發(fā)布時(shí)間：2017-04-27 14:06

  本文關(guān)鍵詞：E-鈣粘蛋白基因啟動(dòng)子區(qū)異常甲基化與子宮肌瘤的關(guān)聯(lián)研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:子宮肌瘤是婦女在生育年齡最常見(jiàn)的腫瘤,其發(fā)生率約為20~30%。雖然子宮肌瘤是良性腫瘤,但是它可以導(dǎo)致女性月經(jīng)出血過(guò)多、慢性盆腔痛、反復(fù)流產(chǎn)、不孕等。子宮肌瘤的確切發(fā)病機(jī)制到目前仍不清楚。有研究表明子宮肌瘤的發(fā)生和發(fā)展與一些腫瘤抑制基因的異常表達(dá)相關(guān),例如:T-cadherin、p53、KLF11、DLEC1和KRT19等。腫瘤抑制基因的失活或者功能缺失可能是形成子宮肌瘤的原因之一。E-鈣粘蛋白是一個(gè)重要的腫瘤抑制基因,屬于細(xì)胞表面糖蛋白家族中的一員,它可以維持同質(zhì)細(xì)胞間的粘附和保持組織結(jié)構(gòu)的完整性。大量研究表明,E-鈣粘蛋白的異常表達(dá)與許多上皮性腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移有關(guān),包括子宮內(nèi)膜癌、子宮頸癌、卵巢癌和肉瘤等。另外,E-鈣粘蛋白的異常表達(dá)在一些良性侵襲性疾病的發(fā)生和發(fā)展中也起著重要作用。如:E-鈣粘蛋白表達(dá)的缺失是子宮內(nèi)膜異位癥中異位內(nèi)膜轉(zhuǎn)移的先決條件。有關(guān)E-鈣粘蛋白與子宮肌瘤的研究還少有報(bào)道,Matsuzaki等發(fā)現(xiàn)患有子宮肌瘤的不孕婦女的分泌中期內(nèi)膜E-鈣粘蛋白表達(dá)明顯升高。E-鈣粘蛋白的異常表達(dá)與E-鈣粘蛋白基因(CDH1)基因突變、等位基因的缺失以及基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化有關(guān)。積累的研究表明CDH1基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化是導(dǎo)致其在腫瘤中轉(zhuǎn)錄失活的重要分子機(jī)制。甲基化對(duì)啟動(dòng)子區(qū)的活性有明顯的降低作用,進(jìn)而可以導(dǎo)致E-鈣粘蛋白表達(dá)下調(diào)甚至失活,從而引起腫瘤的發(fā)生、侵襲和轉(zhuǎn)移。本研究擬在探討CDH1基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化與子宮肌瘤發(fā)病的關(guān)系,目的在于從表觀遺傳學(xué)上更為深入地探究子宮肌瘤的發(fā)病機(jī)制,也為臨床上治療該疾病提供新的靶點(diǎn)。方法:1標(biāo)本采集:病例組:取自2014.1月—2014.8月在河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院婦科因子宮肌瘤就診并接受手術(shù)的患者102例,患者的年齡段為31~58歲(平均年齡47.67±4.51歲)。術(shù)后經(jīng)病理證實(shí)均為子宮肌瘤,無(wú)惡變。對(duì)照組:收集在河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院同期因?qū)m頸上皮內(nèi)瘤變III級(jí)(CINIII級(jí))就診并接受手術(shù)治療的患者50例,其年齡段為26~55歲(平均年齡44.90±8.49歲)。均經(jīng)病理證實(shí)是正常子宮內(nèi)膜組織。以上標(biāo)本收集均在經(jīng)過(guò)患者知情同意后進(jìn)行。2實(shí)驗(yàn)步驟2.1標(biāo)本處理:病例組與對(duì)照組標(biāo)本離體后,即刻浸泡在事先準(zhǔn)備好的RNA later液中,并馬上轉(zhuǎn)移到4℃冰箱中過(guò)夜,然后放在-20℃冰箱中貯存以備用。2.2 DNA提取:將病例組與對(duì)照組組織標(biāo)本各取出50-100mg,分別進(jìn)行組織研磨,提取組織DNA。2.3 E-鈣粘蛋白基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化狀態(tài)的檢測(cè):利用甲基化特異性PCR技術(shù)(MSP)檢測(cè)所有標(biāo)本的組織DNA中的甲基化情況,分別計(jì)算兩組的甲基化率。2.4 E-鈣粘蛋白表達(dá)水平的檢測(cè):應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)分別檢測(cè)甲基化陽(yáng)性和甲基化陰性的組織標(biāo)本中E-鈣粘蛋白的表達(dá)情況。2.5數(shù)據(jù)分析:實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)使用SPSS軟件進(jìn)行分析。結(jié)果:1比較病例組與對(duì)照組中CDH1基因啟動(dòng)子區(qū)的甲基化情況在子宮肌瘤的內(nèi)膜組織和正常子宮的內(nèi)膜組織中,CDH1基因的甲基化率分別是33.3%(34/102)和8%(4/50)。與正常內(nèi)膜組織相比,子宮肌瘤的內(nèi)膜組織中CDH1基因甲基化率明顯升高(P=0.001)。2比較增殖期內(nèi)膜和分泌期內(nèi)膜中CDH1基因啟動(dòng)子區(qū)的甲基化情況在病例組中,增殖期和分泌期內(nèi)膜中CDH1基因的甲基化率分別為36.36%(12/33)和32.35%(23/68),兩者間甲基化率無(wú)明顯差異(P=0.357);在對(duì)照組中,增殖期和分泌期內(nèi)膜中CDH1基因的的甲基化率分別為6.67%1(1/15)和9.38%(3/32),兩者間甲基化率也無(wú)明顯差異(P=0.272)。3比較CDH1基因甲基化陽(yáng)性組織和其陰性組織中的E-鈣粘蛋白表達(dá)量在CDH1基因甲基化陽(yáng)性的組織中,E-鈣粘蛋白平均表達(dá)量為61.74±17.53;在其陰性的組織中,E-鈣粘蛋白平均表達(dá)量為80.13±40.06。經(jīng)秩和檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì),E-鈣粘蛋白在CDH1基因甲基化陽(yáng)性組織中的平均表達(dá)量明顯低于其在甲基化陰性組織中的平均表達(dá)量(Z=-2.045,P=0.041)。結(jié)論:在子宮肌瘤患者的子宮內(nèi)膜組織中,CDH1基因啟動(dòng)子區(qū)存在異常甲基化狀態(tài),且CDH1基因啟動(dòng)子區(qū)的異常甲基化可能與E-鈣粘蛋白表達(dá)丟失相關(guān)。結(jié)果提示CDH1基因可能在子宮肌瘤的發(fā)病中起一定的作用。
【關(guān)鍵詞】：E-鈣粘蛋白基因 甲基化 子宮肌瘤 發(fā)病機(jī)制 MSP
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R737.33
【目錄】：

• 中文摘要4-7
• 英文摘要7-10
• 英文縮寫10-11
• 前言11-12
• 材料與方法12-18
• 結(jié)果18-20
• 附圖20-22
• 附表22-24
• 討論24-27
• 結(jié)論27-28
• 參考文獻(xiàn)28-32
• 綜述 子宮肌瘤及其相關(guān)遺傳32-48
• 參考文獻(xiàn)41-48
• 致謝48-49
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷49

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前6條

1 田玉玲;;B超和CT在診斷子宮肌瘤中的作用對(duì)比[J];中外醫(yī)學(xué)研究;2012年31期

2 李臣;董堅(jiān);陳明清;李文亮;任俊宇;陳圣雄;李秋恬;耿計(jì)偉;繆延棟;楊靜;;上皮鈣黏素1基因啟動(dòng)子甲基化對(duì)結(jié)腸癌上皮鈣黏素和β-連接素表達(dá)的影響[J];中華胃腸外科雜志;2011年07期

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  本文關(guān)鍵詞：E-鈣粘蛋白基因啟動(dòng)子區(qū)異常甲基化與子宮肌瘤的關(guān)聯(lián)研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號(hào)：330739