本文關(guān)鍵詞：不同表型髓源抑制性細胞對哮喘小鼠氣道炎癥影響及免疫調(diào)節(jié)機制研究

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【摘要】：研究背景 哮喘已成為嚴重威脅公眾健康的慢性疾病。近年來,盡管衛(wèi)生條件和醫(yī)療水平逐步改善,支氣管哮喘的患病率仍呈上升趨勢,相當(dāng)一部分哮喘患者即使應(yīng)用目前所有的治療方法,依然無法獲得良好控制,尋求新的、有效的治療方法是目前哮喘研究的重點。哮喘發(fā)病機制復(fù)雜,氣道炎癥是哮喘發(fā)病的核心環(huán)節(jié),也是導(dǎo)致氣流阻塞和氣道高反應(yīng)性的主要原因。1型輔助性T細胞(Thl)/2型輔助性T細胞(Th2)失衡在哮喘發(fā)病機制中受到重視。當(dāng)Th1功能抑制而Th2功能增強時,可通過Th2相關(guān)細胞因子誘導(dǎo)氣道炎癥,誘發(fā)哮喘。Th2相關(guān)細胞因子白細胞介素4(IL-4)可促使B細胞產(chǎn)生IgE,抑制嗜酸粒細胞凋亡并促使其在肺組織浸潤,哮喘患者肺泡灌洗液和氣道活檢標本中IL-4水平顯著升高。Thl相關(guān)細胞因子IFN-γ可抑制特異性IgE的生成。但是,Thl/Th2失衡不能解釋哮喘所有發(fā)病機制,還存在其他免疫學(xué)機制參與調(diào)節(jié)哮喘氣道炎癥的形成,調(diào)節(jié)性T細胞(Treg)的重要性已得到證實。Treg通過多種機制誘導(dǎo)和維持機體對外來抗原和自身抗原(包括過敏原)產(chǎn)生免疫耐受,研究發(fā)現(xiàn)其對于控制哮喘炎癥必不可少,尤其是CD4+CD25+Foxp3+Treg在哮喘的發(fā)病中發(fā)揮重要作用。CD4+CD25+Foxp3+Treg是CD4+T淋巴細胞的一個亞群,它通過分泌抑制性細胞因子(IL-10、TGF-β和IL-35)或細胞間的直接接觸抑制對過敏原的免疫應(yīng)答,從而促使機體產(chǎn)生免疫耐受。Treg細胞表面標志為CD4+和CD25+。Foxp3是一種特殊轉(zhuǎn)錄因子,在Treg細胞表面特異性表達,可反映Treg細胞的功能活性,也可作為Treg細胞鑒定的標志物。在CD4+CD25+Foxp3+Treg缺陷小鼠中過敏原誘導(dǎo)的氣道高反應(yīng)性顯著增加；中重度哮喘患者外周血中CD4+CD25+Foxp3+Treg數(shù)量較輕度哮喘和正常對照組顯著下降；CD4+CD25+Foxp3+Treg可減少氣道粘液分泌,抑制氣道平滑肌增生和膠原合成。因此,CD4+CD25+Foxp3+Treg對于控制哮喘氣道炎癥具有重要作用,它的數(shù)量減少或功能下降是哮喘發(fā)病的重要原因。 髓源抑制性細胞(Myeloid-derived suppressor cells, MDSCs)是一群具有免疫抑制功能的異質(zhì)性細胞,主要由不成熟的巨噬細胞、粒細胞、樹突狀細胞等髓系細胞組成。MDSCs對T淋巴細胞具有抑制功能,可通過抗原特異性和非特異性兩種方式發(fā)揮免疫抑制作用。因其可進行體內(nèi)誘導(dǎo)、體外擴增、自體和異體移植而成為目前免疫治療研究熱點。研究顯示通過過繼轉(zhuǎn)移方式將MDSCs應(yīng)用于哮喘、皮膚移植、炎癥性腸病、Ⅰ型糖尿病和慢性濕疹等免疫性疾病中,具有良好的治療效果。小鼠中MDSCs標記性分子是CDllb和Gr-1,Gr-1抗原又可進一步分為Ly6C和Ly6G抗原。據(jù)此,可將小鼠MDSCs分為CD11b+Ly6C+Ly6G CD11b+Ly6C-Ly6G+、CD11b+Ly6C+Ly6G+和CD11b+Ly6C-Ly6G-四種表型。不同表型MDSCs在生物學(xué)形態(tài)、代謝產(chǎn)物、擴增效應(yīng)、體內(nèi)分布部位、分泌的細胞因子及其對免疫炎癥反應(yīng)的影響均不相同,它們在炎癥、腫瘤、感染及自身免疫性疾病中發(fā)揮的作用巨大且各不相同。 MDSCs可誘導(dǎo)Treg增殖,促進Treg產(chǎn)生IL-10、TGF-β、INF-γ,抑制T細胞免疫。MDSCs在IFN-γ和IL-10的刺激下分泌大量干細胞生長因子(SCF),通過SCF誘導(dǎo)Treg增殖,阻斷MDSCs中的SCF信號可抑制Treg增殖。MDSCs發(fā)揮免疫抑制作用與細胞外微環(huán)境中的精氨酸酶1(ARG1)和誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(iNOS)分泌有關(guān)。MDSCs中富含ARG1和iNOS, ARG1分解精氨酸產(chǎn)生鳥氨酸和尿素,通過消耗精氨酸,造成精氨酸饑餓狀態(tài),導(dǎo)致CD3-ζ鏈合成下降,IL-2和IFN-γ合成減少,T細胞受體表達受阻,T淋巴細胞增殖抑制。MDSCs分泌的ARG1和iNOS可誘導(dǎo)T淋巴細胞凋亡。iNOS誘導(dǎo)大量一氧化氮(NO)合成釋放,NO進而抑制T細胞增殖,降低IL-2、IFN-γ和IL-13的水平,通過抑制T細胞表達主要組織相容性復(fù)合體-Ⅱ(MHC-Ⅱ),使T細胞功能抑制。因此,ARG1和iNOS在MDSCs抑制T淋巴細胞活化過程中發(fā)揮重要作用。MDSCs增殖涉及多種細胞因子,信號轉(zhuǎn)導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活因子3(STAT3)是促進MDSCs增殖的主要轉(zhuǎn)錄因子。STAT3激活可引起MDSCs擴增明顯增加,阻止STAT3的表達則會抑制MDSCs的增殖。STAT3通過誘導(dǎo)S100A8、S100A9蛋白高表達,與MDSCs細胞上的受體結(jié)合后,抑制DC細胞的分化,促進MDSCs增殖。采用STAT3基因敲除小鼠或使用STAT3抑制劑,可引起MDSCs增殖顯著下降,因此STAT3可作為MDSCs增殖水平的觀察指標。近年來,核轉(zhuǎn)錄因子-Kβ(NF-κB)在MDSCs功能中的關(guān)鍵作用逐漸被認識,NF-κB是MDSCs活化的重要細胞因子,TLRs通過激活MyD88,激活NF-κB,促進MDSCs中的ARGl和iNOS表達上調(diào),促使MDSCs發(fā)揮對免疫功能的抑制作用。阻斷NF-κB可抑制MDSC的活化,因此NF-κB可作為MDSCs活化的監(jiān)測指標。 目前,不同表型MDSCs對哮喘氣道炎癥的影響、對Th1/Th2、 CD4+CD25+Foxp3+Treg的作用及不同表型MDSCs與ARG1、iNOS、STAT3和NF-Kβ之間存在何種調(diào)控作用的研究國內(nèi)外尚未見報道。我們前期實驗研究已經(jīng)證實LPS可以誘導(dǎo)大量MDSCs在小鼠脾臟中募集,給哮喘小鼠過繼轉(zhuǎn)移此MDSCs,能上調(diào)哮喘小鼠外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg比例,降低血清和BALF中IL-13水平,抑制哮喘小鼠的氣道炎癥。但是,實驗尚未進一步研究是何種表型MDSCs亞群發(fā)揮抗炎治療作用?不同表型MDSCs的免疫調(diào)節(jié)機制如何?不同表型MDSCs對哮喘氣道炎癥的影響、對Th1/Th2、CD4+CD25+Foxp3+Treg的調(diào)節(jié)作用有何不同?本研究利用LPS誘導(dǎo)MDSCs在小鼠脾臟募集,分離提純不同表型MDSCs細胞,過繼轉(zhuǎn)移給經(jīng)OVA致敏誘發(fā)的哮喘小鼠,觀察Ly6C+Ly6G+、Ly6C-Ly6G+、Ly6C+Ly6G-和Ly6C-Ly6G-四種表型MDSCs對哮喘小鼠氣道炎癥的影響及對Thl/Th2、CD4+CD25+Foxp3+Treg的調(diào)節(jié)作用,并觀察四種表型MDSCs與ARG1、iNOS、STAT3和NF-Kβ之間的作用,以揭示MDSCs調(diào)節(jié)氣道炎癥的免疫機制,探討哮喘免疫調(diào)節(jié)治療的新途徑。 第一部分不同劑量脂多糖對髓源抑制性細胞的誘導(dǎo) 目的：探討誘導(dǎo)小鼠合成MDSCs的脂多糖劑量和分選器官。 方法：SPF級BALB/c雌性小鼠24只,隨機分為lng脂多糖組、100ng脂多糖組、10μg脂多糖組和正常對照組,分別予以不同劑量脂多糖或生理鹽水腹腔注射以誘導(dǎo)MDSCs募集；流式細胞儀觀察脾臟和骨髓中MDSCs數(shù)量和Ly6C+Ly6G+、Ly6C-Ly6G+、Ly6C+Ly6G-和Ly6C-Ly6G-四種表型MDSCs比例。 結(jié)果： 1.流式細胞儀檢測脾臟四種表型MDSCs比例：正常對照組Ly6C+Ly6G+、 Ly6C-Ly6G+、Ly6C+Ly6G-和Ly6C-Ly6G-、CDllb+MDSCs比例分別為60.97±3.15.3.31±0.63、15.30±3.13、22.87±1.69、3.30±0.57;1ng脂多糖組五種MDSCs比例分別為53.55±5.23、5.76±0.66、26.17±1.38、21.52±1.38、9.03±1.19：100ng脂多糖組五種MDSCs匕例分別為55.39±4.87、9.81±1.03、26.95±3.04、20.64±1.22、11.96±0.67;10μg多糖組五種MDSCs(?)匕例分別為70.58±4.20、2.96±0.27、11.63±1.19、16.56±3.06、7.47±1.46。與正常對照組比較,1ng脂多糖組、100ng脂多糖組和l0μg脂多糖組CD11b+MDSCs細胞顯著增多(P=0.000,P=0.0000,P=0.000)。100ng脂多糖組CD11b+MDSCs細胞較lng脂多糖組和l0μg脂多糖組顯著增多(P=0.000,P=0.000)。 2.流式細胞儀檢測骨髓四種表型MDSCs比例：正常對照組Ly6C+Ly6G+、 Ly6C-Ly6G+、Ly6C+Ly6G-和Ly6C-Ly6G-、CD11b+MDSCs比例分別為96.43±0.55、0.26±0.04、1.52±0.04、1.45±0.22、43.84±2.73;1ng脂多糖組五種MDSCs比例分別為96.45±0.85、0.71±0.53、1.00±0.19、1.67±0.48、55.35±2.99;100ng脂多糖組五種MDSCs比例分別為97.01±0.21、0.53±0.07、1.41±0.04、1.01±0.14、58.33±2.84；10μg多糖組五種MDSCs比例分別為93.31±2.40、0.76±0.04、1.51±0.11、4.63±2.08、48.31±1.04。與正常對照組比較,1ng脂多糖組、100ng脂多糖組和l0gg脂多糖組CD11b+MDSCs細胞顯著增多(P=0.000,P=0.000,P=0.006)。100ng脂多糖組CD11b+MDSCs細胞較10μg脂多糖組增多(P=0.000)。 3.骨髓中MDSCs細胞以Ly6C+Ly6G+細胞為主,脾臟中Ly6C+Ly6G-、 Ly6C-Ly6G+和Ly6C-Ly6G-細胞比例較骨髓增多。 結(jié)論：1.脂多糖腹腔注射可以誘導(dǎo)大量MDSCs在正常小鼠脾臟和骨髓募集。 2.100ng脂多糖是誘導(dǎo)小鼠MDSCs的較佳劑量,脾臟是分選不同表型MDSCs的較佳器官。 第二部分不同表型髓源抑制性細胞體外對Th1/Th2、CD4+CD25+Foxp3+T調(diào)節(jié)性細胞的影響 目的：觀察不同表型MDSCs在體外和淋巴細胞共培養(yǎng)時對Th1/Th2、 CD4+CD25+Foxp3+Treg的影響。 方法：SPF級BALB/c雌性小鼠24只,隨機分為脂多糖組和細胞培養(yǎng)組,100ng脂多糖腹腔注射誘導(dǎo)MDSCs在小鼠脾臟中募集,流式細胞儀分選各表型MDSCs,獲得純化的四種表型MDSCs細胞：Ly6C+Ly6G+、Ly6C-Ly6G+、 Ly6C+Ly6G-和Ly6C-Ly6G-細胞。將四種表型MDSCs細胞在體外分別與小鼠淋巴細胞共培養(yǎng),流式細胞儀檢測各組Th1/Th2和CD4+CD25+Foxp3+Treg細胞比例。 結(jié)果： 1.不同表型MDSCs細胞體外對Thl/Th2影響：Ly6C+Ly6G+組Thl/Th2較正常對照組增加(P=0.001)；Ly6C-Ly6G+、Ly6C+Ly6G-、|Ly6C-Ly6G-CD11b+MDSCs組Th1/Th2和正常對照組比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.975,P=1.000,P=1.000,P=0.976)。 2.不同表型MDSCs細胞體外對CD4+CD25+Foxp3+Treg影響：Ly6C+Ly6G+、Ly6C-Ly6G+、Ly6C+Ly6G-、Ly6C-Ly6G-、CD11b+MDSCs組CD4+CD25+Foxp3+Treg數(shù)量較正常對照組增加(P=0.000,P=0.000,P=0.001,P=0.000,P=0.003)。與Ly6C+Ly6G+組比較,Ly6C-Ly6G+、Ly6C+Ly6G-、Ly6C-Ly6G-、CD11b+MDSCs組CD4+CD25+Foxp3+Treg數(shù)量減少有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.007,P=0.000,P=0.000,P=0.000)。 結(jié)論：1.Ly6C+Ly6G+細胞在體外可上調(diào)Th1/Th2,Ly6C-LyG+、Ly6C+Ly6G-、Ly6C-Ly6G-、CD11b+MDSCs細胞在體外對Th1/Th2無影響。 2.四種表型MDSCs細胞在體外均可誘導(dǎo)CD4+CD25+Foxp3+Treg增殖,使其數(shù)量增加,以Ly6C+Ly6G+細胞作用最為顯著。 第三部分不同表型髓源抑制性細胞體內(nèi)對哮喘小鼠氣道炎癥及Th1/Th2、 CD4+CD25+Foxp3+T調(diào)節(jié)性細胞的影響 目的：觀察不同表型MDSCs過繼轉(zhuǎn)移給哮喘小鼠,在體內(nèi)對氣道炎癥、Th1/Th2、CD4+CD25+Foxp3+Treg的影響。 方法：SPF級BALB/c雌性小鼠52只,10只接受脂多糖腹腔注射,用于制備髓源抑制性細胞,方法同第一部分；另外42只小鼠隨機分為7組：正常對照組、哮喘組、Ly6C+Ly6G+細胞治療組、Ly6C-Ly6G+細胞治療組、Ly6C+Ly6G-細胞治療組、Ly6C-Ly6G-細胞治療組和CD11b+MDSCs細胞治療組。應(yīng)用雞卵清蛋白致敏后霧化激發(fā)方法建立BALB/c小鼠哮喘模型,將不同表型MDSCs細胞經(jīng)尾靜脈注射過繼轉(zhuǎn)移給哮喘小鼠。收集各組小鼠外周血、肺泡灌洗液(BALF)、肺組織標本,應(yīng)用小鼠無創(chuàng)肺功能儀檢測肺功能,光鏡下觀察肺組織病理學(xué)改變,觀察BALF中細胞總數(shù)并分類計數(shù),酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA)檢測BALF和外周血中IL-4含量,流式細胞儀檢測外周血Th1/Th2、 CD4+CD25+Foxp3+Treg比例。 結(jié)果： 1.哮喘模型制備成功的判定：根據(jù)小鼠的癥狀表現(xiàn)、肺功能、BALF細胞分類計數(shù)、肺組織病理學(xué),提示哮喘小鼠模型制備成功。 2.肺功能檢測結(jié)果：乙酰甲膽堿濃度為6.25mg/ml、12.5mg/ml、25mg/ml和50mg/ml時,哮喘組增強呼氣間歇值(Penh)較正常對照組升高(P=0.000,P=0.000, P=0.000, P=0.000); Ly6C+Ly6G+組、Ly6C-Ly6G+組、CD11b+MDSCs組Penh較哮喘組下降(P0.05); Ly6C+Ly6G組、Ly6C-Ly6G-組Penh和哮喘組比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。 3. BALF細胞計數(shù)結(jié)果：哮喘組BALF細胞總數(shù)、嗜酸粒細胞和中性粒細胞比例較正常對照組增加(P=0.000,P=0.000,P=0.000)；與哮喘組比較,Ly6C+Ly6G+組、Ly6C-Ly6G+組、CD11b+MDSCs組細胞總數(shù)比例下降(P=0.004,P=0.006,P=0.009),嗜酸粒細胞比例下降(P=0.000,P=0.000,P=0.000),中性粒細胞比例下降(P=0.000,P=0.000,P=0.000)；與哮喘組比較,Ly6C+Ly6G-組、Ly6C-Ly6G-組細胞總數(shù)、嗜酸粒細胞數(shù)、中性粒細胞數(shù)差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)；七組小鼠淋巴細胞比例比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。 4.肺組織病理學(xué)改變：正常對照組小鼠肺組織結(jié)構(gòu)完整,肺泡腔內(nèi)無滲出物,無明顯炎癥細胞浸潤。哮喘組小鼠支氣管粘膜充血水腫,細支氣管和血管周圍有大量炎癥細胞浸潤,肺泡腔內(nèi)滲出物增多,氣道杯狀細胞肥大增生；與哮喘組相比,Ly6C+Ly6G+組、Ly6C-Ly6G+組、CD11b+MDSCs組支氣管及血管周圍炎性細胞浸潤減少,炎癥減輕。Ly6C+Ly6G-組、Ly6C-Ly6G-組和哮喘組病理變化相似,無明顯改善。 5.血清和BALF中IL-4含量：哮喘組血清和BALF中IL-4含量較正常對照組增加(P=0.000,P=0.000)；與哮喘組比較,Ly6C+Ly6G+組、Ly6C-Ly6G+組、CDllb+MDSCs組血清IL-4含量減少(P=0.000,P=0.000, P=0.000)、BALF中IL-4含量減少(P=0.000,P=0.000,P=0.000)；與哮喘組比較,Ly6C+Ly6G-組、Ly6C-Ly6G-組血清和BALF中IL-4含量差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。 6.小鼠外周血Th1/Th2流式分析：哮喘組Th1/Th2較正常對照組減小(P=0.001)；與哮喘組比較,Ly6C+Ly6G+組、Ly6C-Ly6G+組、Ly6C+Ly6G-組、Ly6C-Ly6G-組、CD11b+MDSCs組Thl/Th2增大(P=0.002,P=0.004,P=0.001,P=0.001,P=0.019)。 7.小鼠外周血Treg細胞流式分析：哮喘組CD4+CD25+Foxp3+Treg比例較正常對照組下降(P=0.000)；與哮喘組比較,Ly6C+Ly6G+組、Ly6C-Ly6G+組、Ly6C+Ly6G-組、Ly6C+Ly6G-組、CD11b+MDSCs組CD4+CD25+Foxp3+Treg比例增加,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.002,P=0.012, P=0.026, P=0.000, P=0.001)。 結(jié)論：1.將不同表型MDSCs細胞過繼轉(zhuǎn)移給哮喘小鼠,Ly6C+Ly6G+. Ly6C-Ly6G+、CD11b+MDSCs細胞對哮喘氣道炎癥具有抑制作用：①可降低哮喘小鼠氣道反應(yīng)性；②減少BALF中嗜酸粒細胞和中性粒細胞數(shù)量；③降低血清和BALF中IL-4含量；④減輕氣道炎癥,改善哮喘小鼠肺組織病理。 2. Ly6C+Ly6G-、Ly6C-Ly6G-MDSCs細胞對哮喘小鼠氣道炎癥、氣道反應(yīng)性、BALF中炎癥細胞數(shù)量、肺組織病理、血清和BALF中IL-4含量無顯著影響。 3. Ly6C+Ly6G+、Ly6C-Ly6G+、CD11b+MDSCs細胞可增加外周血Thl/Th2,上調(diào)CD4+CD25+Foxp3+Treg細胞比例,這可能是其治療哮喘、發(fā)揮免疫抑制作用的重要途徑。 第四部分不同表型髓源抑制性細胞影響哮喘小鼠氣道炎癥免疫調(diào)節(jié)機制探討 目的：探討不同表型MDSCs影響哮喘小鼠氣道炎癥的免疫調(diào)節(jié)機制。 方法：所用小鼠即為第三部分實驗小鼠,ELISA檢測各組小鼠BALF中NO含量,提取不同表型MDSCs細胞的RNA,實時熒光定量核酸擴增檢測系統(tǒng)(QPCR)檢測其ARG1和iNOS含量,免疫組織化學(xué)技術(shù)(IHC)檢測小鼠肺組織ARG1、iNOS、stat3、NF-κB含量。 結(jié)果： 1.BALF中NO含量：哮喘組BALF中NO含量(8.19±1.92)較正常對照組(0.55±0.07)增加(P=0.002); Ly6C+Ly6G+、Ly6C+Ly6G+、Ly6C+Ly6G+、 Ly6C-Ly6G-、CD11b+MDSCs組NO含量為0。 2. QPCR檢測不同表型MDSCs中ARGl和iNOS含量：ARG1含量從高至低依次為Ly6C-Ly6G+、CD11b+MDSCs、Ly6C+Ly6G+、Ly6C+Ly6G-、Ly6C-Ly6G-組;iNOS含量：Ly6C+Ly6G+組最高,其次為Ly6C+Ly6G-組,Ly6C-Ly6G+、 Ly6C-Ly6G-和CD11b+MDSCs組iNOS含量均為0。 3.IHC檢測肺組織ARG1表達：哮喘組可見大量ARG1表達,正常對照組未見ARG1表達。ARG1表達從高至低依次為Ly6C-Ly6G+、CD11b+MDSCs、 Ly6C+Ly6G+、Ly6C+Ly6G-組,Ly6C-Ly6G-組未見ARG1表達。 4.IHC檢測肺組織iNOS表達：哮喘組可見大量iNOS表達,正常對照組未見iNOS表達。各表型MDSCs均未見iNOS表達。 5.IHC檢測肺組織STAT3表達：哮喘組、正常對照組、各表型MDSCs均未見STAT3表達。 6.IHC檢測肺組織NF-κB表達：哮喘組可見大量NF-κB表達,正常對照組未見NF-κB表達。各表型MDSCs均可見NF-κB表達,NF-κB表達從高至低依次為Ly6C-Ly6G+、Ly6C+Ly6G+、CDllb+MDSCs、Ly6C+Ly6G+、Ly6C-Ly6G+組。 結(jié)論：1.不同表型MDSCs細胞發(fā)揮免疫抑制作用與ARG1分泌有關(guān),Ly6CLy6G+細胞分泌ARG1最為顯著。 2.四種表型MDSCs過繼轉(zhuǎn)移給哮喘小鼠后,在體內(nèi)通過NF-κB活化,Ly6C+Ly6G+細胞活化作用最為顯著,但未通過STAT3途徑增殖。
【關(guān)鍵詞】：髓源抑制性細胞 小鼠 脂多糖 脾臟 骨髓 髓源抑制性細胞 體外培養(yǎng) 1型輔助性T細胞/2型輔助性T細胞 調(diào)節(jié)性T淋巴細胞 髓源抑制性細胞 哮喘小鼠 氣道炎癥 1型輔助性T細胞/2型輔助性T細胞 調(diào)節(jié)性T淋巴細胞 髓源抑制性細胞 機制 精氨酸酶1 誘導(dǎo)型一氧化氮合酶
【學(xué)位授予單位】：南方醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R562.25
【目錄】：

• 摘要3-13
• ABSTRACT13-28
• 前言28-36
• 第一部分 不同劑量脂多糖對髓源抑制性細胞的誘導(dǎo)36-49
• 1 材料和方法37-41
• 2 結(jié)果41-45
• 3 討論45-49
• 第二部分 不同表型髓源抑制性細胞體外對TH1/TH2、CD4~+CD25~+FOXP3~+T調(diào)節(jié)性細胞的影響49-62
• 1 材料和方法50-56
• 2 結(jié)果56-59
• 3 討論59-62
• 第三部分 不同表型髓源抑制性細胞體內(nèi)對哮喘小鼠氣道炎癥及TH1/TH2、CD4~+CD25~+FOXP3~+T調(diào)節(jié)性細胞的影響62-91
• 1 材料和方法63-74
• 2 結(jié)果74-88
• 3 討論88-91
• 第四部分 不同表型髓源抑制性細胞影響哮喘小鼠氣道炎癥免疫調(diào)節(jié)機制探討91-114
• 1 材料和方法92-103
• 2 結(jié)果103-111
• 3 討論111-114
• 全文小結(jié)114-116
• 參考文獻116-128
• 攻讀學(xué)位期間成果128-130
• 致謝130-132
• 統(tǒng)計學(xué)審稿證明132

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條

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本文編號：1002478