煙草煙霧暴露肺氣腫小鼠肺部Th1和Th17的變化及氨茶堿干預(yù)的作用
發(fā)布時間:2017-10-12 21:40
本文關(guān)鍵詞:煙草煙霧暴露肺氣腫小鼠肺部Th1和Th17的變化及氨茶堿干預(yù)的作用
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【摘要】:目的 觀察煙草煙霧暴露肺氣腫小鼠以及加入氨茶堿干預(yù)后肺部Th1細(xì)胞和Th17細(xì)胞的變化,探討Th1和Th17在煙草煙霧誘導(dǎo)小鼠產(chǎn)生肺部炎癥及肺氣腫中的作用,以及氨茶堿干預(yù)對Th1和Th17變化的影響及其相關(guān)機(jī)制。方法將30只清潔級健康雄性Balb/c小鼠隨機(jī)均分為3組:對照組、模型組、氨茶堿處理組,每組10只小鼠。采用單純煙熏法復(fù)制肺氣腫小鼠模型,模型組及氨茶堿處理組予煙草煙霧暴露,對照組予空氣偽暴露,各組小鼠暴露時間均為28周,于第25周開始予氨茶堿處理組小鼠腹腔注射氨茶堿,予對照組及模型組注射生理鹽水,制備模型期間觀察各組小鼠的一般情況,于第28周末處置并收集標(biāo)本。采用蘇木素-伊紅染色法(HE染色法)觀察各組小鼠氣道及肺組織的病理形態(tài)學(xué)改變,計(jì)算平均內(nèi)襯間隔(MLI)及肺泡破壞指數(shù)(DI);采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測各組小鼠支氣管肺泡灌洗液(BALF)及肺組織勻漿上清液中細(xì)胞因子Y-干擾素(IFN-y)和白細(xì)胞介素-17(IL-17)的水平;應(yīng)用實(shí)時熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(qRT-PCR)檢測各組小鼠肺組織中Thl與Th17的轉(zhuǎn)錄因子T-bet與RORyt的mRNA表達(dá)水平。比較分析這些指標(biāo)的變化意義及可能的相關(guān)機(jī)制。結(jié)果 (1)與對照組相比,模型組小鼠的肺組織結(jié)構(gòu)破壞,內(nèi)有大量炎性細(xì)胞浸潤,肺泡壁變薄或斷裂,肺泡腔擴(kuò)大融合形成肺大皰,部分肺泡腔內(nèi)可見不同程度的出血、水腫,支氣管粘膜上皮脫落,粘膜下成纖維細(xì)胞增生,支氣管平滑肌明顯增生增厚,杯狀細(xì)胞顯著增多;氨茶堿處理組小鼠的肺組織病理形態(tài)學(xué)改變較正常組小鼠明顯,與模型組小鼠相比較,氨茶堿處理組小鼠的肺氣腫程度和炎癥反應(yīng)有所減輕,但仍然沒有完全恢復(fù)正常的肺組織結(jié)構(gòu)。(2)模型組和氨茶堿處理組小鼠的MLI及DI均明顯高于對照組,以模型組升高更為明顯,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);氨茶堿處理組小鼠的MLI及DI較正常組增高,但與模型組相比有所減輕,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。(3)模型組和氨茶堿處理組小鼠支氣管肺泡灌洗液中的IFN-γ及IL-17細(xì)胞因子水平[(481.66±92.38)和(377.6±59.05)]及[(866.55±166.72)和(578.61±227.99)]均比對照組[(292.06±90.9)和(312.08±117.19)]明顯升高,以模型組升高更為明顯,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);模型組和氨茶堿處理組小鼠肺組晌漿上清液中的IFN-γ及IL-17細(xì)胞因子水平[(1277.3±71.66)和(1003.1±129.33)]及[(1271.04±63.48)和(1110.89±55.06)]均比對照組[(631.22±265.77)和(855.88±62.33)]明顯升高,以模型組升高更為明顯,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。(4)氨茶堿處理組小鼠支氣管肺泡灌洗液中的IFN-γ及IL-17細(xì)胞因子水平[(377.6±59.05)及(578.61±227.99)]較對照組[(292.06±90.9)及(312.08±117.19)]升高,但與模型組[(481.66±92.38)及(866.55±166.72)]相比明顯降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);同時,氨茶堿處理組小鼠肺組織勻漿上清液中的IFN-γ及IL-17細(xì)胞因子水平[(1003.1±129.33)及(1110.89±55.06)]較對照組[(631.22±265.77)及(855.88±62.33)]升高,但與模型組[(1277.3±71.66)及(1271.04±63.48)]相比明顯降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。(5)模型組和氨茶堿處理組小鼠肺組織中的T-bet及RORyt的mRNA相對表達(dá)量[(1.89±0.22)和(1.39±0.30)]及[(2.14±0.12)和(1.65±0.10)]均比對照組[(0.91±0.11)和(1.06±0.07)]明顯升高,以模型組升高更為明顯,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。(6)氨茶堿處理組小鼠肺組織中的T-bet及RORγt的mRNA相對表達(dá)量[(1.39±0.30)及(1.65±0.10)]較對照組[(0.91±0.11)及(1.06±0.07)]升高,但與模型組[(1.89±0.22)及(2.14±0.12)]比較明顯降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論 (1)在煙草煙霧暴露肺氣腫小鼠的肺部中Th1細(xì)胞和Th17細(xì)胞均上調(diào),提示Th1和Th17可能共同參與了小鼠肺部炎癥及肺氣腫的形成。(2)氨茶堿在減輕肺氣腫模型小鼠氣道和肺組織炎癥反應(yīng)的同時,可以下調(diào)由煙草煙霧暴露誘導(dǎo)產(chǎn)生的Th1和Th17增多,提示氨茶堿可能是通過抑制Th1和Th17的上調(diào)對肺氣腫模型小鼠發(fā)揮抗炎作用。
【關(guān)鍵詞】:肺氣腫 氨茶堿 Th1細(xì)胞 Th17細(xì)胞 煙草煙霧暴露
【學(xué)位授予單位】:廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號】:R563.9
【目錄】:
- 個人簡歷3-5
- 主要縮略詞5-6
- 摘要6-9
- ABSTRACT9-12
- 前言12-13
- 材料和方法13-28
- 結(jié)果28-36
- 討論36-39
- 結(jié)論39-40
- 參考文獻(xiàn)40-46
- 綜述46-58
- 參考文獻(xiàn)51-58
- 致謝58-59
- 附錄59
【參考文獻(xiàn)】
中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前5條
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,本文編號:1021079
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