目的:探討耐藥相關(guān)基因miR-126及EGFL7在新輔助化療后局部晚期宮頸癌組織和順鉑耐藥細(xì)胞株中的表達(dá)和意義,為預(yù)測新輔助化療敏感性提供新的理論依據(jù)。方法:選取山西大醫(yī)院婦產(chǎn)科2012年2月至2018年10月收治的FIGO分期ⅠB_(2、)ⅡA_2期的行鉑類為基礎(chǔ)的新輔助化療局部晚期宮頸癌患者35例。入選患者排除化療禁忌癥,放化療及手術(shù)治療史。所有入選患者均經(jīng)大醫(yī)院病理科病理組織證實(shí)明確,患者均簽署知情同意書,行2—3療程以鉑類為基礎(chǔ)的新輔助化療。2個(gè)療程后對(duì)35例患者進(jìn)行療效評(píng)估,其中25例為臨床有效組,10例為臨床無效組,收集新輔助化療后的宮頸組織標(biāo)本,進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色檢測臨床有效組及無效組組織切片中EGFL7的表達(dá)差異。利用在線數(shù)據(jù)庫對(duì)EGFL7的基因調(diào)控網(wǎng)絡(luò)進(jìn)行分析,預(yù)測其可能的上游調(diào)控分子:microRNA-126。培養(yǎng)鉑類耐藥細(xì)胞株HeLa/DDP及親代細(xì)胞株HeLa,顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)差異,檢測兩組細(xì)胞的順鉑半數(shù)抑制濃度(IC50),然后分別進(jìn)行細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞凋亡實(shí)驗(yàn)檢測細(xì)胞的增殖、凋亡、侵襲和轉(zhuǎn)移。細(xì)胞免疫組織化學(xué)和蛋白印跡實(shí)驗(yàn)檢測兩組細(xì)胞中EGFL7蛋白的表達(dá)。通過qRT-PCR檢測兩組細(xì)胞中miR-126及EGFL7的mRNA表達(dá)水平,進(jìn)行獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)和person相關(guān)性分析。結(jié)果:1.新輔助化療臨床無效組化療后EGFL7的表達(dá)與臨床有效組相比明顯上調(diào)(P0.05),EGFL7蛋白在鉑類耐藥細(xì)胞株HeLa/DDP中表達(dá)顯著高于在親代HeLa細(xì)胞中的表達(dá)(P0.05)。2.與HeLa細(xì)胞株比較,HeLa/DDP細(xì)胞的IC50明顯升高(P0.05),轉(zhuǎn)移性增高(P0.05),侵襲性增強(qiáng)(P0.05);一定順鉑濃度作用后HeLa/DDP細(xì)胞凋亡率顯著低于親代HeLa細(xì)胞(P0.05),無藥物干預(yù)下其增殖速度低于親代HeLa細(xì)胞。3.qRT-PCR結(jié)果表明,與HeLa細(xì)胞相比,HeLa/DDP細(xì)胞中EGFL7及miR-126的mRNA表達(dá)顯著升高(P0.05)。4.相關(guān)性分析表明,miR-126與EGFL7的mRNA表達(dá)具有顯著相關(guān)性(r=0.992,P0.05)。結(jié)論:1.臨床化療無效組組織內(nèi)EGFL7的表達(dá)明顯較高,提示與耐藥相關(guān)。2.EGFL7和miR-126在鉑類耐藥HeLa/DDP細(xì)胞中的表達(dá)升高。miR-126與EGFL7在耐藥細(xì)胞株HeLa/DDP及HeLa細(xì)胞株中的表達(dá)具有相關(guān)性。
【學(xué)位單位】：山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類】：R737.33
【文章目錄】：
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前言
第一部分 EGFL7在行NACT的LACC患者宮頸癌組織中的表達(dá)和意義
    1 材料與方法
        1.1 一般資料
        1.2 實(shí)驗(yàn)方法
        1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
    2 結(jié)果
    3 討論
    4 結(jié)論
第二部分 在線工具預(yù)測與EGFL7相關(guān)的microRNA
    1 方法
        1.1 在線數(shù)據(jù)庫預(yù)測與EGFL7相關(guān)的mircroRNA
    2 結(jié)果
        2.1 在線數(shù)據(jù)庫預(yù)測與EGFL7相關(guān)的microRNA
    3 討論
    4 結(jié)論
第三部分 耐藥細(xì)胞株Hela/DDP和親代細(xì)胞株HeLa中 microRNA-126及EGFL7 的表達(dá)和意義
    1 材料與方法
        1.1 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞
        1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
        1.3 實(shí)驗(yàn)主要設(shè)備
        1.4 實(shí)驗(yàn)方法
        1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
    2 結(jié)果
    3 討論
    4 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
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