本文關(guān)鍵詞：全氟化碳對(duì)脂多糖致肺泡表面Ⅱ型上皮細(xì)胞損傷時(shí)MAPK細(xì)胞信號(hào)通路的影響

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【摘要】：目的：ALI/ARDS是一種常見(jiàn)的呼吸系統(tǒng)危重癥，發(fā)病率和死亡率較高。大量中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)過(guò)度釋放炎性介質(zhì)導(dǎo)致肺泡毛細(xì)血管膜損傷，引起通氣氧合障礙是其主要發(fā)病機(jī)理。全氟化碳（Perfluorocarbon PFC）作為液體通氣介質(zhì)被用于ALI/ARDS治療，可以顯著改善氧和及肺功能，減少中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)，但其作用機(jī)制尚未完全闡明。本研究擬觀察PFC對(duì)LPS至肺泡II型上皮細(xì)胞趨化因子MIP-1α,MIP-2，MCP-1表達(dá)與MAPK信號(hào)通路的變化關(guān)系,為PFC治療ALI/ARDS提供新的理論基礎(chǔ)及實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法：：（1）用PFC干預(yù)LPS誘導(dǎo)的A549急性肺損傷細(xì)胞模型，細(xì)胞分為空白對(duì)照組（C），LPS刺激組（LPS），，LPS+PFC干預(yù)組（L+P），PFC干預(yù)組（PFC）四組，應(yīng)用熒光實(shí)時(shí)定量PCR和ELISA檢測(cè)各組細(xì)胞在干預(yù)1、2、4、6、8、12h時(shí)MIP-1α、MIP-2、MCP-1mRNA水平和蛋白水平的變化。（2）應(yīng)用western blot方法檢測(cè)1、2、4、6、8、12h ERK1/2, p38MAPK,JNK,ATF-2,c-jun磷酸化及總蛋白表達(dá)變化。（3）將ERK1/2, JNK，p38MAPK通路抑制劑U0126, SP600125, andSB203580單獨(dú)或兩兩混合預(yù)先加入LPS干預(yù)的A549細(xì)胞中，應(yīng)用熒光實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)1、6、12h MIP-2mRNA表達(dá)的變化。 結(jié)果：（1）PFC可抑制LPS誘導(dǎo)的A549細(xì)胞MIP-2基因mRNA和蛋白的表達(dá)。（2）PFC可抑制ERK1/2, p38MAPK,JNK及其下游ATF-2,c-jun磷酸化。（3）ERK1/2, p38MAPK,JNK信號(hào)通路抑制劑可以抑制LPS誘導(dǎo)MIP-2mRNA的表達(dá)。（4）PFC可能通過(guò)抑制MAPK信號(hào)通路磷酸化而抑制MIP-2表達(dá)及分泌，從而達(dá)到抗炎作用。
【學(xué)位授予單位】：中國(guó)人民解放軍醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R563.8

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本文編號(hào)：1153066