本文關(guān)鍵詞：自噬對(duì)宮頸癌細(xì)胞增殖和遷移能力的影響

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【摘要】：目的觀察自噬對(duì)宮頸癌細(xì)胞增殖遷移能力的影響,并探討其可能機(jī)制。方法采用不同濃度雷帕霉素誘導(dǎo)人宮頸癌HeLa細(xì)胞,吖啶橙染色觀察自噬小體的形成,Western blot檢測(cè)自噬相關(guān)基因LC3B以及PI3K/Akt/mTOR通路蛋白的表達(dá)情況,采用RTCA儀器實(shí)時(shí)檢測(cè)細(xì)胞的增殖能力,Transwell小室檢測(cè)細(xì)胞的遷移能力。應(yīng)用自噬抑制劑3-methyladenine(3-MA)阻斷宮頸癌細(xì)胞自噬后,采用RTCA儀器實(shí)時(shí)檢測(cè)細(xì)胞的增殖能力,Transwell小室檢測(cè)細(xì)胞的遷移能力。構(gòu)建帶有綠色熒光蛋白的LC3B質(zhì)粒,轉(zhuǎn)入HeLa細(xì)胞,通過G418藥物篩選轉(zhuǎn)染陽(yáng)性細(xì)胞,熒光顯微鏡觀察LC3B的細(xì)胞定位,Western blot檢測(cè)LC3B表達(dá)。RTCA儀器實(shí)時(shí)檢測(cè)野生型和LC3B過表達(dá)HeLa細(xì)胞的增殖能力,Western blot檢測(cè)PI3K/Akt/mTOR通路蛋白的表達(dá)。結(jié)果雷帕霉素誘導(dǎo)后,宮頸癌HeLa丑細(xì)胞自噬水平增高,增殖和遷移能力有所下降;PI3K/Akt/rnTOR通路蛋白表達(dá)改變(P0.05)。自噬抑制劑3-MA誘導(dǎo)HeLa細(xì)胞增殖和遷移水平下降(P0.05)。熒光顯微鏡和Westem blot結(jié)果顯示構(gòu)建的LC3質(zhì)粒成功轉(zhuǎn)入Hela細(xì)胞中并且能夠抑制宮頸癌細(xì)胞的增殖(P0.05)。結(jié)論在一定范圍內(nèi),隨著自噬水平的升高,HeLa細(xì)胞增殖和遷移能力降低,可能是通過PI3K/Akt/mTOR信號(hào)通路發(fā)揮作用。通過基因靶向擾亂自噬關(guān)鍵基因(如LC3等)而改變宮頸癌細(xì)胞自噬水平可能為宮頸癌的治療帶來新策略。
【作者單位】： 武漢大學(xué)附屬中南醫(yī)院基因診斷中心;
【關(guān)鍵詞】： 自噬 宮頸癌細(xì)胞 雷帕霉素 LC
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(81541147) 湖北醫(yī)藥學(xué)院博士研究生啟動(dòng)金資助項(xiàng)目(2015QDJZR01)
【分類號(hào)】：R737.33
【正文快照】： 宮頸癌是威脅女性生命健康的三大癌癥之一, 是女性生殖系統(tǒng)最常見的惡性腫瘤。近年來其發(fā) 病趨勢(shì)年輕化。目前生物治療逐漸成為腫瘤治療的研究熱點(diǎn),但多以誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡為主,隨著對(duì)細(xì)胞自噬認(rèn)識(shí)的深人,通過誘導(dǎo)自噬促進(jìn)腫瘤細(xì)胞自噬性死亡可能成為腫瘤治療的新途徑。 自

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中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 盧美松;鄧鎖;王澤華;;體外模擬二氧化碳人工氣腹對(duì)宮頸癌細(xì)胞生長(zhǎng)的影響[J];中國(guó)實(shí)用婦科與產(chǎn)科雜志;2007年01期

2 周晨慧;;干擾素-γ對(duì)宮頸癌細(xì)胞免疫分子表達(dá)的影響[J];現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生;2007年01期

3 潘惠艷;趙群;詹陽(yáng);趙麗紅;張衛(wèi)華;吳玉梅;;電壓門控鈉離子通道表達(dá)對(duì)宮頸癌細(xì)胞增殖侵襲轉(zhuǎn)移作用的研究[J];中國(guó)腫瘤臨床;2012年04期

4 馮理達(dá);錢菊卿;陳淑琴;張s，

本文編號(hào)：951052