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培養(yǎng)箱內(nèi)溫度和pH值對小鼠體外受精及胚胎發(fā)育的影響

發(fā)布時(shí)間:2017-04-14 10:23

  本文關(guān)鍵詞:培養(yǎng)箱內(nèi)溫度和pH值對小鼠體外受精及胚胎發(fā)育的影響,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:目的研究不同培養(yǎng)箱內(nèi)溫度和p H值對小鼠體外受精及胚胎發(fā)育的影響,探索較為優(yōu)化的體外受精培養(yǎng)箱內(nèi)溫度及p H值,為人類輔助生殖技術(shù)提供較規(guī)范的實(shí)驗(yàn)方法與數(shù)據(jù)。方法采用小鼠卵母細(xì)胞與精子進(jìn)行體外受精,并將受精后的胚胎置于胚胎培養(yǎng)液中培養(yǎng),分別將培養(yǎng)箱溫度設(shè)在36.4℃、36.7℃、37.0℃、37.3℃、37.6℃,觀察、計(jì)數(shù)D1天受精率、D2天卵裂率、D4天囊胚形成率、D5天囊胚孵出率,應(yīng)用激光共聚焦顯微鏡檢測胚胎染色體的畸變類型及計(jì)算畸變率。分別將培養(yǎng)液p H值設(shè)在7.05、7.20、7.35、7.50、7.65,觀察、計(jì)數(shù)D1天受精率、D2天卵裂率、D4天囊胚形成率、D5天囊胚孵出率,應(yīng)用激光共聚焦顯微鏡觀察胚胎紡錘體的改變情況。結(jié)果1培養(yǎng)箱內(nèi)溫度在小鼠配子體外受精及胚胎發(fā)育影響方面,受精率在37.0℃時(shí)最高,36.4與37.0℃組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.005),36.4與37.3℃組比較(P0.005),無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,36.4與37.6℃組比較(P0.005),有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,說明在36.4-37.3℃之間較適合配子受精。卵裂率在36.7℃時(shí)最高,36.4與37.0℃組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.005),36.4與37.3℃組比較(P0.005),無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,36.4與37.6℃組比較(P0.005),有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,說明在36.4-37.3℃之間時(shí)較適合受精卵卵裂。囊胚形成率在37.0℃時(shí)最高,36.4與37℃組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.005),36.7與37.0℃組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.005),36.7與37.3℃組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.005),說明在36.7-37.0℃之間較適合囊胚形成。囊胚孵出率在37.0℃時(shí)最高,36.4與37.0℃組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.005),36.7與37.0℃組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.005),36.7與37.3℃組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.005),說明在36.7-37.0℃之間較適合囊胚孵出。2培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)液p H值在小鼠體外受精及胚胎發(fā)育影響方面,配子受精率在p H7.50最高,p H7.05與7.20組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.005),p H7.20與7.65組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.005),說明在7.20-7.65之間較適合配子受精。卵裂率在p H7.35最高,p H7.05與7.20組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.005),p H7.20與7.50組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.005),p H7.5與7.65組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.005),說明在7.20-7.50之間較適合受精卵卵裂。囊胚形成率在p H7.50最高,p H7.05與7.20組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.005),p H7.20與7.50組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.005),p H7.50與7.65組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.005),說明在7.20-7.50之間較適合囊胚形成。囊胚孵出率在p H7.35最高,p H7.05與7.20組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.005),p H7.20與7.50組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.005),p H7.50與7.65組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.005),說明在7.20-7.50之間較適合囊胚孵出。結(jié)論1培養(yǎng)箱內(nèi)溫度36.4℃-37.3℃之間較適合配子受精、受精卵卵裂。36.7℃-37.0℃之間較適合囊胚形成、囊胚孵出。2培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)液p H值7.20-7.65之間較適合配子受精,7.20-7.50之間較適合受精卵卵裂、囊胚形成及囊胚孵出。
【關(guān)鍵詞】:體外受精 胚胎發(fā)育 胚胎培養(yǎng) 培養(yǎng)系統(tǒng) 溫度 pH值
【學(xué)位授予單位】:華北理工大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號】:R714.8
【目錄】:
  • 摘要4-6
  • Abstract6-10
  • 英文縮略表10-11
  • 引言11-13
  • 第1章 實(shí)驗(yàn)研究13-41
  • 1.1 材料與方法13-21
  • 1.1.1 實(shí)驗(yàn)材料13-15
  • 1.1.2 實(shí)驗(yàn)方法15-21
  • 1.1.3 數(shù)據(jù)分析21
  • 1.2 結(jié)果21-27
  • 1.2.1 培養(yǎng)箱溫度對小鼠體外受精及胚胎發(fā)育的影響21-24
  • 1.2.2 培養(yǎng)液pH值點(diǎn)對小鼠體外受精及胚胎發(fā)育的影響24-27
  • 1.3 討論27-37
  • 1.3.1 IVF-ET的意義27
  • 1.3.2 實(shí)驗(yàn)動物的選擇27-28
  • 1.3.3 體外受精及胚胎培養(yǎng)的影響因素28-29
  • 1.3.4 培養(yǎng)箱內(nèi)溫度及pH值對IVF-ET的意義29-30
  • 1.3.5 實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度范圍的選擇及溫度點(diǎn)的設(shè)定30-31
  • 1.3.6 實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)液pH值范圍的選擇及pH點(diǎn)的設(shè)定31-32
  • 1.3.7 受精卵紡錘體32
  • 1.3.8 激光共聚焦顯微鏡技術(shù)32-34
  • 1.3.9 實(shí)驗(yàn)中的相關(guān)技術(shù)34-35
  • 1.3.10 實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)箱溫度及培養(yǎng)液pH值對紡錘體的影響35
  • 1.3.11 體外受精技術(shù)的培養(yǎng)箱溫度及培養(yǎng)液pH值建議35-37
  • 1.4 結(jié)論37
  • 參考文獻(xiàn)37-41
  • 第2章 綜述 體外受精及胚胎發(fā)育培養(yǎng)相關(guān)因素研究進(jìn)展41-50
  • 2.1 研究背景41
  • 2.2 體外受精及胚胎發(fā)育的影響因素41-42
  • 2.3 培養(yǎng)相關(guān)因素對體外受精及胚胎培養(yǎng)的影響42-46
  • 2.3.1 培養(yǎng)箱對體外受精及胚胎培養(yǎng)的影響42-43
  • 2.3.2 培養(yǎng)液對體外受精及胚胎培養(yǎng)的影響43
  • 2.3.3 耗材對體外受精及胚胎發(fā)育的影響43-44
  • 2.3.4 氣體對體外受精及胚胎發(fā)育的影響44-45
  • 2.3.5 溫度對體外受精及胚胎培養(yǎng)的影響45
  • 2.3.6 濕度對體外受精及胚胎培養(yǎng)的影響45-46
  • 2.3.7 pH值對體外受精及胚胎發(fā)育的影響46
  • 2.4 總結(jié)46-47
  • 參考文獻(xiàn)47-50
  • 結(jié)論50-51
  • 附錄51-53
  • 致謝53-54
  • 導(dǎo)師簡介54-56
  • 作者簡介56-57
  • 學(xué)位論文數(shù)據(jù)集57

  本文關(guān)鍵詞:培養(yǎng)箱內(nèi)溫度和pH值對小鼠體外受精及胚胎發(fā)育的影響,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。



本文編號:305808

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