發(fā)布時間：2020-10-11 02:57

　　 目的:通過對胚胎早期停育患者(胚胎停育組)和正常早期妊娠婦女(正常妊娠組)的絨毛組織中細(xì)胞凋亡情況進(jìn)行檢測,同時以標(biāo)記分子Caspase3、標(biāo)記分子Caspase7對胚胎早期停育患者(胚胎停育組)和正常早期妊娠婦女(正常妊娠組)的絨毛組織中細(xì)胞凋亡情況進(jìn)行檢測,探討Caspase3和Caspase7蛋白在停育胚胎絨毛組織中的表達(dá)意義。方法:選取2017年02月至2019年01月于皖南醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院弋磯山醫(yī)院及皖南醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院人流室收集的確診為早期胚胎停育行人工流產(chǎn)術(shù)的胚胎絨毛組織21例,作為胚胎停育組;同時期正常早期妊娠要求行人工流產(chǎn)術(shù)終止妊娠的胚胎絨毛組織21例,作為正常妊娠組。運用HE染色法結(jié)合光學(xué)顯微鏡對兩組絨毛組織進(jìn)行鏡下觀察;TUNEL法對兩組絨毛組織進(jìn)行凋亡實驗;免疫組織化學(xué)-SP法對caspase3和caspase7的表達(dá)進(jìn)行定位;蛋白質(zhì)免疫印跡法(Western blot)對兩組絨毛組織的caspase3、caspase7的表達(dá)做定量分析。結(jié)果:1.兩組妊娠婦女的年齡、月經(jīng)周期、妊娠天數(shù)、孕次未發(fā)現(xiàn)統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05)。2.HE染色:正常妊娠組的絨毛組織鏡下結(jié)構(gòu)清晰,易于辨認(rèn),細(xì)胞排列整齊。胚胎停育組絨毛組織鏡下結(jié)構(gòu)較清晰,細(xì)胞排列稍紊亂。3.TUNEL法:凋亡細(xì)胞分布于絨毛滋養(yǎng)層細(xì)胞間和/或間質(zhì)內(nèi)。正常妊娠組的絨毛內(nèi)著色較少,分布于絨毛滋養(yǎng)層細(xì)胞間;胚胎停育組絨毛內(nèi)成片著色,顏色較深,明顯多于正常妊娠組,分布于絨毛滋養(yǎng)層細(xì)胞間和間質(zhì)內(nèi)。4.免疫組織化學(xué)-SP法:兩組標(biāo)本Caspase3蛋白的表達(dá):(正常妊娠組:0.29±0.05,胚胎停育組:0.59±0.07,P0.05),Caspase7蛋白的表達(dá)也有統(tǒng)計學(xué)差異(正常妊娠組:0.22±0.04,胚胎停育組:0.32±0.08,P0.05)。5.Western blot:胚胎停育組絨毛組織中Caspase3蛋白(0.033±0.003)及Caspase7蛋白(0.023±0.004)的表達(dá)明顯高于正常妊娠組Caspase3蛋白(0.023±0.002)及Caspase7蛋白(0.014±0.002)的表達(dá),差異有統(tǒng)計學(xué)區(qū)別(P0.05)。結(jié)論:1.Caspase3可能通過凋亡路徑參與了對早期胚胎停止發(fā)育的調(diào)控。2.Caspase7可能通過凋亡路徑參與了對早期胚胎停止發(fā)育的調(diào)控。3.Caspase3和Caspase7或可作為早期妊娠期間篩查胚胎停止發(fā)育病因的分子標(biāo)記物。4.由于胚胎停止發(fā)育的病因復(fù)雜,有必要進(jìn)一步研究以期為將來臨床診療提供依據(jù)。
【學(xué)位單位】：皖南醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類】：R714.21
【部分圖文】：

1表 1 兩組患者的一般資料比較指標(biāo) 正常妊娠組（n=21） 胚胎停育組（n=21）年齡（y± x） 28.90±6.29 29.95±4.04月經(jīng)周期（d± x） 29.60±0.89 29.95±0.22妊娠天數(shù)（d± x） 56.86±6.08 59.29±5.64孕次（f） 1.86±0.57 2.14±0.91與正常妊娠組相比，P 均大于 0.05HE 染色正常妊娠組的絨毛組織鏡下結(jié)構(gòu)清晰，易于辨認(rèn)，細(xì)胞排列整齊。胚胎停毛組織鏡下結(jié)構(gòu)較清晰，細(xì)胞排列稍紊亂。見圖 1，圖 2

1表 1 兩組患者的一般資料比較指標(biāo) 正常妊娠組（n=21） 胚胎停育組（n=21）年齡（y± x） 28.90±6.29 29.95±4.04月經(jīng)周期（d± x） 29.60±0.89 29.95±0.22妊娠天數(shù)（d± x） 56.86±6.08 59.29±5.64孕次（f） 1.86±0.57 2.14±0.91與正常妊娠組相比，P 均大于 0.05HE 染色正常妊娠組的絨毛組織鏡下結(jié)構(gòu)清晰，易于辨認(rèn)，細(xì)胞排列整齊。胚胎停毛組織鏡下結(jié)構(gòu)較清晰，細(xì)胞排列稍紊亂。見圖 1，圖 2

皖南醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文TUNEL 細(xì)胞凋亡檢測結(jié)果顯示兩組絨毛組織中均存在細(xì)胞凋亡。凋亡細(xì)胞著色深，為棕黃色，胞質(zhì)致密，染色質(zhì)邊集。正常妊娠組偶見少許凋亡細(xì)胞，分布于絨毛滋養(yǎng)層細(xì)胞間。胚胎停育組絨毛組織凋亡細(xì)胞明顯增多，不均勻地分布于滋養(yǎng)層細(xì)胞和間質(zhì)細(xì)胞間。見圖 3，圖 4用ImageJ軟件對兩組絨毛組織細(xì)胞的凋亡情況進(jìn)行分析，結(jié)果用IOD值表示。可見胚胎停育組絨毛組織細(xì)胞凋亡程度明顯強(qiáng)于正常絨毛組織，差異有統(tǒng)計學(xué)意義，（P＜0.05）。見表 23 TUNEL 法
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