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宮頸癌相關(guān)成纖維細(xì)胞的分離與鑒定

發(fā)布時(shí)間:2017-09-30 22:24

  本文關(guān)鍵詞:宮頸癌相關(guān)成纖維細(xì)胞的分離與鑒定


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【摘要】:目的宮頸癌相關(guān)成纖維細(xì)胞(cancer-associated fibroblast,CAF)在宮頸癌的進(jìn)展中起著重要作用,原代成纖維細(xì)胞培養(yǎng)與體內(nèi)微環(huán)境更為接近。本研究旨在分離純化并鑒定CAF,初步探討CAF的生物學(xué)特性。方法選擇鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院婦科2015-01-04-03-27收治的患者6例。用膠原酶消化法分離宮頸正常成纖維細(xì)胞(normal fibroblast,NF)和CAF;顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài);用CCK-8法繪制生長(zhǎng)曲線;ELISA法檢測(cè)細(xì)胞上清中人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(transforming growth factor betal 1,TGF-β1)的分泌水平;免疫熒光法及蛋白質(zhì)印跡法檢測(cè)細(xì)胞標(biāo)志物波形蛋白(Vimentin)、α-平滑肌肌動(dòng)蛋白(alpha-smooth muscle actin,α-SMA)和成纖維細(xì)胞活化蛋白α(fibroblast activation proteinα,FAPα)。結(jié)果 CAF大小、形狀不一,密度接觸抑制消失;NF大小、形狀一致,存在密度接觸抑制。CAF的生長(zhǎng)速度快于NF,z=-2.160,P=0.031。CAF中TGF-β1的濃度為(449.93±19.99)ng/L,而NF中為(209.50±16.25)ng/L,二者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,z=-2.611,P=0.008。CAF高表達(dá)α-SMA和FAPα,而NF不表達(dá)α-SMA和FAPα,兩者均表達(dá)Vimentin。結(jié)論成功分離純化并鑒定CAF。CAF具有平滑肌和成纖維細(xì)胞雙重特性,其增殖能力及細(xì)胞活性均強(qiáng)于NF。
【作者單位】: 鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院婦科·河南省高等學(xué)校臨床醫(yī)學(xué)重點(diǎn)學(xué)科開(kāi)放實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】宮頸腫瘤 腫瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞 原代細(xì)胞培養(yǎng) 腫瘤微環(huán)境
【基金】:河南省科技攻關(guān)重點(diǎn)項(xiàng)目(142102310538)
【分類號(hào)】:R737.33
【正文快照】: 中華腫瘤防治雜志,2016,23(3):171-175Chin J Cancer Prev Treat,2016,23(3):171-175最新研究表明,腫瘤-宿主微環(huán)境的平衡狀態(tài)對(duì)腫瘤的發(fā)生發(fā)展起著重要作用[1]。腫瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞(cancer-associated fibroblast,CAF)是腫瘤基質(zhì)中的主要細(xì)胞類型,它們通過(guò)分泌多種細(xì)胞因子相

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 宋玉娥;劉克儉;;染氟成纖維細(xì)胞在氟性骨損傷骨周化骨中作用的研究前景[J];職業(yè)與健康;2009年22期

2 黃英,張宗玉,童坦君;人衰老成纖維細(xì)胞凋亡的可誘導(dǎo)性[J];中華老年醫(yī)學(xué)雜志;2000年03期

3 黃勤,張家慶,鄒大進(jìn);人眼球后和其它部位成纖維細(xì)胞的差異[J];基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床;2001年01期

4 鄧廉夫,馮偉,張s,

本文編號(hào):950767


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