本文關(guān)鍵詞：microRNA-145抑制卵巢癌細(xì)胞增殖的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：研究目的：通過建立穩(wěn)定表達(dá)miR-145的卵巢癌細(xì)胞系(SKOV3-miRl 45-CMV-RFP),進(jìn)行裸鼠移植瘤實(shí)驗(yàn)。探討microRNA-145對(duì)卵巢癌細(xì)胞體內(nèi)增殖的影響。研究方法：建立miR-145-CMV-RFP-SKOV3穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞系。設(shè)計(jì)miR-145shRNA引物序列,合成序列,與載體連接,慢病毒包裝,慢病毒感染SKOV3細(xì)胞和篩選穩(wěn)定細(xì)胞系的感染SKOV3細(xì)胞。驗(yàn)證其融合程度,使SKOV3細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)miR-145。建立裸鼠皮下移植瘤模型。將裸鼠隨機(jī)分為SK-OV-3組、SK-OV-3-rfp組SK-OV-3-rfp-shRNA組。每只裸鼠背部皮下注射0.1 mL的細(xì)胞懸液,接種后觀察成瘤情況。成瘤后,每3天用游標(biāo)卡尺測(cè)量一次腫瘤的長(zhǎng)徑和寬徑,按照體積計(jì)算公式計(jì)算瘤體積并繪制腫瘤生長(zhǎng)曲線。根據(jù)腫瘤生長(zhǎng)情況,30天后稱量裸鼠體重,之后脫頸處死,并完整剝離各組皮下腫瘤,分別拍照記錄腫瘤大小。摘取腫瘤組織,采用Western Blot檢測(cè)腫瘤組織中MUC1蛋白表達(dá)水平。實(shí)驗(yàn)結(jié)果：1.成功構(gòu)建miR-145-CMV-RFP-SKOV3穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞系,驗(yàn)證其融合程度：LvX-MOCK-CMV-RFP感染SKOV3細(xì)胞,融合度達(dá)到90%以上,LvX-miR-145-CMV-RFP感染SKOV3細(xì)胞,融合度達(dá)到90%以上。使SKOV3細(xì)胞能穩(wěn)定表達(dá)mi R-145。2. miR-145-CMV-RFP-SKOV3對(duì)裸鼠體內(nèi)SKOV3細(xì)胞移植瘤的抗腫瘤作用。皮下接種細(xì)胞后觀察裸鼠成瘤大小,計(jì)算腫瘤體積大小,每三天測(cè)量一次,繪制腫瘤生長(zhǎng)曲線。與SK-OV-3組比較,接種細(xì)胞懸液SK-OV-3-rfp-shRNA組裸鼠腫瘤生長(zhǎng)速度緩慢并且腫瘤體積明顯減小(P0.01)。與SK-OV-3組比較,SK-OV-3-rfp組裸鼠腫瘤體積減小,但無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。Western Blot檢測(cè)結(jié)果表明：與SK-OV-3組比較,SK-OV-3-rfp-shRNA組裸鼠腫瘤組織中的MUC1蛋白表達(dá)量明顯下調(diào)(P0.01)。與SK-OV-3組比較,SK-OV-3-rfp組裸鼠腫瘤組織中的MUC1表達(dá)量無明顯變化(P0.05),結(jié)果表明, miR-145可能通過下調(diào)MUC1的表達(dá)來抑制卵巢癌SK-OV-3細(xì)胞的增殖。結(jié)論：miR-145-CMV-RFP-SKOV3對(duì)裸鼠體內(nèi)SKOV3細(xì)胞增殖有明顯的抑制作用,可能與通過下調(diào)MUC1蛋白表達(dá)有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：卵巢癌 裸鼠 增殖 microRNA-145 MUC1
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R737.31
【目錄】：

• 前言4-5
• 中文摘要5-7
• Abstract7-11
• 第1章 引言11-12
• 第2章 綜述12-18
• 2.1 MICRORNAs及MIR-145的生物學(xué)功能與結(jié)構(gòu)特征12-14
• 2.2 MIR-145的抑制腫瘤的作用14
• 2.3 MIR-145與卵巢癌的關(guān)系14-15
• 2.4 MIR-145與宮頸癌的關(guān)系15-16
• 2.5 MIR-145與子宮內(nèi)膜癌的關(guān)系16-17
• 2.6 展望17-18
• 第3章 實(shí)驗(yàn)材料與方法18-31
• 3.1 材料18-23
• 3.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物18
• 3.1.2 主要試劑及儀器18-23
• 3.2 實(shí)驗(yàn)方法23-31
• 3.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)23
• 3.2.2 細(xì)胞轉(zhuǎn)染23-27
• 3.2.3 裸鼠皮下移植瘤模型的建立27-28
• 3.2.4 Western Blot檢測(cè)腫瘤組織中MUC1的蛋白表達(dá)水平28-30
• 3.2.5 統(tǒng)計(jì)方法30-31
• 第4章 結(jié)果31-34
• 4.1 MIR-145-CMV-RFP-SKOV3穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞系的建立31
• 4.2 MIR-145-CMV-RFP-SKOV3對(duì)裸鼠體內(nèi)SKOV3細(xì)胞移植瘤的抗腫瘤作用31-32
• 4.3 WENSTERN BLOT檢測(cè)裸鼠腫瘤組織中的MUC1蛋白表達(dá)水平32-34
• 第5章 討論34-39
• 第6章 結(jié)論39-40
• 參考文獻(xiàn)40-50
• 作者簡(jiǎn)介及在學(xué)期間所取得的科研成果50-51
• 致謝51

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 陳勇;劉巍;;microRNA影響抗腫瘤藥物敏感性相關(guān)研究進(jìn)展[J];臨床腫瘤學(xué)雜志;2009年09期

2 牛曉曉;王秦秦;;microRNA與肺癌[J];中國(guó)肺癌雜志;2010年04期

3 劉靜;王小中;;慢性粒細(xì)胞白血病相關(guān)microRNA的研究進(jìn)展[J];分子診斷與治療雜志;2010年04期

4 LEE Younghee;LUSSIER Yves A;;Identification of common microRNA-mRNA regulatory biomodules in human epithelial cancer[J];Chinese Science Bulletin;2010年31期

5 唐志強(qiáng);;The effect of microRNA-21-siRNA-lentivirus on biological behaviors in human hepatic cancer cell line hepG2[J];China Medical Abstracts(Surgery);2012年01期

6 ;PTEN and PDCD4 are Bona Fide Targets of microRNA-21 in Human Cholangiocarcinoma[J];Chinese Medical Sciences Journal;2012年02期

7 林建宇;朱雨捷;王晶;湯溢飛;徐中華;;急性冠狀動(dòng)脈綜合征相關(guān)microRNA靶向通路及其功能分析[J];蘇州大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2012年04期

8 崔洪亮;張陽德;;microRNA的協(xié)同調(diào)控網(wǎng)的構(gòu)建與研究[J];中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志;2012年33期

9 張明杰;徐卓明;朱麗敏;龔霄雷;黃蕊;;先天性心臟病重度肺動(dòng)脈高壓血漿 microRNA 的分析與驗(yàn)證[J];上海醫(yī)學(xué);2013年12期

10 孟勝喜;胡義揚(yáng);馮琴;;microRNA在中醫(yī)藥防治非酒精性脂肪性肝病中的應(yīng)用[J];中華中醫(yī)藥雜志;2014年03期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 荊清;袁文俊;秦永文;;microRNA的基因調(diào)控新功能[A];中國(guó)生理學(xué)會(huì)第五屆全國(guó)心血管、呼吸和腎臟生理學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要匯編[C];2005年

2 靳新;駱志剛;王金華;管乃洋;;microRNA靶標(biāo)研究進(jìn)展[A];中國(guó)遺傳學(xué)會(huì)功能基因組學(xué)研討會(huì)論文集[C];2006年

3 ;Comparasion of Inhibitory Effects on Survivin Gene Expression in Prostate Cancer by Vector-based microRNA and siRNA[A];2008年全國(guó)生物化學(xué)與分子生物學(xué)學(xué)術(shù)大會(huì)論文摘要[C];2008年

4 朱丹霞;徐衛(wèi);繆扣榮;方成;朱華淵;董華潔;王冬梅;范磊;喬純;李建勇;;慢性淋巴細(xì)胞白血病microRNA異常表達(dá)研究[A];第13屆全國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)會(huì)議論文摘要[C];2011年

5 Yangchao Chen;;Small molecule modulators of microRNA-34a with anti-cancer activities[A];2013醫(yī)學(xué)前沿論壇暨第十三屆全國(guó)腫瘤藥理與化療學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2013年

6 金希;厲有名;;單純性脂變與非酒精性脂肪性肝炎間差異microRNA表達(dá)譜研究[A];2009香港-北京-杭州內(nèi)科論壇暨2009年浙江省內(nèi)科學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2009年

7 賈新正;盧肖男;聶慶華;張細(xì)權(quán);;雞部分microRNA的同源預(yù)測(cè)與克隆驗(yàn)證[A];中國(guó)動(dòng)物遺傳育種研究進(jìn)展——第十五次全國(guó)動(dòng)物遺傳育種學(xué)術(shù)討論會(huì)論文集[C];2009年

8 李炯;段德民;鄭克孝;;新型非標(biāo)記高通量microRNA芯片技術(shù)[A];第一屆全國(guó)生物物理化學(xué)會(huì)議暨生物物理化學(xué)發(fā)展戰(zhàn)略研討會(huì)論文摘要集[C];2010年

9 徐小濤;陸曉;孫婧;束永前;;肺癌側(cè)群細(xì)胞microRNA表達(dá)譜檢測(cè)及初步分析[A];2010’全國(guó)腫瘤分子標(biāo)志及應(yīng)用學(xué)術(shù)研討會(huì)暨第五屆中國(guó)中青年腫瘤專家論壇論文匯編[C];2010年

10 王俊峰;李巍;吳小江;阮康成;;大鼠附睪microRNA表達(dá)譜的研究[A];第十一次中國(guó)生物物理學(xué)術(shù)大會(huì)暨第九屆全國(guó)會(huì)員代表大會(huì)摘要集[C];2009年

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 陳英云 喬蕤琳;哈醫(yī)大成功研發(fā)國(guó)內(nèi)首例microRNA轉(zhuǎn)基因及敲減小鼠模型[N];黑龍江經(jīng)濟(jì)報(bào);2010年

2 記者 陳青;2厘米以下肝癌檢出率88%[N];文匯報(bào);2011年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 崔洪亮;microRNA的腫瘤表達(dá)研究及協(xié)同調(diào)控網(wǎng)絡(luò)分析[D];中南大學(xué);2014年

2 馬建華;高粱低磷低氮形態(tài)生理特征及低氮響應(yīng)的microRNA研究[D];山西農(nóng)業(yè)大學(xué);2014年

3 李虔楨;microRNA相關(guān)基因遺傳多態(tài)性與冠心病臨床關(guān)聯(lián)及預(yù)后研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2015年

4 王耀輝;血清microRNA作為乳腺癌診斷標(biāo)志物的研究[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

5 周霽子;環(huán)境因素對(duì)心臟畸形胎兒影響的表觀遣傳學(xué)機(jī)制[D];復(fù)旦大學(xué);2013年

6 張麗;microRNA通過調(diào)控小膠質(zhì)細(xì)胞炎性反應(yīng)參與血管性認(rèn)知障礙發(fā)生發(fā)展[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

7 查若鵬;肝癌轉(zhuǎn)移相關(guān)microRNA的鑒定及其分子機(jī)制研究[D];復(fù)旦大學(xué);2013年

8 方硯田;結(jié)腸癌干細(xì)胞分選、差異microRNA表達(dá)譜檢測(cè)以及miR-449b-CCND1、E2F3通路在結(jié)腸癌干細(xì)胞自我更新的機(jī)制研究[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

9 辛成齊;椰棗microRNA鑒定及其在果實(shí)發(fā)育過程中的表達(dá)譜研究[D];中國(guó)科學(xué)院北京基因組研究所;2015年

10 李棟;先天性心臟病血漿microRNA表達(dá)譜及與GATA4靶序列單核苷酸多態(tài)性的關(guān)聯(lián)研究[D];山東大學(xué);2015年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 高智紅;應(yīng)用多樣性增量方法識(shí)別人類基因組microRNA前體序列[D];內(nèi)蒙古大學(xué);2010年

2 王娜娜;microRNA進(jìn)化關(guān)系及編碼特性研究[D];內(nèi)蒙古大學(xué);2007年

3 王玫;小麥microRNA的鑒定與分析[D];南昌大學(xué);2007年

4 秦保東;原發(fā)性膽汁性肝硬化microRNA表達(dá)譜的檢測(cè)及其功能研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2013年

5 吳曉妍;基于納米復(fù)合材料及生物放大技術(shù)構(gòu)建的電化學(xué)microRNA傳感器的研究[D];西南大學(xué);2015年

6 周景輝;2型糖尿病microRNA表達(dá)譜及其信號(hào)通路研究[D];華南理工大學(xué);2015年

7 姜溪;血漿microRNA-486、microRNA-499在肺癌中的表達(dá)及臨床價(jià)值的研究[D];河北大學(xué);2015年

8 林杉;營(yíng)養(yǎng)誘導(dǎo)舍飼綿羊非繁殖季節(jié)發(fā)情相關(guān)microRNA篩選及其靶基因功能驗(yàn)證[D];石河子大學(xué);2015年

9 林妹妹;microRNA-192 和 microRNA-21 在 IBD 患者中的表達(dá)情況[D];福建醫(yī)科大學(xué);2015年

10 徐嬌陽;循環(huán)microRNA用于低氧性肺動(dòng)脈高壓早期診斷的實(shí)驗(yàn)研究[D];石河子大學(xué);2015年

  本文關(guān)鍵詞：microRNA-145抑制卵巢癌細(xì)胞增殖的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：340540