本文關鍵詞：肺結核患者外周血不同T細胞亞群中免疫記憶性亞型細胞的分布差異

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【摘要】：研究背景:結核病(Tuberculosis,TB)是由于結核分枝桿菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)感染引起的慢性傳染病,目前在全球范圍仍然是最常見和最嚴重的傳染病之一。CD4+T,CD8+T和γδT細胞在抗MTB感染的免疫過程中起了重要作用。T細胞分為初始型T細胞(Tnaive),中央記憶型T細胞(Tcm),效應記憶型T細胞(Tem)和效應型T細胞(Teff)。Tcm可以歸巢到次級淋巴組織,產(chǎn)生大量細胞因子IL-2,少量其他效應分子。Tem產(chǎn)生大量效應性細胞因子,發(fā)揮快速的效應功能,并進入外周組織。Teff則產(chǎn)生效應性細胞因子,并發(fā)揮細胞毒效應。Vγ9Vδ2 T細胞在人外周血中占大多數(shù),根據(jù)其表面表達的分子及效應功能,也可分為初始型,記憶型及效應型等免疫亞型。但肺TB患者外周血不同T細胞亞群中免疫記憶性細胞亞型的數(shù)量有何變化尚少報導。目的:觀察和分析肺TB患者外周血不同T細胞亞群中免疫記憶性細胞亞型的變化。方法:1.采集健康成人及肺TB患者外周血,加入熒光標記單抗進行表面分子染色(anti-CD45RA-FITC,anti-TCRγδ-APC-Vio770,ani-CD4-APC-Vio77,anti-CD27-APC,anti-Vδ1-PE,anti-Vδ2-Per CP,anti-CD8-PE-Cy7,anti-CD3-BV421,anti-CD27-BV510)。通過CD45RA和CD27將不同T細胞亞群(CD4、CD8、Vδ1、Vδ2和Vδ3-8)中免疫記憶性亞型細胞分為Tnaive(CD45RA+CD27+),Tcm(CD45RA—CD27+),Tem(CD45RA—CD27—)和Teff(CD45RA+CD27—)。流式細胞儀檢測不同T細胞亞群中的免疫記憶性亞型細胞的分布百分率,比較健康成人和肺TB患者之間的差異。2.采集健康成人及肺TB患者外周血,加入佛波醇酯(PMA)和鈣離子霉素(Ionomycin)培養(yǎng)2小時后,再加入莫能霉素(Monensin)繼續(xù)培養(yǎng)4小時,收集細胞,加入熒光標記單抗進行表面分子和胞內(nèi)染色(anti-CD45RA-FITC,anti-TCRγδ-APC-Vio770,ani-CD4-APC-Vio77,anti-CD27-APC,anti-Vδ1-PE,anti-Vδ2-Per CP,anti-CD8-PE-Cy7,anti-CD3-BV421,anti-CD27-BV510,anti-IL-17-APC,anti-IFN-γ-APC)。通過CD45RA和CD27將產(chǎn)IL-17或IFN-γ的不同T細胞亞群(CD4、CD8、Vδ1、Vδ2和Vδ3-8)中免疫記憶性亞型細胞分為Tnaive(CD45RA+CD27+),Tcm(CD45RA—CD27+),Tem(CD45RA—CD27—)和Teff(CD45RA+CD27—)。流式細胞儀檢測產(chǎn)IL-17或產(chǎn)IFN-γ的αβT和γδT細胞亞群中記憶型免疫亞型細胞的分布比例,比較健康成人和肺TB患者之間的差異。結果:1.健康成人和肺TB患者外周血中CD4+T細胞中的Tnaive分別為57.53±13.59和36.49±17.65,(P0.01);Tem分別為6.03±3.26和24.44±10.76,(P0.01);Teff分別為3.26±4.09和0.75±0.58,(P0.01)。健康成人和肺TB患者的CD8+T細胞Tnaive分別為63.33±16.63和24.53±17.58,(P0.01);Tem分別為6.56±4.25和39.38±18.31,(P0.01);Teff分別為14.60±11.75和24.83±12.90,(P=0.03)。健康成人和肺TB患者的CD4+和CD8+T細胞的Tcm之間無統(tǒng)計學差異,(P0.05)。2.健康成人與肺TB患者外周血中Vδ1 T細胞和Vδ3-8 T細胞(γδTCR+Vδ1—Vδ2—T細胞)的免疫記憶性亞型細胞的百分率沒有統(tǒng)計學差異。健康成人和肺TB患者外周血中Vδ2 T細胞的Tcm分別為77.90±10.60和61.05±22.98,(P=0.048);Teff分別為2.00±2.21和5.24±2.30,(P0.01);而Tnaive和Tem的百分率兩組人群間沒有統(tǒng)計學差異。3.健康成人和肺TB患者外周血中產(chǎn)IFN-γ的CD4+T細胞的Tem的百分率分別為16.22±3.02和27.33±14.34,(P=0.029);兩組人群中Tnaive、Tcm和Teff的百分率無統(tǒng)計學差異。健康成人和肺結核患者外周血中產(chǎn)IFN-γ的CD8+T細胞的Tcm百分率分別為48.99±13.72和33.66±14.49(P=0.035);Teff分別為19.57±11.67和42±13.52,(P=0.002),其余免疫記憶性亞型細胞的百分率無統(tǒng)計學差異。4.健康成人和肺TB患者外周血中產(chǎn)IFN-γ的Vδ1 T細胞中Tnaive的百分率分別為32.03±19.58和14.86±9.98,(P=0.039);Teff的百分率分別為42.92±28.48和72.58±18.76,(P=0.022);兩組人群中其余免疫記憶性亞型細胞的百分率無統(tǒng)計學差異。產(chǎn)IFN-γ的Vδ2 T細胞免疫記憶性亞群細胞的百分率兩組人群間沒有統(tǒng)計學差異。產(chǎn)IFN-γ的Vδ3-8 T細胞的Tcm的百分率分別為57.51±19.87和36.13±21.43,(P=0.044),其余免疫記憶性亞型細胞的百分率兩組人群間無統(tǒng)計學差異。5.健康成人和肺TB患者外周血中產(chǎn)IL-17的CD4+和CD8+T細胞的不同免疫記憶性亞型細胞的百分率之間沒有統(tǒng)計學差異。結論:1.肺TB患者外周血中αβT和γδT細胞的CD4+T,CD8+T以及Vδ2 T亞群的免疫記憶性亞型細胞的分布發(fā)生改變。此外,肺TB患者外周血產(chǎn)IFN-γ的αβT和γδT細胞亞群,除Vδ1,Vδ3-8亞群免疫記憶性亞型細胞的分布也發(fā)生改變。這一變化可能與機體抗Mtb感染的免疫應答有關,且其改變可能具有保護作用。2.肺TB患者外周血中產(chǎn)IL-17的αβT細胞(CD4+和CD8+T細胞)的免疫記憶性亞型細胞的分布與健康成人沒有差異,提示Mtb的感染不能改變其免疫亞型的分布比例。
【學位授予單位】：蚌埠醫(yī)學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R521

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中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 劉震天;肺結核患者外周血不同T細胞亞群中免疫記憶性亞型細胞的分布差異[D];蚌埠醫(yī)學院;2016年

2 李軒;大鼠腦缺血再灌注損傷后HIF-1α對膠質(zhì)亞型細胞修復重塑的調(diào)控機制[D];河北醫(yī)科大學;2010年

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本文編號：1148627