發(fā)布時間：2020-11-03 01:58

　　 目的:探討耐藥相關(guān)基因miR-126及EGFL7在新輔助化療后局部晚期宮頸癌組織和順鉑耐藥細胞株中的表達和意義,為預(yù)測新輔助化療敏感性提供新的理論依據(jù)。方法:選取山西大醫(yī)院婦產(chǎn)科2012年2月至2018年10月收治的FIGO分期ⅠB_(2、)ⅡA_2期的行鉑類為基礎(chǔ)的新輔助化療局部晚期宮頸癌患者35例。入選患者排除化療禁忌癥,放化療及手術(shù)治療史。所有入選患者均經(jīng)大醫(yī)院病理科病理組織證實明確,患者均簽署知情同意書,行2—3療程以鉑類為基礎(chǔ)的新輔助化療。2個療程后對35例患者進行療效評估,其中25例為臨床有效組,10例為臨床無效組,收集新輔助化療后的宮頸組織標本,進行免疫組織化學染色檢測臨床有效組及無效組組織切片中EGFL7的表達差異。利用在線數(shù)據(jù)庫對EGFL7的基因調(diào)控網(wǎng)絡(luò)進行分析,預(yù)測其可能的上游調(diào)控分子:microRNA-126。培養(yǎng)鉑類耐藥細胞株HeLa/DDP及親代細胞株HeLa,顯微鏡下觀察細胞形態(tài)差異,檢測兩組細胞的順鉑半數(shù)抑制濃度(IC50),然后分別進行細胞增殖實驗、細胞劃痕實驗、細胞侵襲實驗、細胞凋亡實驗檢測細胞的增殖、凋亡、侵襲和轉(zhuǎn)移。細胞免疫組織化學和蛋白印跡實驗檢測兩組細胞中EGFL7蛋白的表達。通過qRT-PCR檢測兩組細胞中miR-126及EGFL7的mRNA表達水平,進行獨立樣本t檢驗和person相關(guān)性分析。結(jié)果:1.新輔助化療臨床無效組化療后EGFL7的表達與臨床有效組相比明顯上調(diào)(P0.05),EGFL7蛋白在鉑類耐藥細胞株HeLa/DDP中表達顯著高于在親代HeLa細胞中的表達(P0.05)。2.與HeLa細胞株比較,HeLa/DDP細胞的IC50明顯升高(P0.05),轉(zhuǎn)移性增高(P0.05),侵襲性增強(P0.05);一定順鉑濃度作用后HeLa/DDP細胞凋亡率顯著低于親代HeLa細胞(P0.05),無藥物干預(yù)下其增殖速度低于親代HeLa細胞。3.qRT-PCR結(jié)果表明,與HeLa細胞相比,HeLa/DDP細胞中EGFL7及miR-126的mRNA表達顯著升高(P0.05)。4.相關(guān)性分析表明,miR-126與EGFL7的mRNA表達具有顯著相關(guān)性(r=0.992,P0.05)。結(jié)論:1.臨床化療無效組組織內(nèi)EGFL7的表達明顯較高,提示與耐藥相關(guān)。2.EGFL7和miR-126在鉑類耐藥HeLa/DDP細胞中的表達升高。miR-126與EGFL7在耐藥細胞株HeLa/DDP及HeLa細胞株中的表達具有相關(guān)性。
【學位單位】：山西醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2019
【中圖分類】：R737.33
【文章目錄】：
中文摘要
英文摘要
常用縮寫詞中英文對照表
前言
第一部分 EGFL7在行NACT的LACC患者宮頸癌組織中的表達和意義
    1 材料與方法
        1.1 一般資料
        1.2 實驗方法
        1.3 統(tǒng)計學處理
    2 結(jié)果
    3 討論
    4 結(jié)論
第二部分 在線工具預(yù)測與EGFL7相關(guān)的microRNA
    1 方法
        1.1 在線數(shù)據(jù)庫預(yù)測與EGFL7相關(guān)的mircroRNA
    2 結(jié)果
        2.1 在線數(shù)據(jù)庫預(yù)測與EGFL7相關(guān)的microRNA
    3 討論
    4 結(jié)論
第三部分 耐藥細胞株Hela/DDP和親代細胞株HeLa中 microRNA-126及EGFL7 的表達和意義
    1 材料與方法
        1.1 實驗細胞
        1.2 實驗試劑
        1.3 實驗主要設(shè)備
        1.4 實驗方法
        1.5 統(tǒng)計學方法
    2 結(jié)果
    3 討論
    4 結(jié)論
參考文獻
綜述
    參考文獻
致謝
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本文編號：2867916