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呼出氣冷凝液中TNF-α和IL-1β與肺功能和并發(fā)癥的相關性研究

發(fā)布時間:2018-01-04 12:03

  本文關鍵詞:呼出氣冷凝液中TNF-α和IL-1β與肺功能和并發(fā)癥的相關性研究 出處:《天津醫(yī)科大學》2016年碩士論文 論文類型:學位論文


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【摘要】:目的:呼出氣冷凝液(Exhaled breath condensate,EBC)是一種近年來非常流行的、具有完全無創(chuàng)傷、操作簡單方便等眾多優(yōu)點的呼吸系統(tǒng)疾病的檢測方法。呼出氣冷凝液中含有大量的介質因子,目前認為分子質量小于65ku的小分子物質均可以進入呼出氣冷凝液中。慢性阻塞性肺疾病(COPD)是一種非常常見的呼吸系統(tǒng)慢性疾病,在實際的臨床工作中,接受手術的胸外科病人中有大部分病人合并有慢性阻塞性肺疾病,而我們通常使用的肺功能檢查指標反映的僅僅是患者的的通氣功能,并沒有直接反映患者的肺部病理生理狀態(tài)的指標,所以我們只依靠肺功能的檢查結果來判斷病人的真實肺部功能狀態(tài)有可能造成一定的偏差,從而影響主治醫(yī)師對于患者的手術實施難度、術后恢復的判斷以及術后并發(fā)癥的預防等各個方面的判斷。實際的臨床工作中,我們常常遇到這種的情況,肺功能顯示各項指標很差的病人,術后恢復相當順利,沒有任何并發(fā)癥的發(fā)生。更加令人意外的是,很多肺功能結果很好的病人,手術反而出現(xiàn)很多并發(fā)癥,術后恢復緩慢,這就要求我們更加重視患者的真實肺部病理生理狀態(tài),及時的加于外力干預,術前術后給予肺保護的預防和康復治療,有可能給患者的生命健康提供更加強有力的保證。如何更準確的評價患者的術前肺功能,真實的反映患者的肺部病理生理狀態(tài),我們展開以下研究,本研究主要解決以下幾個問題:1.呼出氣冷凝液中能否檢測出TNF-α和IL-1β兩種物質。2.呼出氣冷凝液中TNF-α以及IL-1β的含量能否直接反映肺組織中TNF-α及IL-1β的含量。3.呼出氣冷凝液及肺組織中TNF-α和IL-1β的含量能否放映肺功能的水平。4.經(jīng)過肺保護治療后,呼出氣冷凝液中TNF-α和IL-1β的含量是否有所變化。方法:選取2015年1月至2015年6月在天津市胸科醫(yī)院住院因肺癌行肺葉切除手術的患者60例,入院后首先檢測肺功能指標,根據(jù)肺功能結果分為三組,即COPD治療組,COPD對照組,非COPD組,其中COPD治療組入院后給予1周肺保護治療以改善肺功能,其他兩組不予任何肺保護治療。COPD對照組與非COPD組術前第一天收集呼出氣冷凝液和動脈血氣,COPD治療組術前第七天及術前第一天分別收集呼出氣冷凝液及動脈血氣,三組術后第一天及第七天全部收集呼出氣冷凝液及動脈血氣,術中收集肺組織標本;收集的呼出氣冷凝液儲存于-80℃的冰箱中待測,用ELISA法檢測呼出氣冷凝液和肺組織中TNF-α和IL-1β的含量;手術切除的肺葉標本距離病灶5厘米以上,快速取1cm3大小的肺組織3塊,分別用于石蠟切片免疫熒光(Immunofluorescence)檢測及用ELISA法檢測肺組織中TNF-α與IL-1β含量以及透射電子顯微鏡(Transmission Electron Microscopy,TEM)觀察。用于免疫熒光檢測的肺組織標本用10%福爾馬林固定,石蠟包埋,制成4微米厚度切片;用ELISA法檢測肺組織中TNF-α與IL-1β含量的肺組織置于-80℃的冰箱中保存,用于TEM觀察的肺組織標本立即置入標本固定液中,低溫0-4℃條件下送至電鏡室。結果:1.呼出氣冷凝液中:COPD治療組:TNF-α的含量均值在術前第七天,術前第一天,術后第一天,術后第七天分別為0.838pg/μl,0.4638pg/μl,0.6643pg/μl,0.2507pg/μl;IL-1β的含量均值在術前第七天,術前一天,術后第一天,術后第七天分別為3.7162pg/μl,1.4129pg/μl,2.2569pg/μl,0.8489pg/μl;COPD對照組:TNF-α的含量均值在術前第一天,術后第一天,術后第七天分別為0.7282pg/μl,0.8353pg/μl,0.3979pg/μl;IL-1β的含量均值在術前第一天,術后第一天,術后第七天分別為2.9012pg/μl,3.3221pg/μl,1.3832pg/μl。非COPD組:TNF-α的含量均值在術前第一天,術后第一天,術后第七天的分別為0.4513pg/μl,0.5025pg/μl,0.2746pg/μl;IL-1β的含量均值在術前第一天,術后第一天,術后第七天分別為1.3317pg/μl,1.7316pg/μl,0.6362pg/μl。2.三組患者肺組織中TNF-α的含量均值在COPD治療組,COPD對照組,非COPD組分別為0.0291pg/μl,0.0417pg/μl,0.0323pg/μl;IL-1β的含量均值在COPD治療組,COPD對照組,非COPD組分別為0.0297pg/μl,0.0640pg/μl,0.0257pg/μl。3.石蠟切片免疫熒光結果:COPD治療組,COPD對照組,非COPD組所有照片的IL-1β分布平均光密度值(mean density)分別為3.60×10-4,3.69×10-4,3.40×10-4;COPD治療組,COPD對照組,非COPD組所有照片的TNF-α分布平均光密度值分別為10.15×10-4,11.81×10-4,8.89×10-4。結論:1.呼出氣冷凝液中TNF-α和IL-1β的含量可以放映肺組織中TNF-α和IL-1β的含量,且成正相關。2.呼出氣冷凝液與肺組織中TNF-α和IL-1β的含量可以反映肺功能狀態(tài)。3.呼出氣冷凝液中TNF-α和IL-1β的含量在COPD組顯著高于非COPD組;COPD治療組中,經(jīng)過一周肺保護之后,TNF-α和IL-1β的含量顯著下降,手術后,TNF-α和IL-1β的含量又明顯上升,術后行肺保護后TNF-α和IL-1β的含量又明顯下降,說明術前肺保護對COPD的炎性反應及應激變化有明顯影響。4.肺組織中TNF-α與IL-1β的含量,COPD組顯著高于非COPD組。5.呼出氣冷凝液中TNF-α和IL-1β的含量與術后并發(fā)癥沒有明顯相關性。6.COPD組的IL-1β和TNF-α比非COPD組的石蠟切片免疫熒光分布累積光密度大,分布面積廣,COPD治療組的平均累積光密度顯著低于COPD對照組。
[Abstract]:Objective : Exhaled breath condensate ( EBG ) is a very popular method for detecting respiratory diseases in patients with chronic obstructive pulmonary disease ( COPD ) . The levels of TNF - 偽 and IL - 1尾 in lung tissues were measured by ELISA . Results : The mean values of TNF - 偽 and IL - 1尾 in lung tissues were 0.38pg / 渭l , 0.38pg / 渭l , 0.3979pg / 渭l , 0.38pg / 渭l and 0.3979pg / 渭l respectively . The levels of TNF - 偽 and IL - 1尾 in lung tissues were significantly higher in COPD group than in non - COPD group .

【學位授予單位】:天津醫(yī)科大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2016
【分類號】:R56

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