本文關(guān)鍵詞：甲狀腺激素對生發(fā)基質(zhì)—腦室內(nèi)出血早產(chǎn)兔治療的實驗研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:生發(fā)基質(zhì)-腦室內(nèi)出血(germinal matrix hemorrhage-intraventricular hemorrhage,GM-IVH)是造成早產(chǎn)兒獲得性腦損傷的常見原因之一,至少占了新生兒顱內(nèi)出血的80%以上。據(jù)文獻報道在胎齡32周或(和)出生體重1500g的早產(chǎn)兒中GM-IVH的發(fā)生率為20%~40%。我國早產(chǎn)兒GM-IVH的發(fā)生率大約為56.6%,明顯高于發(fā)達國家,其中重度出血的發(fā)生率為16.3%;大約35%的存活患兒伴有不同程度的神經(jīng)系統(tǒng)功能障礙。通過顱腦核磁共振影像學研究顯示該病的病理學表現(xiàn)包括腦室周圍深部腦白質(zhì)局灶性壞死,囊性空洞形成,彌漫性腦白質(zhì)軟化,腦白質(zhì)萎縮以及腦室擴大,神經(jīng)系統(tǒng)組織學基礎(chǔ)為少突膠質(zhì)細胞髓鞘化延遲。目前對于GM-IVH造成的髓鞘化障礙、繼發(fā)的不良神經(jīng)系統(tǒng)結(jié)局沒有行之有效的治療手段。有相關(guān)文獻報道,創(chuàng)傷、炎癥等疾病會影響腦組織中甲狀腺激素脫碘酶的表達,進而影響中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)甲狀腺激素的生物學功能。已有大量研究證實甲狀腺激素可以促進多發(fā)性硬化等脫髓鞘疾病患者少突膠質(zhì)前體細胞成熟、髓鞘形成,減輕中樞神經(jīng)系統(tǒng)癥狀。甲狀腺激素是否也可以通過上述機制促進早產(chǎn)兒GM-IVH后腦損傷的修復?關(guān)于這方面的研究鮮見報道。本文試圖通過動物模型探討:(1)GM-IVH早產(chǎn)兔腦室周圍組織甲狀腺激素信號通路中相關(guān)蛋白的表達水平;(2)甲狀腺激素干預治療對上述相關(guān)蛋白表達的影響;(3)甲狀腺激素是否可以促進GM-IVH早產(chǎn)兔腦組織中髓鞘磷脂堿性蛋白(myelin basic protein,MBP)的表達。方法:1選擇孕29天孕兔進行剖宮產(chǎn)(足月為孕32天),迅速取幼兔,共60只,給予保溫、奶粉喂養(yǎng)。將所有幼兔隨機分為正常組、單純GM-IVH模型組(簡稱模型組),GM-IVH模型+甲狀腺激素干預組(簡稱模型+甲狀腺激素組),每組各20只。參照腹腔注射丙三醇誘發(fā)GM-IVH的方法,模型制備方法如下:于生后3小時內(nèi)給早產(chǎn)兔腹腔注射50%丙三醇,劑量為10ml/kg,24小時后行顱腦超聲篩查,模型+甲狀腺激素組中發(fā)生GM-IVH早產(chǎn)兔腹腔注射甲狀腺激素,即三碘甲腺原氨酸(triiodothyronine,T3),劑量為20μg/kg·d,1/日。進行上述操作同時,正常組早產(chǎn)兔腹腔注射等體積的生理鹽水,24小時后行顱腦超聲篩查。2將以上三組中的早產(chǎn)兔隨機分為出生后3天、7天、14天三個亞組,按上述時間點給予安樂死,冰上迅速分離腦組織,觀察大體標本,選取腦室周邊區(qū)域組織,一部分置于-80℃冰箱中備用,一部分置于4%多聚甲醛溶液中備用,分別供蛋白印跡、免疫組化實驗使用。3使用蛋白印跡的方法比較三組各個時間點早產(chǎn)兔腦室周邊組織中2型甲狀腺激素脫碘酶(type 2 iodothyronine deiodinase,D2)、3型甲狀腺激素脫碘酶(type 3 iodothyronine deiodinase,D3)的表達;采用免疫組化的方法比較三組中各個時間點上早產(chǎn)兔腦室周邊中MBP的表達情況。4統(tǒng)計方法:采用SPSS 13.0統(tǒng)計學軟件、Microsoft Excel 2003進行數(shù)據(jù)處理。計量資料以均數(shù)±標準差表示,經(jīng)方差齊性檢驗方差齊,多個樣本均數(shù)的比較采用LSD-t法檢驗,若不滿足方差齊性則采用秩和檢驗的方法。檢驗水準定為0.05,P值0.05有統(tǒng)計學意義,P0.01時具有顯著差異。結(jié)果:1成功復制了早產(chǎn)兔GM-IVH模型成功對孕29天的實驗兔(孕足月為32天)行剖宮產(chǎn)獲得早產(chǎn)兔。通過頭顱超聲、大體標本觀察、組織HE染色觀察證實早產(chǎn)兔GM-IVH模型的成功制備。2早產(chǎn)兔腦組織中D2、D3的表達在出生后3-14天,正常組早產(chǎn)兔腦組織中D2的表達量逐漸增加,模型組早產(chǎn)兔腦組織標本中D2的表達量逐漸減少,且在相同時間上均低于正常組,差異均有統(tǒng)計學意義(P0.05);在出生后3-14天,正常組早產(chǎn)兔腦組織標本中D3的表達量逐漸升高,模型組早產(chǎn)兔腦組織標本中D3的表達量逐漸增加,且在相同時間上均高于正常組,差異均有統(tǒng)計學意義(P0.01)。模型+甲狀腺激素組早產(chǎn)兔腦組織中D2表達量在7天、14天時均高于模型組的表達量,但低于正常組的表達量,差異有統(tǒng)計學意義(P0.01);模型+甲狀腺激素組早產(chǎn)兔腦組織中D3表達量在3天、7天、14天時均低于模型組的表達量,但高于正常組的表達量,差異有統(tǒng)計學意義(P0.01)。3腦組織中MBP的表達模型組早產(chǎn)兔腦組織標本中MBP的表達在出生后3天、7天、14天逐漸降低,在相同時間上均低于正常組,差異有統(tǒng)計學意義(P0.01);模型+甲狀腺激素組MBP的表達在出生后14天后高于模型組的表達量,低于正常組中的表達,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05);但出生后3天、7天,模型組和模型+甲狀腺激素組腦組織中MBP的表達率無差異(P0.05)。結(jié)論:早產(chǎn)兔發(fā)生GM-IVH后,腦組織內(nèi)D2的表達量隨著時間的變化明顯減少,腦組織內(nèi)D3的表達量隨著時間的變化明顯增多,MBP的表達率降低。通過給予甲狀腺激素干預,可以在一定程度上提高的GM-IVH早產(chǎn)兔腦組織內(nèi)D2的表達、降低D3的表達,增加腦組織中MBP的表達。提示GM-IVH對甲狀腺激素脫碘酶的表達造成影響,從而影響局部組織甲狀腺激素低水平,進而干預少突膠質(zhì)細胞成熟、髓鞘化;早產(chǎn)兔發(fā)生GM-IVH后給予甲狀腺激素干預有助于少突膠質(zhì)細胞發(fā)育,改善GM-IVH的預后。
【關(guān)鍵詞】：甲狀腺激素 甲狀腺激素脫碘酶 髓鞘磷脂堿性蛋白 早產(chǎn)兔 生發(fā)基質(zhì)-腦室內(nèi)出血 動物模型
【學位授予單位】：河北醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R714.21
【目錄】：

• 中文摘要4-7
• 英文摘要7-11
• 英文縮寫11-12
• 前言12-13
• 材料與方法13-21
• 結(jié)果21-24
• 附圖24-31
• 附表31-33
• 討論33-37
• 結(jié)論37
• 參考文獻37-42
• 綜述 甲狀腺激素在新生兒腦發(fā)育過程中的相關(guān)研究42-52
• 參考文獻47-52
• 致謝52-53
• 個人簡歷53

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 Hao Huang;Xiao-Feng Zhao;Kang Zheng;Mengsheng Qiu;;Regulation of the timing of oligodendrocyte differentiation:mechanisms and perspectives[J];Neuroscience Bulletin;2013年02期

  本文關(guān)鍵詞：甲狀腺激素對生發(fā)基質(zhì)—腦室內(nèi)出血早產(chǎn)兔治療的實驗研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：347645