本文關鍵詞：SNP微陣列檢測稽留流產(chǎn)組織絨毛染色體異常，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：研究目的采用絨毛細胞培養(yǎng)及染色體核型分析法與SNP微陣列技術對稽留流產(chǎn)絨毛進行染色體檢測,比較兩種方法的優(yōu)缺點,查找稽留流產(chǎn)的遺傳學病因,為指導孕婦再次妊娠提供重要的實驗室依據(jù)。方法與材料2013年1月至2014年3月在天津市中心婦產(chǎn)科醫(yī)院確診為稽留流產(chǎn)的患者40例,年齡25-38歲,平均年齡(32.4±5.4)歲。行人工流產(chǎn)術獲取流產(chǎn)絨毛組織。本研究的納入標準包括:有閉經(jīng)史;有腹痛、陰道流血癥狀;血、尿HCG陽性;經(jīng)婦科檢查、超聲檢查及內分泌激素檢測等確診為稽留流產(chǎn)。隨機選取因計劃外妊娠于我院行人工流產(chǎn)術患者60例作為對照組,年齡23-44歲,平均年齡(30.9±2.3)歲。實驗組與對照組患者均簽署知情同意書。取30mg的流產(chǎn)絨毛組織,其中15mg絨毛,用眼科小剪將其剪成糊狀裝入離心管中,加0.25%typsion EDTA(GIBCO公司)3ml于37℃搖床中振蕩消化,再加入1ml小牛血清終止消化,離心。將沉淀加入裝有4ml培養(yǎng)基(GIBCO公司)的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)2-3天。進行換液并轉瓶繼續(xù)培養(yǎng)3-5天。加入0.125%胰酶2.5ml進行消化,再低滲、預固定、固定進行收獲、制片、姬姆薩液中染色顯帶。然后,進行核型分析,計數(shù)30個核型,分析5個,異常的核型計數(shù)加倍。再取15mg左右絨毛組織,采用酚-氯仿的方法提取絨毛DNA,測定DNA模板的濃度及純度,嚴格按照實驗流程采用Illumina Human CytoSNP-12芯片對提取的絨毛DNA進行SNP微陣列檢測。結果1絨毛培養(yǎng)結果稽留流產(chǎn)組共40例患者,其中絨毛培養(yǎng)成功29例,培養(yǎng)成功率為72.5%(29/40)。對照組60例,絨毛培養(yǎng)成功50例,培養(yǎng)成功率為83.3%(50/60)。2核型分析結果在培養(yǎng)成功的29例流產(chǎn)絨毛中,發(fā)現(xiàn)核型異常的有10例,異常率為34.5%(10/29)。其中染色體數(shù)目異常7例,包括三倍體1例,三體型6例,分別涉及9、14、15、16和22號染色體。染色體結構異常3例,其中No.18病例10號長臂多出一條帶,且通過核型分析無法確認其來源,另外2例異常分別為1例平衡易位,1例環(huán)狀染色體。對照組核型均正常。3 SNP微陣列技術檢測結果稽留流產(chǎn)組40例患者,SNP微陣列技術均檢測出分子核型,成功率為100%(40/40)。發(fā)現(xiàn)異常分子核型16例,檢出率為40%(16/40)。其中染色體數(shù)目異常12例,六倍體1例,三倍體1例,三體型10例,涉及2、9、14、15、16、21和22號染色體,其中6例與絨毛培養(yǎng)結果一致,而4例是絨毛培養(yǎng)未成功的。染色體結構異常為4例:No.18病例10號染色體發(fā)生重復;No.6病例同時發(fā)現(xiàn)了9號染色體的微重復和20號染色體微缺失;No.15病例3號染色體及No.22病例12號染色體發(fā)生UPD;No.6病例、No.15病例及No.22病例應用絨毛培養(yǎng)核型分析法均未發(fā)現(xiàn)結構異常。而絨毛培養(yǎng)核型分析發(fā)現(xiàn)的平衡易位和環(huán)狀染色體,由于沒有微缺失和重復,在SNP微陣列檢測中的結果是正常的。對照組分子核型均正常。4統(tǒng)計學分析結果絨毛細胞培養(yǎng)實驗組與對照組之間不存在顯著性差異(χ2=1.70,P0.05)。本研究絨毛培養(yǎng)的成功率為79.0%,而SNP微陣列檢測技術的成功率為100%,兩者比較存在顯著性差異(χ2=6.54,P0.05)。結論SNP微陣列檢測技術準確率高,特異性強,在檢測稽留流產(chǎn)遺傳學病因方面,具有絨毛細胞培養(yǎng)核型分析無法比擬的優(yōu)勢,為查找稽留流產(chǎn)病因,指導下次妊娠提供可靠的實驗室證據(jù)。
【關鍵詞】：稽留流產(chǎn) 絨毛細胞 核型分析 SNP微陣列技術 染色體異常
【學位授予單位】：天津醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R714.21
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-11
• 縮略語11-12
• 前言12-17
• 研究現(xiàn)狀、成果13-16
• 研究目的、方法16-17
• 對象和方法17-20
• 1 研究對象17
• 2 研究方法17-20
• 2.1 絨毛細胞培養(yǎng)染色體核型分析法檢測稽留流產(chǎn)組織絨毛17-18
• 2.2 SNP微陣列技術檢測稽留流產(chǎn)組織絨毛18-19
• 2.3 統(tǒng)計處理19-20
• 結果20-32
• 1 絨毛培養(yǎng)及核型分析結果20-23
• 1.1 絨毛培養(yǎng)結果20
• 1.2 核型分析結果20-23
• 2 SNP微陣列技術檢測結果23-29
• 3 絨毛培養(yǎng)及核型分析與SNP微陣列技術檢測結果比較29-32
• 討論32-42
• 1 稽留流產(chǎn)與胚胎染色體異常的關系32-35
• 2 檢測稽留流產(chǎn)胚胎方法比較35-42
• 2.1 絨毛細胞培養(yǎng)及核型分析法35-36
• 2.2 熒光原位雜交技術36-37
• 2.3 基于微陣列的基因組拷貝數(shù)量分析技術37-42
• 結論42-43
• 參考文獻43-48
• 發(fā)表論文和參加科研情況說明48-49
• 附錄49-50
• 綜述 稽留流產(chǎn)病因及絨毛染色體檢測的研究現(xiàn)狀50-63
• 綜述參考文獻58-63
• 致謝63-64

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 田寅;太史婧華;荊洪英;國玉芝;張志國;;CYP1B1 SNP rs1056827,rs1056836基因多態(tài)性與乳腺癌關聯(lián)研究[J];黑龍江醫(yī)藥科學;2014年05期

2 李陽洋;章勤;;自然流產(chǎn)絨毛染色體核型分析的研究現(xiàn)狀[J];實用婦產(chǎn)科雜志;2012年06期

3 劉鳳橋;張卓;陳林興;;稽留流產(chǎn)的相關因素及對策研究進展[J];云南中醫(yī)學院學報;2011年06期

4 王琳;袁學華;陳秀蘭;;聯(lián)合應用核型分析、熒光原位雜交及aCGH技術檢測胎兒額外小標記染色體[J];中國優(yōu)生與遺傳雜志;2014年10期

  本文關鍵詞：SNP微陣列檢測稽留流產(chǎn)組織絨毛染色體異常，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：342871