本文關(guān)鍵詞：呼出氣冷凝液中TNF-α和IL-1β與肺功能和并發(fā)癥的相關(guān)性研究　出處：《天津醫(yī)科大學(xué)》2016年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

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【摘要】：目的:呼出氣冷凝液(Exhaled breath condensate,EBC)是一種近年來非常流行的、具有完全無創(chuàng)傷、操作簡(jiǎn)單方便等眾多優(yōu)點(diǎn)的呼吸系統(tǒng)疾病的檢測(cè)方法。呼出氣冷凝液中含有大量的介質(zhì)因子,目前認(rèn)為分子質(zhì)量小于65ku的小分子物質(zhì)均可以進(jìn)入呼出氣冷凝液中。慢性阻塞性肺疾病(COPD)是一種非常常見的呼吸系統(tǒng)慢性疾病,在實(shí)際的臨床工作中,接受手術(shù)的胸外科病人中有大部分病人合并有慢性阻塞性肺疾病,而我們通常使用的肺功能檢查指標(biāo)反映的僅僅是患者的的通氣功能,并沒有直接反映患者的肺部病理生理狀態(tài)的指標(biāo),所以我們只依靠肺功能的檢查結(jié)果來判斷病人的真實(shí)肺部功能狀態(tài)有可能造成一定的偏差,從而影響主治醫(yī)師對(duì)于患者的手術(shù)實(shí)施難度、術(shù)后恢復(fù)的判斷以及術(shù)后并發(fā)癥的預(yù)防等各個(gè)方面的判斷。實(shí)際的臨床工作中,我們常常遇到這種的情況,肺功能顯示各項(xiàng)指標(biāo)很差的病人,術(shù)后恢復(fù)相當(dāng)順利,沒有任何并發(fā)癥的發(fā)生。更加令人意外的是,很多肺功能結(jié)果很好的病人,手術(shù)反而出現(xiàn)很多并發(fā)癥,術(shù)后恢復(fù)緩慢,這就要求我們更加重視患者的真實(shí)肺部病理生理狀態(tài),及時(shí)的加于外力干預(yù),術(shù)前術(shù)后給予肺保護(hù)的預(yù)防和康復(fù)治療,有可能給患者的生命健康提供更加強(qiáng)有力的保證。如何更準(zhǔn)確的評(píng)價(jià)患者的術(shù)前肺功能,真實(shí)的反映患者的肺部病理生理狀態(tài),我們展開以下研究,本研究主要解決以下幾個(gè)問題:1.呼出氣冷凝液中能否檢測(cè)出TNF-α和IL-1β兩種物質(zhì)。2.呼出氣冷凝液中TNF-α以及IL-1β的含量能否直接反映肺組織中TNF-α及IL-1β的含量。3.呼出氣冷凝液及肺組織中TNF-α和IL-1β的含量能否放映肺功能的水平。4.經(jīng)過肺保護(hù)治療后,呼出氣冷凝液中TNF-α和IL-1β的含量是否有所變化。方法:選取2015年1月至2015年6月在天津市胸科醫(yī)院住院因肺癌行肺葉切除手術(shù)的患者60例,入院后首先檢測(cè)肺功能指標(biāo),根據(jù)肺功能結(jié)果分為三組,即COPD治療組,COPD對(duì)照組,非COPD組,其中COPD治療組入院后給予1周肺保護(hù)治療以改善肺功能,其他兩組不予任何肺保護(hù)治療。COPD對(duì)照組與非COPD組術(shù)前第一天收集呼出氣冷凝液和動(dòng)脈血?dú)?COPD治療組術(shù)前第七天及術(shù)前第一天分別收集呼出氣冷凝液及動(dòng)脈血?dú)?三組術(shù)后第一天及第七天全部收集呼出氣冷凝液及動(dòng)脈血?dú)?術(shù)中收集肺組織標(biāo)本;收集的呼出氣冷凝液儲(chǔ)存于-80℃的冰箱中待測(cè),用ELISA法檢測(cè)呼出氣冷凝液和肺組織中TNF-α和IL-1β的含量;手術(shù)切除的肺葉標(biāo)本距離病灶5厘米以上,快速取1cm3大小的肺組織3塊,分別用于石蠟切片免疫熒光(Immunofluorescence)檢測(cè)及用ELISA法檢測(cè)肺組織中TNF-α與IL-1β含量以及透射電子顯微鏡(Transmission Electron Microscopy,TEM)觀察。用于免疫熒光檢測(cè)的肺組織標(biāo)本用10%福爾馬林固定,石蠟包埋,制成4微米厚度切片;用ELISA法檢測(cè)肺組織中TNF-α與IL-1β含量的肺組織置于-80℃的冰箱中保存,用于TEM觀察的肺組織標(biāo)本立即置入標(biāo)本固定液中,低溫0-4℃條件下送至電鏡室。結(jié)果:1.呼出氣冷凝液中:COPD治療組:TNF-α的含量均值在術(shù)前第七天,術(shù)前第一天,術(shù)后第一天,術(shù)后第七天分別為0.838pg/μl,0.4638pg/μl,0.6643pg/μl,0.2507pg/μl;IL-1β的含量均值在術(shù)前第七天,術(shù)前一天,術(shù)后第一天,術(shù)后第七天分別為3.7162pg/μl,1.4129pg/μl,2.2569pg/μl,0.8489pg/μl;COPD對(duì)照組:TNF-α的含量均值在術(shù)前第一天,術(shù)后第一天,術(shù)后第七天分別為0.7282pg/μl,0.8353pg/μl,0.3979pg/μl;IL-1β的含量均值在術(shù)前第一天,術(shù)后第一天,術(shù)后第七天分別為2.9012pg/μl,3.3221pg/μl,1.3832pg/μl。非COPD組:TNF-α的含量均值在術(shù)前第一天,術(shù)后第一天,術(shù)后第七天的分別為0.4513pg/μl,0.5025pg/μl,0.2746pg/μl;IL-1β的含量均值在術(shù)前第一天,術(shù)后第一天,術(shù)后第七天分別為1.3317pg/μl,1.7316pg/μl,0.6362pg/μl。2.三組患者肺組織中TNF-α的含量均值在COPD治療組,COPD對(duì)照組,非COPD組分別為0.0291pg/μl,0.0417pg/μl,0.0323pg/μl;IL-1β的含量均值在COPD治療組,COPD對(duì)照組,非COPD組分別為0.0297pg/μl,0.0640pg/μl,0.0257pg/μl。3.石蠟切片免疫熒光結(jié)果:COPD治療組,COPD對(duì)照組,非COPD組所有照片的IL-1β分布平均光密度值(mean density)分別為3.60×10-4,3.69×10-4,3.40×10-4;COPD治療組,COPD對(duì)照組,非COPD組所有照片的TNF-α分布平均光密度值分別為10.15×10-4,11.81×10-4,8.89×10-4。結(jié)論:1.呼出氣冷凝液中TNF-α和IL-1β的含量可以放映肺組織中TNF-α和IL-1β的含量,且成正相關(guān)。2.呼出氣冷凝液與肺組織中TNF-α和IL-1β的含量可以反映肺功能狀態(tài)。3.呼出氣冷凝液中TNF-α和IL-1β的含量在COPD組顯著高于非COPD組;COPD治療組中,經(jīng)過一周肺保護(hù)之后,TNF-α和IL-1β的含量顯著下降,手術(shù)后,TNF-α和IL-1β的含量又明顯上升,術(shù)后行肺保護(hù)后TNF-α和IL-1β的含量又明顯下降,說明術(shù)前肺保護(hù)對(duì)COPD的炎性反應(yīng)及應(yīng)激變化有明顯影響。4.肺組織中TNF-α與IL-1β的含量,COPD組顯著高于非COPD組。5.呼出氣冷凝液中TNF-α和IL-1β的含量與術(shù)后并發(fā)癥沒有明顯相關(guān)性。6.COPD組的IL-1β和TNF-α比非COPD組的石蠟切片免疫熒光分布累積光密度大,分布面積廣,COPD治療組的平均累積光密度顯著低于COPD對(duì)照組。
[Abstract]:Objective : Exhaled breath condensate ( EBG ) is a very popular method for detecting respiratory diseases in patients with chronic obstructive pulmonary disease ( COPD ) . The levels of TNF - 偽 and IL - 1尾 in lung tissues were measured by ELISA . Results : The mean values of TNF - 偽 and IL - 1尾 in lung tissues were 0.38pg / 渭l , 0.38pg / 渭l , 0.3979pg / 渭l , 0.38pg / 渭l and 0.3979pg / 渭l respectively . The levels of TNF - 偽 and IL - 1尾 in lung tissues were significantly higher in COPD group than in non - COPD group .

【學(xué)位授予單位】：天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R56

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