本文關(guān)鍵詞：內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激在Pm2.5誘導(dǎo)大鼠肺泡巨噬細(xì)胞凋亡中的作用　出處：《山西醫(yī)科大學(xué)》2016年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

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【摘要】：目的:本研究通過(guò)用pm2.5干預(yù)傳代培養(yǎng)的大鼠肺泡巨噬細(xì)胞,檢測(cè)細(xì)胞存活率、凋亡率,及內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激信號(hào)分子CHOP、GRP78的m RNA相對(duì)表達(dá)量,探討內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激在pm2.5誘導(dǎo)肺泡巨噬細(xì)胞凋亡過(guò)程中的作用。方法:用不同濃度的pm2.5干預(yù)傳代培養(yǎng)的肺泡巨噬細(xì)胞(NR8383細(xì)胞),分6個(gè)濃度組(分別為H0:0μg/ml,空白對(duì)照組,加等體積的PBS液;H1:40μg/ml;H2:80μg/ml;H3:160μg/ml;H4:320μg/ml;H5:640μg/ml),經(jīng)12h、24h、48h三個(gè)時(shí)間后,用MTT法檢測(cè)NR8383細(xì)胞的存活率,選擇最佳的干預(yù)時(shí)間。將傳代的NR8383細(xì)胞接種于6孔板,濃度組設(shè)置同MTT,每組設(shè)3個(gè)復(fù)孔(n=3),經(jīng)最佳干預(yù)時(shí)間后,采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)各濃度組細(xì)胞的早期凋亡率及總凋亡率,用RT-PCR法檢測(cè)各濃度組CHOPm RNA、GRP78m RNA的相對(duì)表達(dá)量。結(jié)果:pm2.5干預(yù)12h后,H1組與H0組、H2組與H1組細(xì)胞存活率間的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),余組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),且隨干預(yù)濃度的增加,細(xì)胞存活率下降。干預(yù)24h后,除H5組與H4組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),余各組細(xì)胞存活率的組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。干預(yù)48h后,H4組與H3組及H5組與H4組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),余各組細(xì)胞存活率的組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。各濃度組在pm2.5環(huán)境中暴露分別暴露12h、24h、48h后,以暴露24h后各濃度組間差異較12h、48h明顯,確定24h為最佳的干預(yù)時(shí)間。經(jīng)不同濃度的pm2.5干預(yù)24h后,H1組較H0組、H5組較H4組的細(xì)胞早期凋亡率無(wú)明顯增加,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),余各組與H0組相比,細(xì)胞早期凋亡率明顯增加,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。干預(yù)24h后,各濃度組的細(xì)胞總凋亡率較H0組均增加明顯,且隨干預(yù)的濃度的增加,細(xì)胞凋亡率相應(yīng)增加,組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。不同濃度pm2.5干預(yù)24h后,H1組較H0組、H4組較H3組的GRP78m RNA的相對(duì)表達(dá)量無(wú)明顯增加,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),余各組與H0相比,GRP78m RNA的相對(duì)表達(dá)量均增加,組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。干預(yù)24h后,各濃度組的細(xì)胞CHOPm RNA的相對(duì)表達(dá)量較H0組增加明顯,隨干預(yù)濃度的增加,其相對(duì)表達(dá)量相應(yīng)增加,組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:pm2.5誘導(dǎo)NR8383細(xì)胞凋亡,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激參與pm2.5誘導(dǎo)NR8383細(xì)胞凋亡的過(guò)程。
[Abstract]:Objective : To investigate the effect of internal net stress on the apoptosis of alveolar macrophages induced by pm2 . 5 . The effect of endoplasmic reticulum stress on the apoptosis of alveolar macrophages was investigated by MTT assay . After 24 hours of intervention , the relative expression of GRP78m RNA in group H1 and H4 increased significantly ( P0.05 ) . After intervention for 24 h , the relative expression of GRP78m RNA in group H1 and H4 increased significantly ( P0.05 ) . Conclusion : After 24 hours of intervention , the relative expression of GRP78m RNA in group H1 and H4 increased significantly ( P0.05 ) .

【學(xué)位授予單位】：山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R56

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