目的:通過檢測高甲基化SIM2基因來分析游離胎兒DNA在正常妊娠孕婦及子癇前期孕婦外周血漿中含量的變化。方法:共收集114例外周血漿樣本(包括健康未妊娠女性志愿者10例,產(chǎn)后48小時健康女性10例,正常妊娠孕婦57例,子癇前期孕婦37例),利用HpaⅡ、MspⅠ分別對提取的血漿DNA進行甲基化酶切反應(yīng)后再進行實時熒光定量PCR反應(yīng),相對定量法檢測高甲基化SIM2基因的含量。結(jié)果:①10例健康未妊娠女性志愿者及產(chǎn)后48小時健康女性外周血漿中均未檢測出高甲基化SIM2基因;②57例正常妊娠孕婦中有43例檢測出高甲基化SIM2基因,在不同妊娠階段高甲基化SIM2基因含量的差異有統(tǒng)計學(xué)意義,高甲基化SIM2基因的含量在中期妊娠是早期妊娠的2.33倍,晚期妊娠是早期妊娠的5.28倍;③37例子癇前期孕婦中有36例檢出高甲基化SIM2基因,高甲基化SIM2基因的含量在輕度子癇前期孕婦血漿中是正常晚期妊娠的3.05倍,在重度子癇前期孕婦中是正常晚期妊娠的6.32倍。結(jié)論:高甲基化SIM2基因是可靠的胎兒特異性標記,在孕婦外周血漿中高甲基化SIM2基因的含量隨妊娠進展而增加,與孕周有關(guān)。高甲基化SIM2基因在子癇前期孕婦血漿中含量明顯增加,能夠反應(yīng)子癇前期疾病的嚴重程度。
【文章目錄】：
1 資料與方法
    1.1 研究對象
    1.2 方法
        1.2.1 樣本收集及血漿DNA的提取
        1.2.2 血漿DNA的甲基化酶切處理
        1.2.3 引物的設(shè)計與合成
        1.2.4 實時熒光定量PCR反應(yīng)
        1.2.5 Delta-delta Ct法相對定量分析
    1.3 統(tǒng)計學(xué)處理
2 結(jié)果
    2.1 陰性對照組
    2.2 PCR產(chǎn)物凝膠電泳
    2.3 正常妊娠組
    2.4 子癇前期組
3 討論
    3.1 無創(chuàng)產(chǎn)前診斷進展
    3.2 SIM2基因的選擇及特點
    3.3 實驗結(jié)果分析
        3.3.1 高甲基化SIM2基因與不同孕周正常妊娠
        3.3.2 高甲基化SIM2基因與子癇前期

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