);2011年11期

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3 曾湘淼;;金黃色葡萄球菌的檢測與清除[J];生物信息學(xué);2012年04期

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 上官陶;Lysostaphin乳腺表達(dá)載體構(gòu)建及轉(zhuǎn)基因細(xì)胞制備[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2011年

2 韓莎莎;嗜麥芽寡養(yǎng)食單胞菌致足部皮膚潰瘍一例[D];青島大學(xué);2009年

3 蘇運(yùn)芳;重組溶葡萄球菌素的抑菌特性及對小鼠腸道菌群結(jié)構(gòu)的影響[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2012年

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 周潤琦,馬力,張培德,閻棟材,楊瑞蓉,陳石根;溶葡球菌酶的純化和某些性質(zhì)[J];中國生物化學(xué)與分子生物學(xué)報(bào);1993年03期

2 周潤琦,陳石根,Recsei,A.Paul;從Staphylococcus simulans消除含有溶葡球菌酶基因質(zhì)粒的研究[J];中國生物化學(xué)與分子生物學(xué)報(bào);1993年01期

3 周潤琦,Recsei,A.Paul;溶葡球菌酶前體及前體加工蛋白酶的生成控制和純化[J];中國生物化學(xué)與分子生物學(xué)報(bào);1990年03期

4 周潤琦,陳石根,Recsci,A.Paul;溶葡球菌酶的比色測定及某些性質(zhì)的研究[J];中國生物化學(xué)與分子生物學(xué)報(bào);1989年03期

5 楊信怡;游雪甫;蔣建東;;溶葡球菌酶研究進(jìn)展[J];中國生化藥物雜志;2005年06期

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7 楊信怡,游雪甫,蔣建東;溶葡球菌酶的抗菌活性研究進(jìn)展[J];中國新藥雜志;2005年09期

8 張志明;;前景誘人的基因工程——多肽藥物[J];健康博覽;1996年06期

9 林德龍;;藥物引起的血液病[J];福建醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);1979年S1期

10 Werbel L M ,陳慧貞 ,許先棟;化學(xué)治療藥物:抗菌藥[J];國外醫(yī)學(xué).藥學(xué)分冊;1984年01期