本文關鍵詞：IGF2基因在卵巢癌中的表達、生物學功能及臨床意義，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：實驗目的:卵巢癌是婦科最常見的惡性腫瘤,同時也是最難診斷、惡性程度高、進展快和預后差的婦科腫瘤之一。目前由于缺乏早期有效檢測手段,大部分患者確診時已經(jīng)為中晚期。臨床分期是影響腫瘤患者預后最重要的因素之一。因此,要從根本上改善卵巢患者的治療效果,尋找早期準確篩選和預后判斷分子標志物就顯得極為迫切。最近,我們研究發(fā)現(xiàn)IGF2在卵巢癌組織和正常卵巢組織以及癌旁組織中的表達存在顯著差異,通過文獻檢索,并未發(fā)現(xiàn)IGF2基因在卵巢癌的發(fā)生、進展和臨床意義等方面的報道。本課題主要目標是進一步評價IGF2表達在卵巢癌中是否具有重要的臨床意義和生物學功能,為此我們分析了IGF2表達與患者各臨床病理以及預后的關系,并構建IGF2差異表達的卵巢癌細胞模型,通過細胞增殖、凋亡、周期、侵襲等方面初步探索了IGF2在卵巢癌中的功能。本研究將為進一步深入研究該基因在腫瘤中的作用、機制和臨床應用的可行性等方面提供理論基礎。實驗方法:1、應用RT-PCR、RT-q PCR以及Western-blot方法對卵巢癌組織和正常卵巢組織中IGF2基因的表達進行分析;然后通過制備組織芯片并采用免疫組織化學的方法對卵巢癌組織和癌旁組織中IGF2基因蛋白表達進行了分析;2、通過對組織芯片中樣本腫瘤細胞的陽性率和染色強度進行定量分析后,采用SPSS 13.0軟件統(tǒng)計分析IGF2表達與患者各臨床資料之間的關系;使用在線數(shù)據(jù)庫Kaplan-Meier plotter分析了卵巢癌患者生存期和IGF2表達的關系;3、構建IGF2基因低表達細胞模型,通過MTS和流式細胞術分析了腫瘤細胞增殖和周期的變化;通過流式細胞術和Transwell實驗分析了IGF2對腫瘤細胞的凋亡和侵襲能力的影響。實驗結果:1、利用RT-PCR、RT-q PCR和Western-blot方法分析了IGF2基因在10例正常卵巢組織和35例卵巢癌組織中的表達情況,結果發(fā)現(xiàn)IGF2基因在卵巢癌組織中的表達顯著高于正常卵巢組織(P=0.000)。2、通過制備含72例卵巢癌組織和15例癌旁組織的組織芯片,利用免疫組織化學方法分析了IGF2基因在卵巢癌組織和癌旁組織中蛋白水平的表達情況,結果發(fā)現(xiàn)IGF2在卵巢癌組織的表達也明顯高于在癌旁組織的表達(P=0.000)。3、通過對免疫組化染色的腫瘤細胞陽性率和染色強度對表達結果進行定量分析,采用SPSS 13.0軟件統(tǒng)計分析IGF2蛋白表達與患者各臨床資料之間的關系后發(fā)現(xiàn),IGF2蛋白表達水平與卵巢癌患者的病理分級密切相關(p=0.047),而與患者年齡、病理類型、腫瘤位置和腫瘤大小不相關(P0.05)。4、通過使用Kaplan-Meier plotter在線數(shù)據(jù)庫數(shù)據(jù),采用Kaplan-Meier方法對不同IGF2表達的患者生存期分析發(fā)現(xiàn),IGF2高表達的卵巢癌患者的總生存時間(OS)明顯低于IGF2低表達的卵巢癌患者(HR=1.44,P=0.000);并且IGF2高表達的卵巢癌患者的無進展生存時間也明顯低于IGF2低表達的卵巢癌患者(HR=1.35,P=0.000)。這些結果表明,IGF2表達與卵巢癌患者的不良預后密切相關。5、通過患者不同臨床資料進行亞分組后進一步分析發(fā)現(xiàn),IGF2表達在不同臨床分期、病理分型及化療方式患者中的預后意義不同:IGF2高表達與臨床I+II期(HR=2.60,P=0.014)和III期(HR=1.30,P=0.003)卵巢癌患者的較差預后密切相關;在病理2級(HR=1.59,P=0.004)和3級(HR=1.31,P=0.002)的卵巢癌患者中,IGF2高表達患者的生存時間明顯短于低表達的患者;在單一鉑類藥物(HR=1.48,P=0.000)和單一紫杉醇類藥物(HR=1.46,P=0.00024)以及兩類藥物共同作用(HR=1.46,P=0.0000)的患者中,IGF2高表達患者的生存時間明顯短于低表達的患者。6、通過構建IGF2基因差異表達細胞模型并采用MTS和流式細胞術實驗分析發(fā)現(xiàn),相比較于對照組,IGF2基因低表達之后卵巢癌細胞的增殖能力明顯降低,細胞周期顯著阻滯在G1期;同時干擾IGF2的表達能夠明顯促進卵巢癌細胞的凋亡;利用Transwell實驗分析發(fā)現(xiàn),IGF2低表達明顯抑制卵巢癌細胞的遷移和侵襲。結論:1.IGF2基因在卵巢癌組織的表達明顯高于正常卵巢組織和癌旁組織,且其表達與患者的病理分級顯著相關;2.IGF2基因表達與卵巢癌患者生存時間密切相關,是一個重要的不良預后因素;而且其表達在不同臨床分期、病理分型及化療方式處理患者中的預后意義不同;3.IGF2基因在卵巢癌中是一個重要的癌基因,干擾其表達可抑制腫瘤細胞生長和細胞遷移,并促進細胞凋亡。
【關鍵詞】：卵巢癌 IGF2 基因表達 臨床意義 預后因素
【學位授予單位】：第三軍醫(yī)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R737.31
【目錄】：

• 縮略詞表4-5
• 英文摘要5-8
• 中文摘要8-10
• 第一章 前言10-12
• 第二章 IGF2基因在卵巢癌組織中的表達與臨床預后關系分析12-33
• 2.1 實驗材料12-16
• 2.2 實驗方法16-24
• 2.3 實驗結果24-31
• 2.4 討論31-33
• 第三章 IGF2基因在卵巢癌中生物學功能的初步研究33-53
• 3.1 實驗材料33-36
• 3.2 實驗方法36-45
• 3.3 實驗結果45-51
• 3.4 討論51-53
• 全文總結53-54
• 參考文獻54-60
• 文獻綜述IGF2與癌癥的研究進展60-67
• 參考文獻64-67
• 學位期間發(fā)表論文67-68
• 致謝68

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  本文關鍵詞：IGF2基因在卵巢癌中的表達、生物學功能及臨床意義，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號：367339