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MicroRNA-33a靶向Twist1調(diào)節(jié)宮頸癌細(xì)胞的侵襲

發(fā)布時(shí)間:2020-10-11 00:16
   目的:研究轉(zhuǎn)錄因子Twist1在宮頸癌組織中的表達(dá)及其在宮頸癌細(xì)胞進(jìn)展過(guò)程中的作用。方法:免疫組織化學(xué)檢測(cè)32對(duì)臨床宮頸癌組織及正常宮頸組織中Twist1的表達(dá)情況,并運(yùn)用RNA干擾技術(shù)沉默宮頸癌He La細(xì)胞內(nèi)Twist1后檢測(cè)細(xì)胞的侵襲能力以及侵襲相關(guān)基因表達(dá)的變化;采用Pearson相關(guān)性檢驗(yàn)分析Twist1與micro RNA-33a(mi R-33a)在宮頸癌組織內(nèi)的關(guān)系,并分析mi R-33a對(duì)Twist1的調(diào)節(jié)關(guān)系及其對(duì)細(xì)胞侵襲能力的影響。結(jié)果:Twist1在宮頸癌組織和正常宮頸組織中表達(dá)的陽(yáng)性率分別為75.0%(24/32)和21.9%(7/32),二者表達(dá)差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);Twist1 sh RNA能顯著減低He La細(xì)胞的體外侵襲能力。宮頸癌組織中mi R-33a的表達(dá)較正常組織減低(P0.05),并與Twist1呈負(fù)相關(guān)(r=-0.661,P0.05);而宮頸癌細(xì)胞內(nèi)過(guò)表達(dá)mi R-33a可減低Tiwst1的表達(dá)(P0.05),并減弱細(xì)胞的體外侵襲能力。結(jié)論:Twist1在宮頸癌的侵襲轉(zhuǎn)移過(guò)程中發(fā)揮著重要的作用,mi R-33a為上游調(diào)控Twist1的表達(dá)及細(xì)胞侵襲能力的抑癌基因。
【文章目錄】:
1材料與方法
    1.1試劑與儀器
    1.2標(biāo)本收集與細(xì)胞培養(yǎng)
    1.3免疫組織化學(xué)染色
    1.4質(zhì)粒與細(xì)胞轉(zhuǎn)染
    1.5 Mi RNA mimics干預(yù)細(xì)胞
    1.6 RT-PCR
    1.7 Western印跡
    1.8 Transwell體外侵襲實(shí)驗(yàn)
    1.9統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
2結(jié)果
    2.1轉(zhuǎn)錄因子Twist1高表達(dá)于宮頸癌組織
    2.2 sh RNA抑制He La細(xì)胞Twist1 m RNA和蛋白的表達(dá)
    2.3 Twist1 sh RNA抑制He La細(xì)胞體外侵襲能力
    2.4 mi R-33a與Twist1在宮頸癌組織內(nèi)的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)
    2.5 mi R-33a通過(guò)抑制Twist1來(lái)調(diào)節(jié)宮頸癌細(xì)胞的侵襲
3討論

【共引文獻(xiàn)】

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本文編號(hào):2835751

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