本文關(guān)鍵詞：甲狀腺激素對(duì)生發(fā)基質(zhì)—腦室內(nèi)出血早產(chǎn)兔治療的實(shí)驗(yàn)研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:生發(fā)基質(zhì)-腦室內(nèi)出血(germinal matrix hemorrhage-intraventricular hemorrhage,GM-IVH)是造成早產(chǎn)兒獲得性腦損傷的常見原因之一,至少占了新生兒顱內(nèi)出血的80%以上。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道在胎齡32周或(和)出生體重1500g的早產(chǎn)兒中GM-IVH的發(fā)生率為20%~40%。我國早產(chǎn)兒GM-IVH的發(fā)生率大約為56.6%,明顯高于發(fā)達(dá)國家,其中重度出血的發(fā)生率為16.3%;大約35%的存活患兒伴有不同程度的神經(jīng)系統(tǒng)功能障礙。通過顱腦核磁共振影像學(xué)研究顯示該病的病理學(xué)表現(xiàn)包括腦室周圍深部腦白質(zhì)局灶性壞死,囊性空洞形成,彌漫性腦白質(zhì)軟化,腦白質(zhì)萎縮以及腦室擴(kuò)大,神經(jīng)系統(tǒng)組織學(xué)基礎(chǔ)為少突膠質(zhì)細(xì)胞髓鞘化延遲。目前對(duì)于GM-IVH造成的髓鞘化障礙、繼發(fā)的不良神經(jīng)系統(tǒng)結(jié)局沒有行之有效的治療手段。有相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道,創(chuàng)傷、炎癥等疾病會(huì)影響腦組織中甲狀腺激素脫碘酶的表達(dá),進(jìn)而影響中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)甲狀腺激素的生物學(xué)功能。已有大量研究證實(shí)甲狀腺激素可以促進(jìn)多發(fā)性硬化等脫髓鞘疾病患者少突膠質(zhì)前體細(xì)胞成熟、髓鞘形成,減輕中樞神經(jīng)系統(tǒng)癥狀。甲狀腺激素是否也可以通過上述機(jī)制促進(jìn)早產(chǎn)兒GM-IVH后腦損傷的修復(fù)?關(guān)于這方面的研究鮮見報(bào)道。本文試圖通過動(dòng)物模型探討:(1)GM-IVH早產(chǎn)兔腦室周圍組織甲狀腺激素信號(hào)通路中相關(guān)蛋白的表達(dá)水平;(2)甲狀腺激素干預(yù)治療對(duì)上述相關(guān)蛋白表達(dá)的影響;(3)甲狀腺激素是否可以促進(jìn)GM-IVH早產(chǎn)兔腦組織中髓鞘磷脂堿性蛋白(myelin basic protein,MBP)的表達(dá)。方法:1選擇孕29天孕兔進(jìn)行剖宮產(chǎn)(足月為孕32天),迅速取幼兔,共60只,給予保溫、奶粉喂養(yǎng)。將所有幼兔隨機(jī)分為正常組、單純GM-IVH模型組(簡(jiǎn)稱模型組),GM-IVH模型+甲狀腺激素干預(yù)組(簡(jiǎn)稱模型+甲狀腺激素組),每組各20只。參照腹腔注射丙三醇誘發(fā)GM-IVH的方法,模型制備方法如下:于生后3小時(shí)內(nèi)給早產(chǎn)兔腹腔注射50%丙三醇,劑量為10ml/kg,24小時(shí)后行顱腦超聲篩查,模型+甲狀腺激素組中發(fā)生GM-IVH早產(chǎn)兔腹腔注射甲狀腺激素,即三碘甲腺原氨酸(triiodothyronine,T3),劑量為20μg/kg·d,1/日。進(jìn)行上述操作同時(shí),正常組早產(chǎn)兔腹腔注射等體積的生理鹽水,24小時(shí)后行顱腦超聲篩查。2將以上三組中的早產(chǎn)兔隨機(jī)分為出生后3天、7天、14天三個(gè)亞組,按上述時(shí)間點(diǎn)給予安樂死,冰上迅速分離腦組織,觀察大體標(biāo)本,選取腦室周邊區(qū)域組織,一部分置于-80℃冰箱中備用,一部分置于4%多聚甲醛溶液中備用,分別供蛋白印跡、免疫組化實(shí)驗(yàn)使用。3使用蛋白印跡的方法比較三組各個(gè)時(shí)間點(diǎn)早產(chǎn)兔腦室周邊組織中2型甲狀腺激素脫碘酶(type 2 iodothyronine deiodinase,D2)、3型甲狀腺激素脫碘酶(type 3 iodothyronine deiodinase,D3)的表達(dá);采用免疫組化的方法比較三組中各個(gè)時(shí)間點(diǎn)上早產(chǎn)兔腦室周邊中MBP的表達(dá)情況。4統(tǒng)計(jì)方法:采用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件、Microsoft Excel 2003進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示,經(jīng)方差齊性檢驗(yàn)方差齊,多個(gè)樣本均數(shù)的比較采用LSD-t法檢驗(yàn),若不滿足方差齊性則采用秩和檢驗(yàn)的方法。檢驗(yàn)水準(zhǔn)定為0.05,P值0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P0.01時(shí)具有顯著差異。結(jié)果:1成功復(fù)制了早產(chǎn)兔GM-IVH模型成功對(duì)孕29天的實(shí)驗(yàn)兔(孕足月為32天)行剖宮產(chǎn)獲得早產(chǎn)兔。通過頭顱超聲、大體標(biāo)本觀察、組織HE染色觀察證實(shí)早產(chǎn)兔GM-IVH模型的成功制備。2早產(chǎn)兔腦組織中D2、D3的表達(dá)在出生后3-14天,正常組早產(chǎn)兔腦組織中D2的表達(dá)量逐漸增加,模型組早產(chǎn)兔腦組織標(biāo)本中D2的表達(dá)量逐漸減少,且在相同時(shí)間上均低于正常組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);在出生后3-14天,正常組早產(chǎn)兔腦組織標(biāo)本中D3的表達(dá)量逐漸升高,模型組早產(chǎn)兔腦組織標(biāo)本中D3的表達(dá)量逐漸增加,且在相同時(shí)間上均高于正常組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。模型+甲狀腺激素組早產(chǎn)兔腦組織中D2表達(dá)量在7天、14天時(shí)均高于模型組的表達(dá)量,但低于正常組的表達(dá)量,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01);模型+甲狀腺激素組早產(chǎn)兔腦組織中D3表達(dá)量在3天、7天、14天時(shí)均低于模型組的表達(dá)量,但高于正常組的表達(dá)量,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。3腦組織中MBP的表達(dá)模型組早產(chǎn)兔腦組織標(biāo)本中MBP的表達(dá)在出生后3天、7天、14天逐漸降低,在相同時(shí)間上均低于正常組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01);模型+甲狀腺激素組MBP的表達(dá)在出生后14天后高于模型組的表達(dá)量,低于正常組中的表達(dá),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);但出生后3天、7天,模型組和模型+甲狀腺激素組腦組織中MBP的表達(dá)率無差異(P0.05)。結(jié)論:早產(chǎn)兔發(fā)生GM-IVH后,腦組織內(nèi)D2的表達(dá)量隨著時(shí)間的變化明顯減少,腦組織內(nèi)D3的表達(dá)量隨著時(shí)間的變化明顯增多,MBP的表達(dá)率降低。通過給予甲狀腺激素干預(yù),可以在一定程度上提高的GM-IVH早產(chǎn)兔腦組織內(nèi)D2的表達(dá)、降低D3的表達(dá),增加腦組織中MBP的表達(dá)。提示GM-IVH對(duì)甲狀腺激素脫碘酶的表達(dá)造成影響,從而影響局部組織甲狀腺激素低水平,進(jìn)而干預(yù)少突膠質(zhì)細(xì)胞成熟、髓鞘化;早產(chǎn)兔發(fā)生GM-IVH后給予甲狀腺激素干預(yù)有助于少突膠質(zhì)細(xì)胞發(fā)育,改善GM-IVH的預(yù)后。
【關(guān)鍵詞】：甲狀腺激素 甲狀腺激素脫碘酶 髓鞘磷脂堿性蛋白 早產(chǎn)兔 生發(fā)基質(zhì)-腦室內(nèi)出血 動(dòng)物模型
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R714.21
【目錄】：

• 中文摘要4-7
• 英文摘要7-11
• 英文縮寫11-12
• 前言12-13
• 材料與方法13-21
• 結(jié)果21-24
• 附圖24-31
• 附表31-33
• 討論33-37
• 結(jié)論37
• 參考文獻(xiàn)37-42
• 綜述 甲狀腺激素在新生兒腦發(fā)育過程中的相關(guān)研究42-52
• 參考文獻(xiàn)47-52
• 致謝52-53
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷53

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 Hao Huang;Xiao-Feng Zhao;Kang Zheng;Mengsheng Qiu;;Regulation of the timing of oligodendrocyte differentiation:mechanisms and perspectives[J];Neuroscience Bulletin;2013年02期

  本文關(guān)鍵詞：甲狀腺激素對(duì)生發(fā)基質(zhì)—腦室內(nèi)出血早產(chǎn)兔治療的實(shí)驗(yàn)研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：347645