本文關(guān)鍵詞：腺病毒介導(dǎo)的IL-28B對U14宮頸癌皮下移植瘤小鼠調(diào)節(jié)性T細胞的影響及抗腫瘤作用的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的：構(gòu)建小鼠(Babl/C和c57bl/6j )U14宮頸癌皮下移植瘤模型,研究腺病毒介導(dǎo)的IL-28B (Ad-mIL-28B)對U14宮頸癌皮下移植瘤小鼠脾臟中調(diào)節(jié)性T細胞(Tregs)的影響及其抗腫瘤的作用。方法：體外培養(yǎng)人胚腎293(HEK293)細胞；使用HEK293細胞擴增腺病毒(Ad-mIL-28B和Ad-EGFP)；采用微量全細胞病變法(CPE)進行病毒(Ad-mIL-28B 和 Ad-EGFP)滴度的測定；體外培養(yǎng)小鼠U14宮頸癌細胞,建立Babl/C 和 c57bl/6j小鼠U14宮頸癌腹水模型和皮下移植瘤模型；觀察并測定Ad-mIL-28B處理后小鼠(Babl/C口c57bl/6j) U14宮頸癌皮下移植瘤瘤體的生長、瘤重,并計算抑瘤率、脾臟、肺臟和肝臟指數(shù)；流式細胞術(shù)檢測Ad-mIL-28B處理后,U14宮頸癌皮下移植瘤小鼠(Babl/C口c57b1/6j)脾臟中CD4+CD25+Foxp3+Tregs的變化；HE染色法檢測小鼠(Babl/C 和 c57bl/6j) U14宮頸癌皮下移植瘤瘤體、肺臟及肝臟組織的病理變化。結(jié)果：1.采用CPE法測定病毒滴度后,病毒(Ad-mIL-28B 和 Ad-EGFP)滴度均為：108PFU/100μL。2成功建立了小鼠(Babl/C 和 c57b1/6j) U14宮頸癌腹水模型和皮下移植瘤模型。3.Ad-mIL-28B組、Ad-EGFP組及PBS組小鼠脾臟中的CD4+CD25+Foxp3+Tregs在淋巴細胞中所占的比例分別為4.76%±0.97%、5.38%±1.55%和6.92%±1.18%,與PBS組相比,Ad-mIL-28B組脾臟中的CD4+CD25+Foxp3+Tregs在淋巴細胞中所占的比例減少(p=0.034).4. Ad-mIL-28B組、Ad-EGFP組和PBS組Babl/C小鼠移植瘤的體積分別為107.6mm3±30.8mm3、 181.8mm3±14.2mm3 和 240.2mm3±21.3mm3,與PBS組相比,Ad-mIL-28B組能夠明顯的減小移植瘤的體積(p=0.008)。5.Ad-mIL-28B組、Ad-EGFP組和PBS組c57bl/6j小鼠移植瘤的體積分別為9.9mm3±2.7mm3、44.4mm3±7.6mm3和48.2mm3±8.1mm3,與 PBS組相比,Ad-mIL-28B組能夠明顯的減小移植瘤的體積(p=0.001)。6.Ad-mIL-28B組、Ad-EGFP組及PBS組小鼠移植瘤瘤重分別為78.4g±23.3g、200.1g±90.3g口303.2g±123.2g,與PBS組相比,Ad-mIL-28B組小鼠移植瘤瘤重明顯減輕(p=0.049)。7.Ad-mIL-28B組、Ad-EGFP組和PBS組Babl/C小鼠的抑瘤率分別為：66.45%±8.88%、24.76%±6.68%和0%,與PBS組相比,Ad-mIL-28B能明顯的抑制移植瘤的生長(p=0.000)。8.Ad-mIL-28B組脾臟和肺臟指數(shù)的變化與對照組相比,有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05),而肝臟指數(shù)的變化無明顯的統(tǒng)計學(xué)意義。9.HE染色結(jié)果表明,Ad-mIL-28B組腫瘤組織中的異型性的腫瘤細胞的數(shù)量與對照組相比明顯減少,肺臟和肝臟組織未見明顯的瘤細胞轉(zhuǎn)移。結(jié)論： Ad-mIL-28B能夠降低U14宮頸癌皮下移植瘤小鼠(Babl/C和c57b1/6j)脾臟中的CD4+CD25+Foxp3+Tregs,并且能抑制小鼠(Babl/C和c57bl/6j)U14宮頸癌皮下移植瘤的生長,Ad-mIL-28B可能是通過降低CD4+CD25+Foxp3+Tregs的表達從而抑制小鼠(Babl/C和c57bl/6j)U14宮頸癌皮下移植瘤的生長。
【關(guān)鍵詞】：IL-28B 腺病毒 宮頸癌 U14細胞 Tregs
【學(xué)位授予單位】：蘭州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R737.33
【目錄】：

• 中文摘要3-5
• Abstract5-9
• 第一章 前言9-16
• 1.1 立論依據(jù)9-10
• 1.2 研究進展10-15
• 1.3 研究內(nèi)容及目標(biāo)15-16
• 第二章 材料與方法16-22
• 2.1 實驗材料16-18
• 2.1.1 實驗對象16
• 2.1.2 實驗試劑16
• 2.1.3 實驗儀器16-17
• 2.1.4 實驗溶液17-18
• 2.2 實驗方法18-22
• 2.2.1 細胞培養(yǎng)18
• 2.2.2 腺病毒的擴增18
• 2.2.3 腺病毒滴度的測定18-19
• 2.2.4 建立小鼠U14宮頸癌腹水模型19
• 2.2.5 建立小鼠U14宮頸癌皮下移植瘤模型19-20
• 2.2.6 移植瘤瘤體積、瘤重和抑瘤率的測定20
• 2.2.7 脾臟、肺臟和肝臟指數(shù)的測定20
• 2.2.8 流式細胞術(shù)檢測小鼠脾臟中CD4~+CD25~+FoxP3~+Tregs的變化20-21
• 2.2.9 石蠟組織切片的制作及HE染色21
• 2.2.10 統(tǒng)計學(xué)方法21-22
• 第三章 結(jié)果22-30
• 3.1 擴增了腺病毒并測定了其滴度22
• 3.2 Ad-IL-28B處理后小鼠脾臟中的CD4~+CD25~+Foxp~(3+)Tregs減少22-24
• 3.3 Ad-mIL-28B抑制小鼠U14宮頸癌皮下移植瘤的生長24-28
• 3.4 Ad-mIL-28B對于脾臟、肺臟和肝臟指數(shù)的影響28
• 3.5 腫瘤組織、肺臟及肝臟的HE染色28-30
• 第四章 討論30-32
• 第五章 結(jié)論32-33
• 參考文獻33-39
• 文獻綜述39-46
• 參考文獻43-46
• 致謝46-47
• 在學(xué)期間的研究成果47-48
• 附錄 縮略語中英文對照表48-49

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本文編號：309962