本文選題：寒冷刺激　切入點(diǎn)：外泌體　出處：《中國(guó)生物化學(xué)與分子生物學(xué)報(bào)》2017年10期

【摘要】：外泌體可由多種細(xì)胞分泌,是具有多種生物學(xué)功能的細(xì)胞外囊泡,但其在氣道重塑中的作用尚不明確。為探討經(jīng)寒冷刺激的人支氣管上皮細(xì)胞(BEAS-2B)分泌的外泌體對(duì)人胚肺成纖維細(xì)胞(HLF1)氣道重塑相關(guān)因子表達(dá)的影響,收集BEAS-2B細(xì)胞株培養(yǎng)液提取外泌體,利用透射電鏡及Western印跡對(duì)外泌體進(jìn)行其大小、形態(tài)及標(biāo)志性蛋白的檢測(cè);提取的外泌體與HLF1共同培育,分別設(shè)置空白對(duì)照組、正常對(duì)照組(加入未作干預(yù)的BEAS-2B細(xì)胞所產(chǎn)的外泌體)及寒冷刺激組(加入經(jīng)寒冷刺激后的BEAS-2B細(xì)胞所產(chǎn)的外泌體)。運(yùn)用Real-time PCR及Western印跡技術(shù),分別檢測(cè)各組HLF1表達(dá)FGF-2、TNF-α、MMP-9的mRNA及蛋白情況。結(jié)果顯示,提取BEAS-2B細(xì)胞分泌的外泌體為直徑小于100 nm的圓形或橢圓形結(jié)構(gòu),并表達(dá)外泌體標(biāo)志性蛋白CD9、TSG101、ALIX;寒冷刺激組24 h后,其FGF-2、TNF-α、MMP-9的mRNA及蛋白表達(dá)均顯著高于空白對(duì)照組及正常對(duì)照組(均P0.05)。本研究結(jié)果表明,BEAS-2B細(xì)胞能夠釋放外泌體;經(jīng)寒冷刺激后的BEAS-2B細(xì)胞所釋放的外泌體可以攜帶并傳遞生物信號(hào),誘導(dǎo)HLF1表達(dá)氣道重塑相關(guān)因子。
[Abstract]:Exosomes secreted by many cells, has many biological effects of extracellular vesicles, but its role in airway remodeling is not clear. To investigate the cold stimulation of human bronchial epithelial cells (BEAS-2B) exosomes secreted in human embryonic lung fibroblasts (HLF1) expression of gas channel remodeling related factors, collecting BEAS-2B cells culture fluid extract exosomes, its size by using transmission electron microscopy and Western blotting detection of urinary foreign body, and the shape of the protein marker; exosomes derived from HLF1 co cultivation, respectively set the blank control group, normal control group (exosomes produced without adding the intervention of BEAS-2B cells) and cold stimulation group (adding exosomes by cold stimulation of BEAS-2B cells produced by Real-time). PCR and Western blot, respectively to detect the HLF1 expression of FGF-2, TNF- alpha, mRNA and protein of MMP-9. The results showed that extraction of exosomes secreted by BEAS-2B cells were round or oval structure with diameter less than 100 nm, and the expression of exosome marker protein of CD9, TSG101, ALIX; cold stimulation group after 24 h, the FGF-2, TNF- alpha, mRNA and protein expression of MMP-9 was significantly higher than that of the control group and the normal the control group (P0.05). The results of this study show that BEAS-2B cells can release exosomes; exosomes by cold stimulation of BEAS-2B cells after release can carry biological signals, HLF1 expression induced by airway remodeling associated factors.

【作者單位】： 重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院呼吸內(nèi)科;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金面上基金(No.81270102) 重慶市自然科學(xué)基金(No.cstc2012jj A10050) 重慶市教委科學(xué)技術(shù)研究(No.KJ120301)資助~~
【分類(lèi)號(hào)】：R56

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本文編號(hào)：1658885