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Maspin基因在宮頸鱗癌SiHa細(xì)胞裸鼠移植瘤中的表達(dá)及其與腫瘤微淋巴形成的相關(guān)性研究

發(fā)布時(shí)間:2017-06-23 04:02

  本文關(guān)鍵詞:Maspin基因在宮頸鱗癌SiHa細(xì)胞裸鼠移植瘤中的表達(dá)及其與腫瘤微淋巴形成的相關(guān)性研究,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:目的:1.評(píng)估人類宮頸癌SiHa細(xì)胞中Maspin基因的過(guò)表達(dá)對(duì)其體外細(xì)胞增殖和細(xì)胞凋亡的影響。2.探討裸鼠人的宮頸癌細(xì)胞移植瘤中Maspin基因的表達(dá)與微淋巴管形成之間的關(guān)系。方法:pcDNA3-maspin重組質(zhì)粒穩(wěn)定轉(zhuǎn)染入人宮頸癌SiHa細(xì)胞中,逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)鑒定Maspin mRNA,而Maspin蛋白通過(guò)Western Blot分析及免疫組織化學(xué)技術(shù)(IHC)檢測(cè)。細(xì)胞增殖活性以MTT比色法檢測(cè),細(xì)胞凋亡率及細(xì)胞周期則通過(guò)流式細(xì)胞儀測(cè)定,以明確細(xì)胞生物學(xué)特性的變化。重組SiHa細(xì)胞接種至6周齡雌性裸鼠。裸鼠移植瘤組織中Maspin及podoplanin的表達(dá)通過(guò)免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測(cè),數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)通過(guò)秩和檢驗(yàn)和方差分析。結(jié)果:逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng),Western Blot分析及免疫組織化學(xué)技術(shù)(IHO檢測(cè)均證實(shí)SiHa細(xì)胞中Maspin基因的強(qiáng)表達(dá)(P0.05)。MTT比色法及流式細(xì)胞儀結(jié)果表明pcDNA-maspin轉(zhuǎn)染的SiHa細(xì)胞(SiHa-m)組與SiHa組及SiHa空質(zhì)粒組(SiHa-pc3)相比,細(xì)胞增殖活性收到抑制,細(xì)胞凋亡率增加(P0.05)。SiHa組及SiHa-pc3組相比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。體內(nèi)移植重組質(zhì)粒pcDNA-maspin的裸鼠腫瘤生長(zhǎng)收到明顯的抑制。統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)顯示,在裸鼠抑制腫瘤細(xì)胞后1,3,4,5周,SiHa-m組裸鼠腫瘤的體積較SiHa組及SiHa-pc3組有明顯的區(qū)別(p0.05)。在SiHa組及SiHa-pc3組腫瘤的體積未觀察到明顯的差異(p0.05)。結(jié)論:動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示maspin基因能夠顯著抑制人宮頸癌SiHa細(xì)胞的細(xì)胞增殖能力,有效減小腫瘤生長(zhǎng)體積,其有望成為人類子宮頸鱗狀細(xì)胞癌新的基因治療靶點(diǎn)。但仍需通過(guò)增加實(shí)驗(yàn)動(dòng)物數(shù)量的進(jìn)一步研究統(tǒng)計(jì)來(lái)探究maspin在抑制人類子宮頸癌細(xì)胞生長(zhǎng)中的作用機(jī)制。
【關(guān)鍵詞】:Maspin RT-PCR Western blot SiHa細(xì)胞 podoplanin 淋巴管生成
【學(xué)位授予單位】:濱州醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號(hào)】:R737.33
【目錄】:
  • 前言3-4
  • 中文摘要4-5
  • 英文摘要5-6
  • 縮略詞表6-8
  • 材料與方法8-13
  • 實(shí)驗(yàn)結(jié)果13-17
  • 討論17-24
  • 結(jié)論24-25
  • 利益沖突25
  • 致謝25-26
  • 參考文獻(xiàn)26-28
  • 附綜述28-35
  • 參考文獻(xiàn)33-35
  • 致謝35-36
  • 學(xué)位論文目錄36-37
  • 附錄1 附圖37-43

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