本文關(guān)鍵詞：骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植對(duì)環(huán)磷酰胺誘導(dǎo)的卵巢損傷大鼠卵巢功能的影響，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：本文主要探討骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSC)移植對(duì)環(huán)磷酰胺(CTX)誘導(dǎo)的大鼠卵巢損傷的影響。方法:采用CTX連續(xù)腹腔注射(首負(fù)荷50mg/kg,之后按10mg/kg.d連續(xù)腹腔注射14天)誘導(dǎo)大鼠卵巢損傷,每日8時(shí)取陰道脫落細(xì)胞檢查,觀察大鼠動(dòng)情周期變化來(lái)建立卵巢損傷模型。取出生14天的SD大鼠的骨髓進(jìn)行原代培養(yǎng)BMSC,傳代擴(kuò)增及鑒定,獲取第3-6代細(xì)胞進(jìn)行移植。將要進(jìn)行實(shí)驗(yàn)的大鼠分成為三個(gè)組。包括空白對(duì)照組,模型組及細(xì)胞移植組�？瞻讓�(duì)照組的處理方法是每次應(yīng)用生理鹽水1ml進(jìn)行腹腔注射,每天注射一次,共用15天。模型組:于第一天給予負(fù)荷劑量CTX腹腔注射,即50mg/kg溶于1ml生理鹽水中,之后按10mg/kg.d溶于1ml生理鹽水中,繼續(xù)給藥14天。細(xì)胞移植組按模型組給藥方法,但在第一天給藥后24小時(shí)左右給予尾靜脈移植BMSC,移植細(xì)胞量約為5×106/0.5ml。在停止給藥后1周處死所有動(dòng)物。心臟取血后采用放射免疫法檢測(cè)血清E2,FSH及LH水平,收集各組卵巢組織進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果:(1)與空白對(duì)照組對(duì)比,模型組和細(xì)胞移植組的雌二醇(E2)均下降(P0.05),黃體生成素(LH)均升高(P0.05),模型組卵泡刺激素(FSH)升高(P0.05),但細(xì)胞移植組的FSH無(wú)明顯改變(P0.05);與模型組對(duì)比,細(xì)胞移植組的E2顯著升高,FSH及LH顯著下降(P0.05);(2)與空白對(duì)照組比較,模型組及細(xì)胞移植組總卵泡數(shù)量下降(P0.05),以中大卵泡數(shù)下降為主(P0.05),但是細(xì)胞移植組總卵泡數(shù)及中大卵泡數(shù)較模型組顯著增加(P0.05),(3)卵巢組織TUNEL法檢測(cè)模型組及細(xì)胞移植組AI較空白對(duì)照組增加(P0.05),但是細(xì)胞移植組AI較模型組顯著下降(P0.05);(4)免疫組織化學(xué)法檢測(cè)發(fā)現(xiàn)卵泡顆粒細(xì)胞胞質(zhì)中存在Bax及Bcl-2蛋白表達(dá),空白對(duì)照組的卵泡顆粒細(xì)胞胞質(zhì)中散在表達(dá)Bax蛋白;模型組卵泡顆粒細(xì)胞質(zhì)中Bax蛋白的表達(dá)顯著增加,尤其是在閉鎖卵泡中;細(xì)胞移植組卵泡顆粒細(xì)胞胞質(zhì)中Bax蛋白的表達(dá)范圍明顯小于模型組�？瞻讓�(duì)照組Bcl-2蛋白在卵泡顆粒細(xì)胞胞質(zhì)中表達(dá)顯著,模型組Bcl-2蛋白在卵泡顆粒細(xì)胞胞質(zhì)中很散在表達(dá),細(xì)胞移植組Bcl-2蛋白表達(dá)范圍明顯大于模型組;(5)免疫印記法進(jìn)行半定量檢測(cè)結(jié)果提示模型組及細(xì)胞移植組較空白對(duì)照組的卵巢組織Bax蛋白表達(dá)量顯著升高(P0.05),Bcl-2蛋白表達(dá)量顯著下降(P0.05);但是細(xì)胞移植組較模型組的Bax蛋白表達(dá)量顯著下降(P0.05),Bcl-2蛋白表達(dá)量顯著升高(P0.05)。結(jié)論:通過(guò)本研究,我們發(fā)現(xiàn)經(jīng)尾靜脈移植BMSC入化療大鼠體內(nèi),在一定程度上減輕了大鼠卵巢損傷,進(jìn)一步通過(guò)免疫組織化學(xué)法及Western-Blot法檢測(cè)卵泡顆粒細(xì)胞凋亡蛋白結(jié)果提示BMSC移植可能通過(guò)調(diào)節(jié)卵泡顆粒細(xì)胞中Bax及Bcl-2蛋白表達(dá)水平來(lái)減輕CTX誘導(dǎo)的卵巢損傷。
【關(guān)鍵詞】：骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 環(huán)磷酰胺 卵巢早衰 卵巢損傷 細(xì)胞凋亡
【學(xué)位授予單位】：第四軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R711.75
【目錄】：

• 縮略語(yǔ)表5-6
• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-11
• 前言11-13
• 文獻(xiàn)回顧13-23
• 第一部分 CTX誘導(dǎo)的卵巢損傷大鼠模型的建立23-28
• 1 材料23
• 2 方法23-27
• 3 結(jié)果27
• 4 小結(jié)27-28
• 第二部分 BMSC原代培養(yǎng)，擴(kuò)增及鑒定28-35
• 1 材料28-29
• 2 方法29-32
• 3 結(jié)果32-34
• 4 小結(jié)34-35
• 第三部分 BMSC移植對(duì)CTX誘導(dǎo)的卵巢損傷大鼠卵巢功能的影響35-53
• 1 材料35-37
• 2 方法37-43
• 3 統(tǒng)計(jì)分析43
• 4 結(jié)果43-49
• 5 討論49-53
• 小結(jié)53-55
• 參考文獻(xiàn)55-67
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷和研究成果67-68
• 致謝68

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 ;Effects of Local Testicular Heating on Bcl-2 and Bax Protein Expression in Spermatogenic Cells in Rats[J];Journal of Reproduction and Contraception;2005年01期

  本文關(guān)鍵詞：骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植對(duì)環(huán)磷酰胺誘導(dǎo)的卵巢損傷大鼠卵巢功能的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：317850