發(fā)布時(shí)間：2018-03-05 12:31

  本文選題：慢性阻塞性肺疾病　切入點(diǎn)：巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子　出處：《南方醫(yī)科大學(xué)》2014年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease COPD)是一種常見(jiàn)的以持續(xù)氣流受限為特征的可以預(yù)防和治療的疾病,其主要癥狀是慢性、進(jìn)行性加重的呼吸困難、咳嗽、咳痰。然而,COPD并不僅僅是一種簡(jiǎn)單的“吸煙者的咳嗽”,而是一種診斷不足的,伴有生命危險(xiǎn)的肺部疾病,進(jìn)一步發(fā)展則會(huì)導(dǎo)致死亡。COPD患病率及死亡率均高,已成為一個(gè)重要的公共衛(wèi)生問(wèn)題,目前COPD居全球死亡原因的第四位,隨著吸煙、空氣污染以及老齡化的加重,COPD的流行和負(fù)擔(dān)將會(huì)逐年加重,世界衛(wèi)生組織評(píng)估在2030年COPD哿上升成為全球死亡原因第三位的疾病。當(dāng)前用于COPD治療的藥物,只能夠延緩COPD患者肺功能的下降,而不能夠完全改善患者的癥狀及生活質(zhì)量,目前還需要更多的研究來(lái)完善COPD的發(fā)病機(jī)制以期發(fā)現(xiàn)更有效的治療方式。 COPD的主要癥狀與其病理生理特征密切相關(guān),目前多數(shù)的研究認(rèn)為,COPD的特點(diǎn)是以氣道、肺實(shí)質(zhì)和肺血管的慢性炎癥,其中炎癥細(xì)胞的激活、趨化及炎癥因子的釋放是COPD氣道炎癥的中心環(huán)節(jié),此外,自主神經(jīng)功能紊亂(如膽堿能神經(jīng)受體分布)、肺部蛋白酶和抗蛋白酶系統(tǒng)失衡、氧化應(yīng)激等亦參與了COPD的發(fā)病,實(shí)際上,炎癥和其他的發(fā)病機(jī)制息息相關(guān),互為因果。首先暴露于香煙,氮氧化合物以及有毒氣體等COPD的危險(xiǎn)因素之中均可活化氣道內(nèi)的細(xì)胞,繼而產(chǎn)生大量強(qiáng)有力的細(xì)胞因子、趨化因子,吸引炎細(xì)胞募集到肺部,而炎細(xì)胞又進(jìn)一步分泌各種炎癥因子,從而形成環(huán)路,擴(kuò)大了炎癥反應(yīng),同時(shí)炎癥細(xì)胞發(fā)揮作用的同時(shí)又釋放了一些對(duì)肺組織產(chǎn)生破壞的因子,包括各種彈性蛋白酶,氧化應(yīng)激的產(chǎn)物等導(dǎo)致肺實(shí)質(zhì)的破壞,肺氣腫的形成�？梢�(jiàn)慢性炎癥是COPD形成的基礎(chǔ)。 COPD的慢性炎癥反應(yīng)中,由于參與的炎癥細(xì)胞及炎癥因子較多,還未有一種細(xì)胞因子抑制劑能夠改善COPD的炎癥進(jìn)程,因此找到炎癥反應(yīng)的樞紐環(huán)節(jié)則至關(guān)重要。巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子(microphage migration inhibitory factor, MIF)被報(bào)道是調(diào)節(jié)宿主免疫及免疫應(yīng)答的關(guān)鍵細(xì)胞因子,主要由T細(xì)胞分泌,而幾乎體內(nèi)所有炎癥細(xì)胞均有MIF的表達(dá),他穩(wěn)定存在于與外界直接接觸的組織細(xì)胞之中,包括肺、皮膚的上皮層以及泌尿胃腸道,其分泌的調(diào)節(jié)受到了抗原刺激及垂體-下丘腦-腎上腺軸的共同調(diào)控,MIF的生物學(xué)功能包括抑制巨噬細(xì)胞的移動(dòng)、調(diào)節(jié)T細(xì)胞的生長(zhǎng)和活化,它直接促進(jìn)其他多種炎癥因子的分泌,如TNF-α、 IFN-γ、IL-1β、IL-8、IL-17、花生四烯酸及多種蛋白酶的產(chǎn)生,間接通過(guò)上調(diào)NF-κB的表達(dá)來(lái)進(jìn)一步促進(jìn)炎癥因子的產(chǎn)生等。并且他是體內(nèi)唯一能對(duì)抗糖皮質(zhì)激素的免疫抑制作用和抗炎活性的細(xì)胞因子,這些研究均表明MIF是體內(nèi)免疫系統(tǒng)不可或缺的一種細(xì)胞因子,與糖皮質(zhì)激素共同調(diào)節(jié)機(jī)體免疫。此外,MIF還可通過(guò)抑制P53基因所引起的細(xì)胞凋亡作用來(lái)介導(dǎo)細(xì)胞的增殖和凋亡,因此也對(duì)維持炎癥細(xì)胞的活性和腫瘤細(xì)胞的增殖有重要意義,為炎癥的發(fā)生和腫瘤生長(zhǎng)建立起了橋梁。 MIF在多種疾病的發(fā)生發(fā)展中占有重要的地位,如腎小球腎炎、急性呼吸窘迫綜合征、炎癥性腸病、動(dòng)脈粥樣硬化等,與COPD的研究較少。國(guó)內(nèi)外中僅有佘惟檳等通過(guò)檢測(cè)吸煙患或未患慢性阻塞性肺疾病患者肺組織中MIF的表達(dá)水平,結(jié)果顯示MIF在肺部廣泛表達(dá),吸煙患COPD者較吸煙未患COPD者肺組織MIF蛋白及mRNA的表達(dá)增多,與FEV1%及FEVi/FVC%呈負(fù)相關(guān),提示MIF可能參與COPD的炎癥反應(yīng),我們先前的研究通過(guò)檢測(cè)外周血T細(xì)胞及血清中MIF的表達(dá)水平來(lái)探討MIF與COPD的關(guān)系,結(jié)果表明急性加重組外周血中T細(xì)胞MIF的表達(dá)明顯增高,而穩(wěn)定期與對(duì)照組則無(wú)明顯差異,血清中MIF的表達(dá)三組無(wú)差異。我們推測(cè)MIF作為一種細(xì)胞因子可能對(duì)病變的部位直接產(chǎn)生的作用更為明顯,因此肺內(nèi)及氣道內(nèi)的表達(dá)對(duì)于探討MIF在COPD發(fā)病中的作用顯得十分必要,同時(shí),由于T細(xì)胞是MIF的主要來(lái)源,因此,我們通過(guò)檢測(cè)誘導(dǎo)痰中炎癥細(xì)胞以及T細(xì)胞中MIF的表達(dá),旨在探討氣道中炎癥細(xì)胞以及MIF在COPD發(fā)病中的可能作用。 研究目的：了解誘導(dǎo)痰炎細(xì)胞在COPD急性加重期、穩(wěn)定期的變化,探討炎癥細(xì)胞百分比的變化與各臨床指標(biāo)的相關(guān)性；測(cè)定COPD患者在急性加重期、穩(wěn)定期以及對(duì)照組誘導(dǎo)痰中T細(xì)胞MIF的表達(dá)及其與各臨床指標(biāo)的相關(guān)性分析。 研究方法：研究對(duì)象分為三組：COPD急性加重組,COPD急定組及對(duì)照組。COPD患者均符合2011年GOLD制定的診斷標(biāo)準(zhǔn),COPD急性加重組為2013年1月至2013年11月我院呼吸內(nèi)科住院治療的患者,既往診斷為COPD,近期因呼吸道癥狀加重,超過(guò)了日常變異范圍,需要調(diào)整藥物而來(lái)我院治療；COPD穩(wěn)定期組為同期我院門診初診的COPD患者,既往未使用過(guò)激素類制劑,兩個(gè)月內(nèi)未有急性發(fā)作；對(duì)照組為同期來(lái)我院體檢的人員,選擇年齡及吸煙史匹配,經(jīng)胸片、肺通氣功能測(cè)定均未發(fā)現(xiàn)異常的人員。排除標(biāo)準(zhǔn)：已知MIF可能參與發(fā)病的疾�。喝缣悄虿�,冠心病,心肌梗死,風(fēng)濕免疫性疾病(類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、血管炎),消化道疾(肝炎、肝硬化、炎癥性腸病),泌尿系疾病(急慢性腎小球。腎炎、腎病綜合癥),惡性腫瘤等；可能影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的肺部疾患：如肺結(jié)核,肺癌,支氣管哮喘、過(guò)敏性鼻炎,支氣管擴(kuò)張以及呼吸道感染及傳染病患者等,以及排除不適合進(jìn)行誘導(dǎo)痰及肺功能檢查的患者。細(xì)胞計(jì)數(shù)法檢測(cè)正常吸煙對(duì)照組、COPD穩(wěn)定組及COPD急性加重組誘導(dǎo)痰中各炎癥細(xì)胞百分比,流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)CD4+MIF+T細(xì)胞占總CD4+T細(xì)胞的百分比(CD4+MIF+T%), CD8+MIF+T細(xì)胞占總CD8+T細(xì)胞的百分比(CD8+MIF+T%), MIF的平均熒光強(qiáng)度(MFI),并與FEV1%、FEV1/FVC%、CAT評(píng)分、mMRC呼吸困難等級(jí)等行相關(guān)性分析。 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析應(yīng)用SPSS21.0軟件,連續(xù)型變量數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±S)表示,數(shù)據(jù)均先進(jìn)行正態(tài)性檢驗(yàn)和方差齊性檢驗(yàn),三組比較時(shí)采用單因素方差分析(ANOVA)、兩兩比較方差齊則采用LSD方法方差不齊采用Tambance's T2,相關(guān)性分析中若兩組資料均服從正態(tài)分布則采用pearson相關(guān)檢驗(yàn),若兩者有一方不服從正態(tài)分布則使用spearman相關(guān)檢驗(yàn)；CAT評(píng)分用兩獨(dú)立樣本比較的t檢驗(yàn),mMRC等級(jí)使用多個(gè)樣本比較的Kruskal-Wallis H檢驗(yàn)。除正態(tài)性檢驗(yàn)及方差齊性檢驗(yàn)P0.1表示數(shù)據(jù)符合正態(tài)分布并且方差齊,其余則以P0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)果： 1.一般資料：急性加重期組20例,其中男19例,女1例,平均年齡(68.8±8.1)歲,FEV1%pred55.8±11.2,FEV1/FVC58.5±7.1,吸煙指數(shù)(包年)：130.22±234.94,體重指數(shù)：20.8±2.6；CAT評(píng)分：19.8±7.4, mMRC平均秩：35.8；穩(wěn)定期組18例,其中男性16例,女性2例,平均年齡為(65.2±6.2)歲,FEV1%pred60.6±17.5,FEV1/FVC61.1±5.6,吸煙指數(shù)(包年)：96.88±183.40,體重指數(shù)：21.7±2.6；CAT評(píng)分：18.6±8.1, mMRC平均秩：32.6；對(duì)照組15例,其中男13例,女2例；平均年齡(63.5±4.8)歲,FEV1%pred89.3±5.5,FEV1/FVC85.9±5.1,吸煙指數(shù)(包年)：25.80±15.91,體重指數(shù)：22.5±3.2; mMRC平均秩：8.5。 2.中性粒細(xì)胞百分比在三組中有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(F=23.56,P0.05),其中急性加重組明顯高于穩(wěn)定組及對(duì)照組,穩(wěn)定組與對(duì)照組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；三組中巨噬細(xì)胞百分比有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(F=28.92,P0.05),兩兩比較中,在急性加重組低于穩(wěn)定組及對(duì)照組,穩(wěn)定組和對(duì)照組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；淋巴細(xì)胞百分比在三組比較中亦有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(F=7.04,P0.05),兩兩比較中,急性加重組與穩(wěn)定組相比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,但均較對(duì)照組升高；嗜酸性粒細(xì)胞百分比各組間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(F=7.040.595,P0.05)。中性粒細(xì)胞百分比與FEV1%及FEV1/FVC呈負(fù)相關(guān)(r分別為-0.461、-0.400,P均小于0.05),其余細(xì)胞百分比與患者癥狀及疾病相關(guān)指數(shù)均無(wú)相關(guān)性。 3.MIF在CD8+T細(xì)胞中的表達(dá)：CD8+MIF+T細(xì)胞占CD8+T細(xì)胞的百分比：急性加重組較穩(wěn)定期升高,穩(wěn)定期較對(duì)照組升高,差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；CD8+MIF的平均熒光強(qiáng)度：急性加重期組相對(duì)于穩(wěn)定期組、對(duì)照組均有明顯升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,穩(wěn)定期組相對(duì)于對(duì)照組并沒(méi)有獲得統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。MIF在CD4+T細(xì)胞中的表達(dá)：CD4+MF+T細(xì)胞占CD4+T細(xì)胞的百分比：急性加重期組相對(duì)于穩(wěn)定期組、對(duì)照組均有明顯升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,穩(wěn)定期組相對(duì)于對(duì)照組并沒(méi)有獲得統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；CD4+MIF的平均熒光強(qiáng)度各組相比均未見(jiàn)差異。CD8+MIF+T%與FEV1%呈負(fù)相關(guān)(r=-0.439,P0.05),與FEV1/FVC%呈負(fù)相關(guān)(r=-0.137,P0.05),與nMRC呼吸困難指數(shù)呈正相關(guān)(r=0.466,P0.05),與CAT評(píng)分呈正相關(guān)(r=0.491, P0.05); CD4+MIF+T%亦與mMRC呼吸困難指數(shù)級(jí)CAT評(píng)分呈正相關(guān),(r分別為0.450、0.415,P值均小于0.05)。 4.急性加重期CRP與CD8+MIF+T%、CD4+MIF+T%、CD8+MIF MFI及CD4+MIF MFI的相關(guān)性分析：CRP與各值均呈正相關(guān),r值分別為：0.613,0.541,0.614,0.486P值均小于0.05。 結(jié)論： 1.COPD患者誘導(dǎo)痰中炎癥細(xì)胞的比例在急性加重期與穩(wěn)定期時(shí)不盡相同,急性加重期時(shí)以中性粒細(xì)胞為主,穩(wěn)定期則以中性粒細(xì)胞和巨噬細(xì)胞為主,淋巴細(xì)胞的百分比的改變則可能示區(qū)別正常吸煙者和COPD患者的標(biāo)準(zhǔn)之一,嗜酸性粒細(xì)胞在COPD發(fā)病中的意義可能不大。 2.MIF可能參與了COPD穩(wěn)定期及急性加重期的發(fā)病,尤其是急性加重期；同時(shí)在穩(wěn)定期,MIF可能主要是通過(guò)CD8+T細(xì)胞發(fā)揮相應(yīng)的作用。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：南方醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R563.9

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 ;The role of Toll-like receptors in non-infectious lung injury[J];Cell Research;2006年08期

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本文編號(hào)：1570244