背景卵巢癌是女性死于惡性婦科腫瘤的常見病因,它的致死性主要是由于疾病早期不易被發(fā)現(xiàn)以及對終末期或復(fù)發(fā)性患者因體內(nèi)廣泛的腫瘤浸潤和轉(zhuǎn)移導(dǎo)致患者最終難以得到有效治療所致。MicroRNA可參與腫瘤細(xì)胞的癌變,增殖,凋亡,轉(zhuǎn)移,侵襲,和耐藥性的產(chǎn)生,并有相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道其可以扮演原癌基因或抑癌基因不同的角色。我們的前期實(shí)驗(yàn)顯示卵巢良性組織中的miR-135b-3p表達(dá)量明顯低于卵巢腫瘤組織。因此,我們提出猜想miR-135b-3p基因是否也如其在胰腺癌,大腸癌等相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道中一樣發(fā)揮癌基因的作用,可促進(jìn)卵巢癌細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移及調(diào)控上皮-間質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)化（EMT）相關(guān)蛋白的表達(dá),是否可以成為卵巢癌血清學(xué)診斷有價值的早期標(biāo)志物。本實(shí)驗(yàn)主要探討研究miR-135b-3p在增強(qiáng)上皮性卵巢癌增殖,侵襲轉(zhuǎn)移,上皮-間質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)化中的作用和機(jī)制。本課題的主要研究內(nèi)容包括以下三個方面:一.miR-135b-3p在上皮性卵巢癌組織中的表達(dá)及其與不同臨床病理特征的相關(guān)性二.miR-135b-3p在OVCAR-3、CAOV-3細(xì)胞中的表達(dá)及對卵巢癌細(xì)胞增殖、遷移及侵襲的影響三.miR-135b-3p促進(jìn)卵巢癌細(xì)胞侵襲和轉(zhuǎn)移的相... 

【文章來源】：南方醫(yī)科大學(xué)廣東省

【文章頁數(shù)】：76 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－】．卵巢良性組織１０例，卵巢癌組織２８例中ｈａｓ－ｍｉＲ－１３５ｂ－３ｐ的平均表達(dá)量（１．４５土??０．２０）?，?９５％的置信區(qū)間（０．０７２，?０．８３２），差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義＝２．０３，?ｐ＝０．０２１）??

１．５－１?ＯＶＣＡＲ－３?Ｅ３?ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ?ＮＣ?２．５￣｜?ＣＡＯＶ－３?Ｅ２３?ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ?ＮＣ??■５５?□?ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ?－５?□?ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ??？?－ｒ?孟２０?徽??Ｉ１０＇?Ｓ?１１５圓州??ｆ。，ｉｎ?陶?＊＊?Ｉ１０?ｉｎ?ｉｎ??漫議?＿ｎ?１０５?■?議??ｏｏ－ｉ￣??——＿?〇?０?ｊ＿【？？？》］，』—?Ｌ?－?－ａ?１?——??ｐ－ＥＲＫ?ＭＭ?Ｐ－９?ｐ－ＥＲＫ?ＭＭ?Ｐ－９??圖３－４ａ、３－４ｂ．低表達(dá)ｍｉＲ－１３５ｂ－３ｐ對ＯＶＣＡＲ－３和ＣＡＯＶ－３細(xì)胞中ＭＭＰ－９蛋白表達(dá)的影??響（＊＊ｐ＜０．０１、…／Ｋ０．００１）??Ｆｉｇｕｒｅ?３－４ａ＾?３－４ｂ．Ｅｆｆｅｃｔ?ｏｆ?ｌｏｗ?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｏｆ?ｍｉＲ－１３５ｂ－３ｐ?ｏｎ?ＭＭＰ－９?ｐｒｏｔｅｉｎ?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｉｎ??ＯＶＣＡＲ－３?ａｎｄ?ＣＡＯＶ－３?ｃｅｌｌｓ?（＊，＜０？０１、＊＊＞＜０．００１?）??３．２．４雙熒光素酶活性檢測驗(yàn)證ＲＯＵＯｌ是ｍｉＲ－１３５ｂ－３ｐ的靶基因??探討ｍｉＲ－１３５ｂ－３ｐ促進(jìn)卵巢癌侵襲轉(zhuǎn)移的具體作用機(jī)制，采用雙熒光素酶報(bào)??告基因檢測驗(yàn)證ＲＯＢＯｌ為ｍｉＲ－１３５ｂ－３ｐ下游靶基因，支持ｍｉＲ－１３５ｂ－３ｐ與??ＲＯＢＯｌ直接結(jié)合的觀點(diǎn)。根據(jù)ｍｉＲ－１３５ｂ－３ｐ與ｔａｒｇｅｔｉｎｇ基因預(yù)測，設(shè)計(jì)祀基因??ＲＯＢＯｌ－３＇ＵＴＲ熒光素酶表達(dá)載體（ＷＴ）及其突變載體（Ｍｕｔ）。檢測結(jié)果發(fā)現(xiàn)??ｍｉＲ－１３５ｂ－３ｐ與基因ＲＯＢＯｌ的３＇－ＵＴＲ之間的結(jié)合位點(diǎn)如圖３－５ａ所示。因此，??我們

?碩士學(xué)位論文???４〇＿?Ｈｉ?ｍｉｍｉｃ?ＮＣ＋ＷＴ??■ｆ?３０－?ｔ＝．?ｍｉｍｉｃ?ＮＣ＋ＭＵＴ??虧?＿?自?ｒ＾ｉ?１＝１?ｍｉＲＮＡ＋ｗＴ??２?２〇－?■?１?１?ｍｉＲＮＡ＋ＭＵＴ??｜?．－Ｉ?．??。丨＿?Ｉｆ?，丨ｒ??圖３－６．將野生型ＲＯＢＯｌ?３ＵＴＲ或突變型ＲＯＢＯｌ與ｍｉＲ－１３５ｂ－３ｐ或ｍｉｍｉｃ－ＮＣ共轉(zhuǎn)染到??ＨＥＫ２９３Ｔ細(xì)胞．４８小時后測量相對熒光素酶活性。（＊Ｖ〈〇．〇ｌ）??Ｆｉｇｕｒｅ?３－６．Ｃｏ－ｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎ?ｏｆ?ｗｉｌｄ－ｔｙｐｅ?ＲＯＢＯｌ?３＇ＵＴＲ?ｏｒ?ｍｕｔａｎｔ?ＲＯＢＯｌ?ｗｉｔｈ?ｍｉＲ－１３５ｂ－３ｐ?ｏｒ??ｍｉｍｉｃ－ＮＣ?ｉｎｔｏ?ＨＥＫ２９３Ｔ?ｃｅｌｌｓ．?Ａｆｔｅｒ?４８?ｈｏｕｒｓ?ｔｈｅ?ｒｅｌａｔｉｖｅ?ｌｕｃｉｆｅｒａｓｅ?ａｃｔｉｖｉｔｙ?ｗａｓ?ｍｅａｓｕｒｅｄ．?（＊＊ｐ??＜０．０１）??３．２．５血清中ｍｉＲ－１３５ｂ－３ｐ在卵巢癌患者組與健康人組中的表達(dá)水平??使用ｑＲＴ－ＰＣＲ法檢測卵巢癌患者組和健康人組血清中的ｍｉＲ－１３５ｂ－３ｐ表達(dá)??水平（圖３－７），采用２－ＡＡＣＴ方法，以秀麗隱桿線蟲微ＲＮＡ?（Ｃｅｌ－ｍｉＲ－３９）進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)??化，Ａ?ＡＣＴ＝?（ＣＴｍｉＲＮＡ－ＣＴｃｅｌ－ｍｉＲ－３９?）卵肢９＇者—（ＣＴｍｉＲＮＡ－ＣＴ?ｃｅｌ－ｍｉＲ－３９）正＊．人。經(jīng)檢驗(yàn)２?ＡＡ??口數(shù)據(jù)結(jié)果屬于偏態(tài)分布，采用Ｍａｎｎ－Ｗｈｉｔｎｅｙ檢驗(yàn)，顯示２６例卵巢癌患者血清??中ｍｉＲ－１３５ｂ－３ｐ的秩均值為３８．４０；?２６例健康人血清中ｍｉＲ－１３５ｂ＿３ｐ的秩均值為??１４．６０


本文編號：3272454