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下調(diào)paralemmin-3表達(dá)對脂多糖誘導(dǎo)的肺泡上皮細(xì)胞核轉(zhuǎn)錄因子-κB活性的影響

發(fā)布時間:2018-03-28 06:21

  本文選題:急性肺損傷 切入點:內(nèi)毒素 出處:《廣東醫(yī)學(xué)》2014年19期


【摘要】:目的研究下調(diào)paralemmin-3(PALM3)表達(dá)對脂多糖(LPS)誘導(dǎo)的肺泡上皮A549細(xì)胞核轉(zhuǎn)錄因子-κB(NF-κB)活性的影響。方法將針對PALM3的小干擾核糖核苷酸(siRNA)轉(zhuǎn)染A549細(xì)胞后(PALM3siRNA轉(zhuǎn)染組),用RT-PCR法檢測PALM3 mRNA表達(dá)水平,同時設(shè)立control siRNA轉(zhuǎn)染組及正常細(xì)胞組作為對照。轉(zhuǎn)染48 h后,對3組細(xì)胞同時給予LPS刺激12 h后,收集細(xì)胞核蛋白和培養(yǎng)上清液,用ELISA的方法檢測各組細(xì)胞培養(yǎng)上清液中的TNF-α、IL-6和IL-1β水平,用凝膠電泳遷移率實驗的方法檢測各組細(xì)胞NF-κB活性。結(jié)果特異性siRNA轉(zhuǎn)染后成功下調(diào)PALM3在A549細(xì)胞中的表達(dá);給予LPS刺激后,與正常細(xì)胞組及control siRNA轉(zhuǎn)染組相比,PALM3 siRNA轉(zhuǎn)染組細(xì)胞釋放炎性因子TNF-α、IL-6和IL-1β減少,同時PALM3 siRNA轉(zhuǎn)染組細(xì)胞中NF-κB活性受抑。結(jié)論下調(diào)PALM3的表達(dá)可減輕A549細(xì)胞對LPS誘導(dǎo)的炎癥反應(yīng),調(diào)控PALM3的表達(dá)有望成為治療急性肺損傷/急性呼吸窘迫綜合征等炎癥失控性疾病的新靶點。
[Abstract]:Objective to study the effect of down-regulation of paralemmin-3pALM3) expression on the activity of nuclear transcription factor- 魏 B-魏-魏 B in alveolar epithelium A549 induced by lipopolysaccharide (LPS). Methods small interfering ribonucleotide siRNAs targeting PALM3 were transfected into A549 cells and then the expression of PALM3 mRNA was detected by RT-PCR. At the same time, control siRNA transfection group and normal cell group were used as control. After 48 h of transfection, three groups of cells were stimulated with LPS for 12 h, then the nuclear protein and culture supernatant were collected. The levels of TNF- 偽 IL-6 and IL-1 尾 in the supernatant of each group were detected by ELISA method, and the activity of NF- 魏 B was detected by gel electrophoresis mobility assay. Results the expression of PALM3 in A549 cells was successfully down-regulated by specific siRNA transfection, and then stimulated by LPS. Compared with normal cell group and control siRNA transfection group, the release of inflammatory cytokines TNF- 偽, IL-6 and IL-1 尾 was decreased in PALM3 siRNA transfection group, while NF- 魏 B activity was inhibited in PALM3 siRNA transfection group. Conclusion down-regulation of PALM3 expression can reduce the inflammatory response induced by LPS in A549 cells. Regulation of PALM3 expression is expected to be a new target for the treatment of acute lung injury / acute respiratory distress syndrome (ARDS).
【作者單位】: 中國人民解放軍海軍總醫(yī)院呼吸內(nèi)科;第三軍醫(yī)大學(xué)新橋醫(yī)院呼吸內(nèi)科;
【基金】:國家自然科學(xué)基金資助項目(編號:81300050)
【分類號】:R563.8

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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【二級參考文獻(xiàn)】

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本文編號:1675114

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