本文關(guān)鍵詞：地西他濱促進(jìn)宮頸腺癌Hela細(xì)胞凋亡和APC基因去甲基化研究

  更多相關(guān)文章： 地西他濱 Hela細(xì)胞 甲基化 凋亡 宮頸癌

【摘要】：目的:研究地西他濱對(duì)APC基因的表達(dá)水平和去甲基化的影響,及地西他濱對(duì)β-catenin蛋白的作用,探討地西他濱誘導(dǎo)宮頸腺癌Hela細(xì)胞凋亡分子機(jī)制,為地西他濱應(yīng)用于宮頸癌的臨床治療提供理論基礎(chǔ)及實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法:(1)不同濃度的地西他濱作用于宮頸腺癌Hela細(xì)胞24h、36h和48h,MTT法檢測(cè)對(duì)宮頸癌細(xì)胞的增殖抑制作用,觀(guān)察地西他濱對(duì)Hela細(xì)胞增殖的濃度依賴(lài)效應(yīng)和時(shí)間依賴(lài)效應(yīng)。(2)Annexin V-HTC/PI雙染法檢測(cè)地西他濱對(duì)宮頸腺癌He La細(xì)胞凋亡的影響;流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)地西他濱對(duì)宮頸腺癌He La細(xì)胞細(xì)胞周期的影響。(3)通過(guò)甲基化特異性PCR(Methylation specific PCR,MSP)技術(shù),在地西他濱作用于宮頸腺癌He La細(xì)胞后,檢測(cè)APC基因的甲基化狀態(tài)。(4)RT-PCR法檢測(cè)地西他濱作用于He La細(xì)胞前后,APC基因m RNA表達(dá)水平。(5)Western blot檢測(cè)地西他濱作用于He La細(xì)胞前后,APC蛋白、β-catenin蛋白在胞內(nèi)及核內(nèi)表達(dá)的變化。結(jié)果:1地西他濱對(duì)宮頸腺癌Hela細(xì)胞增殖抑制具有濃度依賴(lài)效應(yīng)和時(shí)間依賴(lài)效應(yīng)。2、地西他濱能夠促進(jìn)Hela細(xì)胞凋亡,凋亡率由處理前的12.41±0.24%上升至處理后73.82±0.11%,兩者差異有有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);地西他濱可以阻滯宮頸腺癌He La細(xì)胞于S和G2期。3地西他濱處理He La細(xì)胞后,APC基因啟動(dòng)子區(qū)域去甲基化狀態(tài)明顯增高。4、地西他濱處理宮頸腺癌He La細(xì)胞后,APC m RNA表達(dá)量上升,處理前后比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。5、地西他濱處理前He La細(xì)胞胞內(nèi)APC蛋白相對(duì)表達(dá)量為0.780,處理后相對(duì)表達(dá)量為1.542;地西他濱處理前胞內(nèi)β-catenin蛋白相對(duì)表達(dá)量為0.89,處理后相對(duì)表達(dá)量為0.354;地西他濱處理前核內(nèi)β-catenin蛋白相對(duì)表達(dá)量為0.632,處理后相對(duì)表達(dá)量為0.336;處理前后比較,APC蛋白和β-catenin蛋白在胞內(nèi)和核內(nèi)的表達(dá)差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:1.地西他濱能以濃度和時(shí)間依賴(lài)方式抑制宮頸癌細(xì)胞的增殖。2.地西他濱具有促進(jìn)宮頸腺癌Hela細(xì)胞凋亡的作用,導(dǎo)致細(xì)胞周期阻滯在S期和G2期。3.地西他濱可通過(guò)對(duì)APC基因的去甲基化作用,下調(diào)胞內(nèi)APC蛋白表達(dá),下調(diào)胞內(nèi)和核內(nèi)β-catenin表達(dá),抑制WNT信號(hào)通路,誘導(dǎo)細(xì)胞宮頸癌細(xì)胞凋亡。
【關(guān)鍵詞】：地西他濱 Hela細(xì)胞 甲基化 凋亡 宮頸癌
【學(xué)位授予單位】：南華大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R737.33
【目錄】：

• 主要英文縮略語(yǔ)索引5-7
• 中文摘要7-9
• Abstract9-11
• 一、前言11-15
• 二、材料與方法15-19
• 三、實(shí)驗(yàn)方法19-29
• 四、實(shí)驗(yàn)結(jié)果29-37
• 五、討論37-43
• 六、結(jié)論43-45
• 參考文獻(xiàn)45-51
• 綜述 APC基因與腫瘤的關(guān)系51-59
• 參考文獻(xiàn)54-59
• 讀研期間發(fā)表的文章59-61
• 致謝61

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 李雪;孔為民;韓超;吳乾鳳;康琳棣;;首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京婦產(chǎn)醫(yī)院1992-2011年間宮頸癌發(fā)病趨勢(shì)分析[J];中華婦幼臨床醫(yī)學(xué)雜志(電子版);2013年03期

，

本文編號(hào)：950848