發(fā)布時間：2020-09-27 07:20

　　 目的：本論文通過對人類精子進行自發(fā)頂體反應率的檢測,并探討精子自發(fā)頂體反應率與ART結局相關性關系的前瞻性研究,包括自發(fā)頂體反應率與AI結局(夫精IUI妊娠率、供精ICI妊娠率)、IVF結局(夫精IVF受精率、供精IVF受精率)的相關性關系探討,期待確定精子自發(fā)頂體反應的檢測是否具有真正意義的臨床預測性,建立一套自發(fā)頂體反應檢測的評估體系,通過評估精子自發(fā)頂體反應率,提高預測樣本生育力的準確性,為進行ART治療的夫婦在選擇正確的治療方案提供一定的臨床指導意義。 方法：選取我院接受AI(夫精IUI、供精ICI)、IVF(夫精IVF、供精IVF)治療的不孕夫婦,其夫精精液、供精精液經(jīng)精液制備處理后,取微量精液通過FITC-PSA熒光染色,×400熒光顯微鏡下至少計數(shù)200個精子分別檢測自發(fā)頂體反應率。隨后根據(jù)分別符合夫精IUI、供精ICI、夫精IVF、供精IVF治療指征的不孕不育夫婦臨床病例資料選擇納入研究的對象組,使用統(tǒng)計軟件SPSS16.0對精子自發(fā)頂體反應率與精液各參數(shù)、ART臨床結局進行相關性分析,使用ROC曲線分析篩選出各研究對象組中對臨床治療方案選擇有指導意義的最佳閾值,期待建立一套自發(fā)頂體反應檢測的參考值體系。本研究已申報倫理審查并已獲倫理委員會批準,批件號：LL-SC-SG-2013-014。 結果：(1)接受夫精IUI治療的不孕不育夫婦,夫精精子自發(fā)頂體反應率與精液處理前后密度、精液處理前后(C+D)級精子數(shù)正相關,與精液處理前后活率負相關。(2)接受夫精IVF治療的不孕不育夫婦,ROC曲線分析篩選出診斷低受精率(IVF卵母細胞受精率50%)的夫精精子自發(fā)頂體反應率的最佳閾值為4.4%,夫精精子自發(fā)頂體反應率與精子正常形態(tài)率、精液處理前密度、精液處理前活率、精液處理前前向運動精子百分率、精液處理前后A級精子百分率、精液處理前B級精子百分率負相關,精液處理前C級精子百分率、精液處理前D級精子百分率正相關。(3)接受供精IVF治療的不孕不育夫婦,供精精子經(jīng)雙層密度梯度離心制備處理后,ROC曲線分析篩選出診斷低受精率的供精精子自發(fā)頂體反應率的最佳閾值為17.62%,自發(fā)頂體反應率與精液處理后密度、IVF受精率負相關；供精精子經(jīng)微量密度梯度離心制備處理后,ROC曲線分析篩選出診斷低受精率的供精精子自發(fā)頂體反應率的最佳閾值為25.36%,自發(fā)頂體反應率(按25.36,≥25.36)進行分組,兩組間IVF受精率有顯著性差異。(4)接受供精ICI治療的不孕不育夫婦,精子自發(fā)頂體反應率與冷凍復蘇率正相關。(5)精液經(jīng)上游法制備處理后檢測的自發(fā)頂體反應率顯著低于雙層密度梯度離心。 結論：(1)對接受夫精IUI、供精ICI治療的不孕不育夫婦,精子自發(fā)頂體反應率對臨床妊娠的預測價值仍需進一步研究驗證。(2)對夫精IVF、供精IVF治療的不孕不育夫婦,雖然ROC曲線分析給出cut-off值,但兩組間IVF受精率均大于70%,對決定臨床治療方案指導意義不大。(3)不同的精液制備方法、冷凍損傷對精子自發(fā)頂體反應率有一定影響。
【學位單位】：中南大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2014
【中圖分類】：R714.8
【部分圖文】：

每張涂片添加一滴1滴焚光封固液，對精子涂片焚光進行封固。在激發(fā)光450-490nm，x400倒置焚光顯微鏡下觀察結果，每張精子涂片根據(jù)不同精子分類至少計數(shù)200個精子，每份精子標本重復計數(shù)兩張精子涂片，計算自發(fā)頂體反應率。(7)結果判定與計算：根據(jù)X400焚光光學顯微下觀察結果，并拍照記錄染色效果。精子分為兩類：1、頂體完整(AI):精子頭部一半以上發(fā)明亮的均勻的焚光2、頂體反應(AR):分為3種類型，包括頂體區(qū)斑點狀著色、僅赤道帶出現(xiàn)焚光、頂體區(qū)無焚光著色(包括精子表面沒有焚光、僅頂體后區(qū)有焚光兩種類型）。3、自發(fā)頂體反應率（％)=(發(fā)生自發(fā)AR的精子數(shù)/被觀察顯微鏡下所計精子總數(shù)）XI00%2結果2.1 X400焚光顯微鏡下精子自發(fā)頂體反應辨別標準

圖4三號樣本FITC-PSA焚光染色圖片a:頂體完整精子（AI);b:頂體反應精子（AR); d:頂體反應精子（AR)2.3數(shù)據(jù)統(tǒng)計結果統(tǒng)計分析：使用SPSS 16.0統(tǒng)計軟件，組間連續(xù)性變量的比較采用t檢驗，分類資料采用卡方檢驗2.3.1精液處理前各參數(shù)均值在我院門診進行相關精液檢查不育男性，按照WHO第5版《人類精液檢驗與處理實驗室手冊標準》，精液體積、密度、活力正常精液標本共40份，精液處理前各參數(shù)均值見表1。

6.49±3.50%, 9.94±4.88%,具有極顯著性差異（PCO.Ol)，見表2，不同精液制備方法精子自發(fā)AR率比較條形圖見圖5。 表2上游法與密度梯度離心處理后精子自發(fā)頂體反應率比較 精液制備處理方法 + P值 上游法 雙層密度梯度離心 精子自發(fā) AR 率（％) 6,49±3.50 9.94±4.88 0.007****P<0.0110 00- I 8,00-f. I 1卩 6 00->73八^ 4 00-200-。00_1 1 , 1 1 1 1 *個袖液制各Jj fk圖5不同精液制備方法精子自發(fā)AR率比較10

【參考文獻】

相關期刊論文 前8條

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本文編號：2827585