本文關(guān)鍵詞：曲古抑菌素A對卵巢癌細胞分化、增殖的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：研究背景近年來,我國社區(qū)居民疾病譜發(fā)生顯著變化,惡性腫瘤的發(fā)病率呈現(xiàn)上升趨勢。人類腫瘤是一組由多種因素引發(fā)的疾病,存在大量基因的突變或者異常激活。然而,僅僅以致癌基因和/或抑癌基因的改變,無法解釋腫瘤在發(fā)生發(fā)展過程中的所有現(xiàn)象,還涉及到表觀遺傳學的改變。表觀遺傳學是指基因表達在不改變DNA序列的情況下發(fā)生可遺傳的改變,比如DNA甲基化、組蛋白修飾、micro RNA等等。越來越多的研究表明,表觀遺傳改變也是腫瘤發(fā)生和發(fā)展的主要因素。其中,組蛋白修飾通過改變?nèi)旧|(zhì)的結(jié)構(gòu)調(diào)控基因轉(zhuǎn)錄活性而受到人們廣泛的關(guān)注。組蛋白修飾是表觀遺傳調(diào)控的重要組成部分,組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶(HAT)和組蛋白去乙酰化酶(HDACs)活性的拮抗作用共同維持組蛋白乙�；揎椀钠胶狻Ｔ谠S多腫瘤中,組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶(HAT)和組蛋白去乙�；�(HDACs)活性之間的平衡發(fā)生了改變。而組蛋白去乙�；敢种苿┠軌蚰孓D(zhuǎn)HDACs的去乙酰化作用,提高組蛋白乙�；�,使與細胞分化、增殖抑制、細胞周期阻滯相關(guān)的基因處于轉(zhuǎn)錄激活狀態(tài),從而發(fā)揮腫瘤抑制作用。因此,組蛋白去乙�；敢种苿┦且活惡苡星熬暗目鼓[瘤藥物。目前已被FDA批準用于治療癌癥的表觀遺傳藥物包括兩種DNA甲基化轉(zhuǎn)移酶(DNMT)抑制劑和一個種去乙�；�(HDAC)抑制劑。曲古抑菌素A(TSA)是近年來比較受關(guān)注的一種異羥肟酸型HDAC抑制劑。有研究表明,TSA能特異性抑制組蛋白去乙�；傅幕钚�,發(fā)揮腫瘤抑制作用,但其相關(guān)機制仍不清楚。研究目的觀察曲古抑菌素A(TSA)對卵巢癌細胞分化、增殖的影響并初步探討其相關(guān)機制。研究方法:1、實驗分組以卵巢癌上皮細胞系HO8910為研究對象,將細胞分為:對照組(0n M TSA)、100n M TSA實驗組、200n M TSA實驗組、400n M TSA實驗組;2、TSA對卵巢癌細胞分化影響觀察(1)應(yīng)用倒置顯微鏡觀察對照組(0n M TSA)和200n M TSA實驗組在24h、48、72h三個時間點的細胞形態(tài),并對細胞形態(tài)進行評估;(2)應(yīng)用Western blot檢測組蛋白H3乙酰化的整體水平以及干性標記(SOX2和OCT-4)和分化標記FOXA2的蛋白表達水平;3、TSA對卵巢癌細胞增殖影響觀察(1)應(yīng)用MTT檢測法檢測TSA對卵巢癌細胞增殖率的影響,應(yīng)用Ed U檢測法檢測TSA對卵巢癌細胞DNA合成能力的影響;(2)應(yīng)用流式細胞儀檢測TSA對卵巢癌細胞細胞周期分布的影響;(3)應(yīng)用Western blot檢測細胞周期蛋白依賴性激酶抑制劑p21Cip1和細胞周期蛋白cyclin D1的蛋白表達水平。4、統(tǒng)計學處理應(yīng)用SPSS19.0進行統(tǒng)計分析,實驗計量資料數(shù)據(jù)均以`x±S表示,首先采用單因素方差分析(one-way ANOVA)進行多組間均數(shù)比較,如果組間差異有統(tǒng)計學意義,則采用獨立樣本t檢驗進行各實驗組與對照組的兩樣本均數(shù)比較。檢驗水準α=0.05,p0.05表示差異有統(tǒng)計學意義。結(jié)果1、與對照組相比,200n M TSA實驗組的細胞在形態(tài)上發(fā)生明顯的改變,是一個從類圓形-星狀-梭形的形態(tài)轉(zhuǎn)變過程。2、TSA以濃度依賴的方式顯著上調(diào)組蛋白H3乙�；�;TSA處理顯著下調(diào)SOX2和OCT-4的表達水平,上調(diào)FOXA2的表達水平。3、與對照組相比,TSA以濃度和時間依賴方式明顯降低細胞的增殖率(均p0.05),抑制細胞DNA合成能力。4、TSA誘發(fā)細胞周期阻滯在G1期(p0.05),其中,400n M TSA實驗組G1期細胞比例高達87.43%(p0.01);且伴隨p21cip1蛋白表達量的增加和cyclin D1表達水平的下降。結(jié)論1、曲古抑菌素A(TSA)可誘導卵巢癌HO8910細胞分化,并發(fā)生細胞形態(tài)學上的轉(zhuǎn)變,可能與分化相關(guān)基因表達上調(diào)有關(guān)。2、TSA能抑制卵巢癌HO8910細胞的增殖能力,使細胞在G1/S期發(fā)生周期阻滯,與調(diào)控細胞周期相關(guān)基因的表達有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：曲古抑菌素A 卵巢癌 組蛋白乙酰化 細胞分化 增殖
【學位授予單位】：江蘇大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R737.31
【目錄】：

• 中文摘要5-8
• ABSTRACT8-13
• 常用縮略詞對照表13-15
• 引言15-17
• 第一部分 曲古抑菌素A對卵巢癌細胞HO8910分化的影響17-30
• 1.實驗對象與材料17-22
• 1.1 實驗對象17
• 1.2 主要試劑及耗材17-18
• 1.3 主要儀器18-19
• 1.4 溶液配制19-22
• 2.實驗方法22-24
• 2.1 細胞培養(yǎng)22
• 2.2 實驗分組22-23
• 2.3 倒置顯微鏡觀察細胞形態(tài)的改變23
• 2.4 Western blot檢測Ace H3K9以及轉(zhuǎn)錄因子SOX2、OCT-4 和FOXA2的蛋白表達水平23-24
• 3.統(tǒng)計分析24-25
• 4.結(jié)果25-27
• 4.1 TSA誘導HO8910細胞發(fā)生形態(tài)學變化25
• 4.2 TSA調(diào)節(jié)干細胞標志物的表達25-27
• 5.討論27-30
• 第二部分 曲古抑菌素A對卵巢癌細胞HO8910增殖的影響30-45
• 1. 實驗對象與材料30-35
• 1.1 實驗對象30
• 1.2 主要試劑及耗材30-31
• 1.3 主要儀器31-32
• 1.4 溶液配制32-35
• 2.實驗方法35-39
• 2.1 細胞培養(yǎng)35
• 2.2 實驗分組35-36
• 2.3 Western blot檢測cyclin D1和p21Cip1的蛋白表達水平36-37
• 2.4 細胞增殖能力的檢測37-39
• 2.5 流式細胞術(shù)檢測細胞周期39
• 3.統(tǒng)計分析39
• 4.結(jié)果39-42
• 4.1 TSA抑制HO8910細胞增殖39-40
• 4.2 TSA誘導HO8910細胞周期阻滯40-42
• 5.討論42-45
• 第三部分 結(jié)論45-46
• 參考文獻46-50
• 綜述 組蛋白去乙酰化酶抑制劑與腫瘤治療50-71
• 參考文獻61-71
• 致謝71-72
• 攻讀碩士學位期間發(fā)表的論文72

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1 劉爽;林靜嫻;劉琦;石群立;王建東;吳元赭;;維A酸干預前后卵巢癌細胞中維A酸受體的表達變化及意義[J];醫(yī)學研究生學報;2007年11期

2 ;發(fā)現(xiàn)休眠卵巢癌細胞存活機制[J];生命世界;2009年02期

3 ;美發(fā)現(xiàn)休眠卵巢癌細胞存活機制[J];醫(yī)學研究雜志;2009年04期

4 向君彥;夏新蜀;王昕娜;徐靜;王萍;江園;余和平;白定群;許川山;;低強度中頻超聲殺傷卵巢癌細胞的初步研究[J];激光雜志;2011年01期

5 陳韻仙;;下泌尿道切除作為卵巢癌細胞減少術(shù)的一部分[J];國外醫(yī)學.婦產(chǎn)科學分冊;1983年03期

6 仲任,黃瑞濱,宋善俊;組織因子途徑抑制物2對卵巢癌細胞遷徙和浸潤能力的影響[J];癌癥;2003年10期

7 ;精液能夠殺死卵巢癌細胞[J];發(fā)明與創(chuàng)新;2003年12期

8 高琨,李力,陳心秋,張瑋;雌孕激素對卵巢癌細胞體外生長的影響[J];腫瘤防治研究;2004年04期

9 王威廉,陳心秋,恩帝安,馬加薩,周德南,唐凱,黃薇;抗卵巢癌細胞膜抗體對卵巢癌細胞體外細胞毒性試驗及荷瘤小鼠的體內(nèi)聚集性的實驗研究[J];廣西醫(yī)科大學學報;2004年04期

10 仲任,黃瑞濱,宋善俊;組織因子途徑抑制物2表達抑制卵巢癌細胞浸潤能力的實驗研究[J];腫瘤;2004年05期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 王文霞;孔北華;李鵬;曲迅;;蛋白酶體抑制劑對卵巢癌細胞的作用機制[A];第八次全國婦產(chǎn)科學學術(shù)會議論文匯編[C];2004年

2 劉娟娟;林蓓;趙越;李飛飛;郝瑩瑩;張帆;朱連成;張淑蘭;;巖藻糖基化抗原對卵巢癌細胞生物學行為的影響[A];東北三省第四屆婦產(chǎn)科學術(shù)會議論文匯編[C];2008年

3 陳心秋;王威廉;趙芳芳;周德南;唐凱;;~(131)Ⅰ—抗卵巢癌抗體聯(lián)合外放射對卵巢癌細胞的體外殺傷實驗研究[A];第七屆廣西腫瘤學術(shù)年會論文匯編[C];2003年

4 王威廉;陳心秋;恩帝安.馬加薩;周德南;唐凱;;抗卵巢癌抗體對卵巢癌細胞體外細胞毒及載瘤裸鼠體內(nèi)聚集性實驗研究[A];第七屆廣西腫瘤學術(shù)年會論文匯編[C];2003年

5 許沈華;牟瀚舟;顧琳慧;朱赤紅;劉祥麟;;高轉(zhuǎn)移卵巢癌細胞差異表達基因在染色體定位及其功能[A];浙江省生理科學會2006年學術(shù)年會論文匯編[C];2006年

6 唐東平;陳心秋;唐凱;張潔清;賀海平;;11種化療藥物對卵巢癌細胞的抑制作用及其有核細胞細胞毒性研究[A];第四屆中國腫瘤學術(shù)大會暨第五屆海峽兩岸腫瘤學術(shù)會議論文集[C];2006年

7 李曉峰;王欣;馬開東;劉寶林;;卵巢癌細胞的低溫保存及致死特性研究[A];上海市制冷學會2007年學術(shù)年會論文集[C];2007年

8 梁念慈;何太平;覃燕梅;吳科鋒;;抗癌草藥半邊旗有效成分對卵巢癌細胞基因表達的影響[A];第十屆全國生化與分子藥理學術(shù)會議論文摘要匯編[C];2007年

9 郝瑩瑩;林蓓;趙越;歐陽玲;張淑蘭;;α1,2巖藻糖轉(zhuǎn)移酶基因轉(zhuǎn)染對卵巢癌細胞生物學行為的影響[A];中華醫(yī)學會第九次全國婦科腫瘤學術(shù)會議論文匯編[C];2006年

10 李長東;張為遠;苑春莉;韓麗英;;卵巢癌細胞對人樹突狀細胞成熟及功能的影響[A];中華醫(yī)學會第一屆全球華人婦產(chǎn)科學術(shù)大會暨第三次全國婦產(chǎn)科中青年醫(yī)師學術(shù)會議論文匯編[C];2007年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 記者 任海軍;卵巢癌為何常常復活？生死命懸一基因[N];新華每日電訊;2009年

2 靖九江;4-HPR有望用于治療卵巢癌[N];中國醫(yī)藥報;2005年

3 邰 舉;韓國醫(yī)學專家發(fā)現(xiàn)精液能夠殺死卵巢癌細胞[N];中國中醫(yī)藥報;2003年

4 邰舉;精液能夠殺死卵巢癌細胞[N];科技日報;2003年

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1 王萍;丙泊酚對卵巢癌細胞侵襲和紫杉醇誘導的卵巢癌細胞凋亡的作用中轉(zhuǎn)錄因子Slug的影響[D];山東大學;2015年

2 魏星;CGI-58基因調(diào)控脂代謝介導卵巢癌細胞侵襲轉(zhuǎn)移的作用及機制研究[D];第三軍醫(yī)大學;2015年

3 李曉;卵巢癌細胞影響外周血T淋巴細胞功能和分化的研究[D];浙江大學;2006年

4 彭萍;白細胞介素12基因轉(zhuǎn)染樹突狀細胞后和卵巢癌細胞融合作為卵巢癌腫瘤疫苗的初步研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學;2003年

5 張晶晶;卵巢癌細胞與腹膜間皮細胞相互作用對侵襲轉(zhuǎn)移微環(huán)境的影響[D];山東大學;2006年

6 李慧慧;雌激素及其代謝物和抗壞血酸對卵巢癌細胞的作用及相互影響[D];山東大學;2013年

7 李留霞;基因調(diào)控溶血磷脂酸作用通路抑制卵巢癌細胞生長的實驗研究[D];鄭州大學;2008年

8 黃妍;卵泡刺激素對卵巢癌細胞生物學行為的影響及其相關(guān)分子機制[D];復旦大學;2009年

9 劉穎濤;Rab25對卵巢癌的促進作用及其分子調(diào)節(jié)機制[D];復旦大學;2010年

10 李琴華;制瘤素對卵巢癌細胞的影響及其機制的體外研究[D];吉林大學;2011年

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1 曾麗;AKT2通過PKM2調(diào)控卵巢癌細胞增殖作用的研究[D];福建醫(yī)科大學;2015年

2 雷婧;SDF-1激活PI3K-Akt通路在卵巢癌細胞增殖和侵襲中的作用[D];鄭州大學;2015年

3 牛貝貝;GDF15對卵巢癌細胞遷移、增殖的影響及其可能機制[D];河北醫(yī)科大學;2015年

4 陳燕;卡鉑與吉西他濱單獨或聯(lián)合用藥對卵巢癌細胞SKOV3及裸鼠皮下移植腫瘤生長抑制作用的研究[D];蘇州大學;2015年

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6 劉瑞寒;塞來昔布誘導卵巢癌細胞發(fā)生上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化的作用及其機制研究[D];山東大學;2015年

7 侯棟;PARP1在卵巢癌的表達及抗氧化作用研究[D];山東大學;2015年

8 周靜;PADI4基因?qū)Σ煌琾53狀態(tài)的卵巢癌細胞系生長及轉(zhuǎn)移的影響[D];山東大學;2015年

9 林怡君;樺木酸誘導卵巢癌細胞CA0V3凋亡機制的研究[D];延邊大學;2015年

10 姜霞;miR-182對瘦素誘導的卵巢癌細胞生長的影響及調(diào)控機制[D];第四軍醫(yī)大學;2015年

  本文關(guān)鍵詞：曲古抑菌素A對卵巢癌細胞分化、增殖的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號：474045