發(fā)布時間：2020-12-21 17:24

　　目的:1)研究腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體（tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand,TRAIL）對滋養(yǎng)細胞的侵襲、增殖及誘導細胞凋亡能力的影響;2)探討TRAIL調控滋養(yǎng)細胞侵襲的可能機制。方法:1)利用Transwell小室Matrigel侵襲實驗檢測不同濃度（0 ng/ml、0.1ng/ml、1ng/ml、10ng/ml）及作用時間（24h、48h、72h）的 rsTRAIL 對HTR-8/SVneo細胞侵襲能力的影響;2)利用CCK8比色法、AnnexinV-EGFP/PI雙染法分別檢測不同rsTRAIL濃度對HTR-8/SVneo細胞增殖及凋亡的影響;3)利用 qPCR 及 Western blotting 分別檢測經不同濃度（0 ng/ml、0.1 ng/ml、1 ng/ml、10 ng/ml）rsTRAIL 處理的 HTR-8/SVneo 細胞內 CXCR4、EGFR、MMP2 和miR-146a表達的變化。結果:1)在相同刺激時間下,隨著rsTRAIL濃度增加,穿越Transwell小室的HTR-8/... 

【文章來源】：南方醫(yī)科大學廣東省

【文章頁數】：79 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１滋養(yǎng)細胞的分化路徑［２］??

前言??滋養(yǎng)層細胞不斷分化以形成高度侵襲力的ＥＶＴ，而這種“侵襲力”受到的“生理限制”?［３－４］，包括：①“時間”限制：滋養(yǎng)細胞的侵襲最早從受精始，至孕１２周時達到頂峰，之后逐漸減弱直至妊娠２０周基本停止；②“”限制：滋養(yǎng)細胞侵襲僅局限在子宮肌層的１／３處。滋養(yǎng)細胞通過“有節(jié)、有調控性地生理侵襲”達蛻膜淺肌層約１／３處，促使螺旋動脈重鑄、母胎阻力顯著下降，建立起有效的母胎循環(huán)系統(tǒng)，以滿足胎兒營養(yǎng)需求的生理供??。在這其中任何因素導致滋養(yǎng)細胞侵襲力的嚴密調控環(huán)境失衡，均會導致滋??細胞生物行為學改變，滋養(yǎng)細胞植入深度不足，引起子宮螺旋動脈重鑄障礙，發(fā)后續(xù)相關病理病生事件，最終導致胎盤源性疾�。ㄈ缱影B前期、ＦＧＲ、流）發(fā)生因此，對這一婦產科學的熱點和難點問題一一?“滋養(yǎng)細胞侵襲的調控機制”的深入研究可以揭示該類疾病的發(fā)生發(fā)展過程，同時為診斷和??療該類疾病提供理論及實驗支持。??

?７２ｈ??Ｔｉｍｅ?（ｈ）??圖１－３不同濃度ｒｓＴＲＡＩＬ刺激ＨＴＲ－８／ＳＶｎｅｏ細胞后的細胞增殖曲線??予?０?ｎｇ／ｍｌ、０＿１?ｎｇ／ｍｌ、１?ｎｇ／ｍｌ、１０?ｎｇ／ｍｌ?的?ｒｓＴＲＡＩＬ?刺激?ＨＴＲ－８／ＳＶｎｅｏ?細胞分別在?２４?ｈ、??４８?ｈ、７２?ｈ行ＣＣＫ８比色法，根據反應后在４５０ｎｍ水平的吸光度繪制細胞增殖曲線。??Ｆｉｇ?１－３?Ｔｈｅ?ｃｅｌｌ?ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ?ｃｕｒｖｅ?ｏｆ?ＨＴＲ－８／ＳＶｎｅｏ?ｃｅｌｌｓ??ｔｒｅａｔｅｄ?ｗｉｔｈ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ?ｏｆ?ｓＴＲＡＩＬ??Ｕｓｉｎｇ?ＣＣＫ８?ｃｏｌｏｒｉｍｅｔｒｉｃ?ｍｅｔｈｏｄ?ｔｏ?ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ?ｔｅｓｔ?ＨＴＲ－８／ＳＶｎｅｏ?ｃｅｌｌｓ?ａｆｔｅｒ?ｔｒｅａｔｅｄ?ｗｉｔｈ??ｒｓＴＲＡＩＬ?ａｔ?ｔｈｅ?ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ?ｏｆ?０?ｎｇ?／?ｍｌ，?０．１?ｎｇ?／?ｍｌ，?１?ｎｇ?／?ｍｌ，?１０?ｎｇ?／?ｍｌ?ｆｏｒ?２４ｈ＞?４８ｈ＞?７２ｈ．??Ｃｅｌｌ?ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ?ｃｕｒｖｅ?ｗａｓ?ｄｒａｗｅｄ?ａｃｃｏｒｄｉｎｇ?ｔｏ?ｔｈｅ?ＯＤ?ｖａｌｕｅ?ａｔ?４５０ｎｍ?ａｆｔｅｒ?ｔｈｅ?ｒｅａｃｔｉｏｎ．??３．３?ｒｓＴＲＡＩＬ對ＨＴＲ－８／ＳＶｎｅｏ細胞凋亡的影響：??予?Ｏｎｇ／ｍｌ、０．１?ｎｇ／ｍｌ、１?ｎｇ／ｍｌ、１０?ｎｇ／ｍｌ?的?ｒｓＴＲＡＩＬ?刺激?ＨＴＲ－８／ＳＶｎｅｏ?細??胞４８?ｈ后通過Ａｎｎｅｘｉｎ?Ｖ－ＥＧＦＰ／ＰＩ雙染法后予流式細胞儀檢測細胞凋亡情況，??結果顯示（圖１－４、１－５

【參考文獻】：
期刊論文
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博士論文
[1]TRAIL耐藥細胞生物學行為改變及其分子機制的研究[D]. 王海冀.山東大學 2014
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本文編號：2930195