本文關鍵詞：宮頸癌相關成纖維細胞的分離與鑒定

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【摘要】：目的宮頸癌相關成纖維細胞(cancer-associated fibroblast,CAF)在宮頸癌的進展中起著重要作用,原代成纖維細胞培養(yǎng)與體內微環(huán)境更為接近。本研究旨在分離純化并鑒定CAF,初步探討CAF的生物學特性。方法選擇鄭州大學第一附屬醫(yī)院婦科2015-01-04-03-27收治的患者6例。用膠原酶消化法分離宮頸正常成纖維細胞(normal fibroblast,NF)和CAF;顯微鏡下觀察細胞形態(tài);用CCK-8法繪制生長曲線;ELISA法檢測細胞上清中人轉化生長因子β1(transforming growth factor betal 1,TGF-β1)的分泌水平;免疫熒光法及蛋白質印跡法檢測細胞標志物波形蛋白(Vimentin)、α-平滑肌肌動蛋白(alpha-smooth muscle actin,α-SMA)和成纖維細胞活化蛋白α(fibroblast activation proteinα,FAPα)。結果 CAF大小、形狀不一,密度接觸抑制消失;NF大小、形狀一致,存在密度接觸抑制。CAF的生長速度快于NF,z=-2.160,P=0.031。CAF中TGF-β1的濃度為(449.93±19.99)ng/L,而NF中為(209.50±16.25)ng/L,二者差異有統(tǒng)計學意義,z=-2.611,P=0.008。CAF高表達α-SMA和FAPα,而NF不表達α-SMA和FAPα,兩者均表達Vimentin。結論成功分離純化并鑒定CAF。CAF具有平滑肌和成纖維細胞雙重特性,其增殖能力及細胞活性均強于NF。
【作者單位】： 鄭州大學第一附屬醫(yī)院婦科·河南省高等學校臨床醫(yī)學重點學科開放實驗室;
【關鍵詞】： 宮頸腫瘤 腫瘤相關成纖維細胞 原代細胞培養(yǎng) 腫瘤微環(huán)境
【基金】：河南省科技攻關重點項目(142102310538)
【分類號】：R737.33
【正文快照】： 中華腫瘤防治雜志,2016,23(3):171-175Chin J Cancer Prev Treat,2016,23(3):171-175最新研究表明,腫瘤-宿主微環(huán)境的平衡狀態(tài)對腫瘤的發(fā)生發(fā)展起著重要作用[1]。腫瘤相關成纖維細胞(cancer-associated fibroblast,CAF)是腫瘤基質中的主要細胞類型,它們通過分泌多種細胞因子相

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1 宋玉娥;劉克儉;;染氟成纖維細胞在氟性骨損傷骨周化骨中作用的研究前景[J];職業(yè)與健康;2009年22期

2 黃英,張宗玉,童坦君;人衰老成纖維細胞凋亡的可誘導性[J];中華老年醫(yī)學雜志;2000年03期

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本文編號：950767