目的探討高齡妊娠對子鼠海馬神經(jīng)干細(xì)胞發(fā)育的影響。方法將3月齡(n=10)與12月齡(n=10的雌性大鼠分別與3月齡雄性大鼠(n=20)合籠,以其子鼠為研究對象,分為適齡子代組和高齡子代組,每組40只。分別采用免疫熒光及Western blot法定位及定量檢測生后第7天兩組海馬組織巢蛋白(Nestin)、雙皮質(zhì)素(DCX)及生后第28天成熟神經(jīng)元標(biāo)志物NeuN、膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)表達(dá)水平;采用免疫熒光法定位檢測生后第14天兩組海馬組織多聚唾液酸神經(jīng)細(xì)胞黏附分子(PSA-NCAM)表達(dá)情況;每組各檢測指標(biāo)隨機(jī)取8只大鼠。結(jié)果 Western blot檢測結(jié)果發(fā)現(xiàn)高齡子代組海馬DCX蛋白的表達(dá)明顯低于適齡子代組(P<0.05),Nestin、NeuN及GFAP蛋白表達(dá)在兩組間比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。免疫熒光檢測結(jié)果顯示,高齡子代組海馬齒狀回(DG)區(qū)Nestin、DCX及PSA-NCAM的表達(dá)均明顯低于適齡子代組(P<0.05),而上述指標(biāo)分別在兩組海馬CA1區(qū)、CA3區(qū)的表達(dá)比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。高齡子代組海馬CA1區(qū)Ne...

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圖1 Western blot法檢測兩組海馬組織Nestin、DCX、NeuN、GFAP蛋白的表達(dá)變化

Nestin是神經(jīng)干細(xì)胞特有的中間絲蛋白，常作為增殖神經(jīng)干細(xì)胞的標(biāo)記。Westernblot檢測兩組子鼠P7時(shí)海馬組織Nestin蛋白的表達(dá)情況（圖1），結(jié)果發(fā)現(xiàn)，盡管高齡子代組海馬組織Nestin蛋白表達(dá)低于適齡子代組，但兩組間比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05，表1）。進(jìn)一....

圖2 兩組P7時(shí)海馬組織各區(qū)Nestin表達(dá)（免疫熒光染色，×200）

圖1Westernblot法檢測兩組海馬組織Nestin、DCX、NeuN、GFAP蛋白的表達(dá)變化2.2高齡與適齡子代組海馬組織DCX表達(dá)情況

圖3 兩組P7時(shí)海馬組織各區(qū)DCX表達(dá)（免疫熒光染色，×200）

DCX是一種微管相關(guān)磷酸化蛋白，參與促進(jìn)神經(jīng)元遷移，與新生且未成熟神經(jīng)元的數(shù)量密切相關(guān)，可代表神經(jīng)干細(xì)胞增殖和遷移的狀態(tài)。Westernblot法檢測結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在P7時(shí)，高齡子代組海馬組織DCX的表達(dá)明顯低于適齡子代組（P<0.05，圖1和表1）。免疫熒光定位檢測結(jié)果顯示，DC....

圖4 兩組P14時(shí)海馬組織各區(qū)PSA-NCAM表達(dá)（免疫熒光染色，×200）

PSA-NCAM是細(xì)胞表面一種糖蛋白，在神經(jīng)細(xì)胞遷移過程中介導(dǎo)細(xì)胞的黏附與識(shí)別，通常被用來作為神經(jīng)干細(xì)胞遷移的標(biāo)記物[6]。免疫熒光檢測兩組子鼠在P14時(shí)海馬組織PSA-NCAM的表達(dá)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)PSA-NCAM在海馬各區(qū)均有表達(dá)（圖4）。高齡子代組海馬DG區(qū)PSA-NCAM表達(dá)明....

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