發(fā)布時間：2017-04-04 23:14

  本文關(guān)鍵詞：miR-568靶向CDK4對宮頸癌Hela細胞生長增殖的影響，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:研究宮頸癌中miR-568與細胞周期依賴性激酶4(CDK4)之間的關(guān)系,分析CDK4是否是miR-568的靶基因,探討miR-568靶向CDK4抑制宮頸癌Hela細胞生長增殖的分子機制。方法:首先通過生物信息學(xué)方法,發(fā)現(xiàn)20個miRNAs可能是CDK4的潛在靶miRNAs;進一步計算分析后發(fā)現(xiàn),miR-568是CDK4的最佳結(jié)合靶miRNA。在重組細胞株Hela-miR-568 mimics、Hela-miR-Scramble、Hela-miR-568 inhibitors以及Hela中,q RT-PCR檢測miR-568的表達,western blot檢測CDK4、Cyclin D1的表達,分析miR-568是否與CDK4結(jié)合;細胞計數(shù)方法繪制四個細胞株的生長曲線,細胞倍增時間,流式細胞技術(shù)檢測細胞周期分布。結(jié)果:(1)生物信息學(xué)方法發(fā)現(xiàn)與CDK4結(jié)合的靶miRNAs有20個;其中,miR-568是與CDK4的結(jié)合穩(wěn)定性最好,特異性最強的靶miRNA。(2)Hela-miR-568 mimics較Hela、Hela-miR-Scramble的細胞生長速度明顯減慢,Hela-miR-568 inhibitors較Hela、Hela-miR-Scramble的細胞生長速度明顯增加。Hela、Hela-miR-Scramble、Hela-miR-568 inhibitors、Hela-miR-568 mimics細胞生長的倍增時間分別為16小時、16小時、10小時、26小時。(3)Hela-miR-568 inhibitors細胞株中miR-568表達水平下調(diào)后,導(dǎo)致CDK4表達水平增高,Cyclin D1的蛋白水平也上調(diào);Hela-miR-568 mimics細胞株中miR-568表達水平增高,而CDK4蛋白水平下調(diào),Cyclin D1的蛋白水平也下調(diào);而Hela和Hela-miR-Scramble比較,miR-568、CDK4、Cyclin D1表達均無明顯差異。(4)Hela-miR-568 inhibitors的G1、S期細胞百分比高于Hela-miR-Scramble,而G2/M期低于Hela-miR-Scramble,差異比較均有顯著性意義(P0.05);Hela-miR-568 mimics的G1、S期細胞百分比低于Hela-miR-Scramble,而G2/M期高于Hela-miR-Scramble,差異均有顯著性意義(P0.05)。結(jié)論:(1)CDK4是miRNA-568的下游靶基因。(2)miRNA-568靶向CDK4,下調(diào)Cyclin D1的表達,抑制宮頸癌Hela細胞的生長和增殖。
【關(guān)鍵詞】：miRNA 宮頸癌 生長與增殖 CDK4 Cyclin D1
【學(xué)位授予單位】：南華大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R737.33
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-8
• 主要縮略英文索引8-10
• 第1章 引言10-12
• 技術(shù)路線12-14
• 第2章 材料與方法14-18
• 2.1 材料14-15
• 2.2 實驗方法15-18
• 第3章 結(jié)果18-24
• 討論24-28
• 結(jié)論28-30
• 參考文獻30-36
• 綜述 MicroRNA在宮頸癌中的研究進展36-52
• 綜述參考文獻46-52
• 作者攻讀學(xué)位期間公開發(fā)表的論文52-54
• 致謝54

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本文編號：286075